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人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)小鼠皮膚創(chuàng)面愈合的實驗研究

發(fā)布時間:2017-06-28 23:07

  本文關(guān)鍵詞:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)小鼠皮膚創(chuàng)面愈合的實驗研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:研究hUC-MSCs局部移植對小鼠全層皮膚切除創(chuàng)面愈合的影響,為hUC-MSCs用于皮膚創(chuàng)面治療提供理論依據(jù)。方法:采用組織塊貼壁法進(jìn)行hUC-MSCs的分離和培養(yǎng),流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞免疫表型,并作誘導(dǎo)向成骨、成脂細(xì)胞方向分化。用CM-Dil對hUC-MSCs進(jìn)行體外標(biāo)記,觀察標(biāo)記后細(xì)胞生物學(xué)特征,MTT法檢測CM-Dil標(biāo)記后hUC-MSCs增殖能力的變化。采用BALB/c小鼠建立全層皮膚缺損創(chuàng)面模型,隨機(jī)分為hUC-MSCs組和PBS組,分別于創(chuàng)周注射hUC-MSCs懸液和PBS液。分別于術(shù)后3、7、14 d觀察創(chuàng)面的愈合情況,HE染色檢測病理學(xué)改變,免疫組織化學(xué)檢測VEGF和CD34的表達(dá),免疫熒光檢測hUC-MSCs在創(chuàng)面的蹤跡及創(chuàng)面細(xì)胞增殖情況,Western blot檢測創(chuàng)面VEGF蛋白的表達(dá)。結(jié)果:組織塊貼壁法可快速分離出大量有生物學(xué)活性的hUC-MSCs,流式細(xì)胞術(shù)檢測提示所培養(yǎng)的細(xì)胞為hUC-MSCs,并且體外可被誘導(dǎo)向成骨、成脂方向分化。CM-Dil能有效的標(biāo)記hUC-MSCs,標(biāo)記率為(95.90±1.79)%,連續(xù)傳代培養(yǎng)至15 d后標(biāo)記率仍達(dá)(87.90±1.90)%,MTT檢測發(fā)現(xiàn)CM-Dil標(biāo)記對hUC-MSCs的增殖能力無影響。hUC-MSCs組創(chuàng)面愈合率在各時間點均較PBS組明顯增高(P0.05)。病理學(xué)顯示hUC-MSCs組創(chuàng)面愈合質(zhì)量優(yōu)于PBS組。免疫組化顯示hUC-MSCs組創(chuàng)面VEGF在3 d表達(dá)最多,7、14 d逐漸減少,但均較PBS組增高。hUC-MSCs組創(chuàng)面血管數(shù)目在3、7 d均顯著高于PBS組(P0.05),但在14 d兩組創(chuàng)面血管數(shù)目無顯著差異(P0.05)。免疫熒光顯示CM-Dil陽性細(xì)胞3 d時最多,7 d略減少(P0.05),而在14 d時明顯減少(P0.05),hUC-MSCs組創(chuàng)面新生表皮中BrdU陽性細(xì)胞率7、14 d均較PBS組增加(P0.05),創(chuàng)面肉芽組織中BrdU陽性細(xì)胞率在3、7 d都較PBS組增加(P0.05),而在14 d兩組比較無顯著差異(P0.05)。Western blot顯示hUC-MSCs組3、7、14 d創(chuàng)面VEGF蛋白表達(dá)均顯著高于PBS組(P0.05)。結(jié)論:hUC-MSCs局部移植可在小鼠體內(nèi)存活,并通過增強(qiáng)皮膚創(chuàng)面VEGF的表達(dá),促進(jìn)創(chuàng)面血管生成和細(xì)胞增殖從而加快皮膚創(chuàng)面的修復(fù)愈合。
【關(guān)鍵詞】:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 皮膚創(chuàng)面 愈合 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R641
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照4-5
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-10
  • 前言10-12
  • 1 材料與方法12-20
  • 2 結(jié)果20-26
  • 3 討論26-29
  • 全文總結(jié)29-30
  • 參考文獻(xiàn)30-34
  • 文獻(xiàn)綜述34-45
  • 參考文獻(xiàn)38-45
  • 致謝45-46
  • 攻讀碩士期間發(fā)表的論文46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李仙松;杜娟;宋振嵐;李偉平;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞重建表皮細(xì)胞及皮膚附件[J];中國組織工程研究;2014年06期

2 馬廉;崔冰琳;馮學(xué)永;羅敏潔;蔣學(xué)武;楊立業(yè);謝慶東;黃天華;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的研究[J];中華兒科雜志;2006年07期

3 張麗蓉,陳振光,項鵬,夏文杰,張秀明,李艷,李樹濃;成人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞基本生物學(xué)特性[J];中山醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2002年03期


  本文關(guān)鍵詞:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)小鼠皮膚創(chuàng)面愈合的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:495628

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