本文關(guān)鍵詞：YAP在大鼠不同節(jié)段髓核細(xì)胞中的表達(dá)初探，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討大鼠不同節(jié)段髓核細(xì)胞中YAP的表達(dá)情況；觀察不同細(xì)胞密度下YAP信號(hào)通路激活情況；在體外模擬椎間盤血清剝奪的微環(huán)境下YAP的表達(dá)情況。方法：1、體外連續(xù)傳代、培養(yǎng)SD大鼠正常的腰椎髓核細(xì)胞、尾椎髓核細(xì)胞；觀察P0代腰椎髓核.細(xì)胞中不同形態(tài)髓核細(xì)胞的增殖情況；2、分別培養(yǎng)至P3代,觀察各髓核細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；3、免疫熒光法觀察P3代腰椎髓核細(xì)胞中YAP的表達(dá)；4、各髓核細(xì)胞在P3代時(shí),同時(shí)對(duì)50%融合狀態(tài)下腰椎髓核細(xì)胞(A組),90%融合狀態(tài)下腰椎髓核細(xì)胞(B組),50%融合狀態(tài)下尾椎髓核細(xì)胞(C組),90%融合狀態(tài)下尾椎髓核細(xì)胞(D組),共四組細(xì)胞行RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中YAP的表達(dá)差異；5、同時(shí)對(duì)步驟4中50%及90%融合狀態(tài)下的腰椎髓核細(xì)胞與尾椎髓核細(xì)胞的細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)行Western-blot檢測(cè),依次命名An、Ac、Bn、Bc、Cn、Cc、Dn、Dc,對(duì)比YAP表達(dá)差異；6、尾椎髓核細(xì)胞正常傳代至P3代后,予以營(yíng)養(yǎng)剝奪,用不含血清的培養(yǎng)液培養(yǎng),10天后對(duì)含血清的髓核細(xì)胞與不含血清的髓核細(xì)胞行Western-blot檢測(cè)YAP蛋白表達(dá)情況,進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果：1、不同髓核細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)周期不同,提示增殖情況不一,其中腰椎髓核細(xì)胞培養(yǎng)周期較尾椎髓核細(xì)胞增殖周期長(zhǎng)；P0代髓核細(xì)胞中存在不同形態(tài)的細(xì)胞,腰椎以短梭形或多角形為主,尾椎以圓形或橢圓形為主；隨著傳代次數(shù)的增多,部分髓核細(xì)胞向長(zhǎng)梭形轉(zhuǎn)變；P0代尾椎髓核細(xì)胞中存在內(nèi)含大空泡的脊索樣髓核細(xì)胞；2、P3代腰椎髓核細(xì)胞在低密度接觸時(shí),免疫熒光法檢測(cè)提示細(xì)胞核中高表達(dá)YAP蛋白；高密度接觸時(shí),提示細(xì)胞漿高表達(dá)YAP蛋白；3、RT-PCR檢測(cè)50%及90%融合狀態(tài)下的腰椎髓核細(xì)胞和尾椎髓核細(xì)胞中YAP的表達(dá),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,B組YAP表達(dá)較A組減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；C組YAP表達(dá)較A組稍增多,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；B組YAP表達(dá)較D組稍減少,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異：C組YAP表達(dá)較D組增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4、Western-blot檢測(cè)提示腰椎髓核細(xì)胞與尾椎髓核細(xì)胞在50%融合狀態(tài)下的核內(nèi)YAP表達(dá)較90%融合狀態(tài)下表達(dá)高,胞質(zhì)表達(dá)低,其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5、營(yíng)養(yǎng)剝奪組尾椎髓核細(xì)胞總YAP表達(dá)較正常組表達(dá)減少。結(jié)論：1、髓核細(xì)胞中存在YAP蛋白的表達(dá)；2、尾椎髓核細(xì)胞較腰椎髓核細(xì)胞生長(zhǎng)更加迅速,但其YAP表達(dá)無(wú)差異；3、細(xì)胞接觸與營(yíng)養(yǎng)剝奪引起髓核細(xì)胞YAP信號(hào)的抑制或核質(zhì)分布表達(dá)差異。
【關(guān)鍵詞】：尾椎 腰椎 髓核細(xì)胞 細(xì)胞增殖 YAP
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R681.5
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮略語(yǔ)名詞對(duì)照表10-13
• 前言13-15
• 第一章：文獻(xiàn)綜述15-21
• 第二章：材料與方法21-33
• 第三章：實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-38
• 第四章：討論38-42
• 第五章：結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 致謝49-50
• 作者簡(jiǎn)介50

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