本文關(guān)鍵詞：YAP在大鼠不同節(jié)段髓核細(xì)胞中的表達(dá)初探，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討大鼠不同節(jié)段髓核細(xì)胞中YAP的表達(dá)情況；觀察不同細(xì)胞密度下YAP信號通路激活情況；在體外模擬椎間盤血清剝奪的微環(huán)境下YAP的表達(dá)情況。方法：1、體外連續(xù)傳代、培養(yǎng)SD大鼠正常的腰椎髓核細(xì)胞、尾椎髓核細(xì)胞；觀察P0代腰椎髓核.細(xì)胞中不同形態(tài)髓核細(xì)胞的增殖情況；2、分別培養(yǎng)至P3代,觀察各髓核細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化；3、免疫熒光法觀察P3代腰椎髓核細(xì)胞中YAP的表達(dá)；4、各髓核細(xì)胞在P3代時,同時對50%融合狀態(tài)下腰椎髓核細(xì)胞(A組),90%融合狀態(tài)下腰椎髓核細(xì)胞(B組),50%融合狀態(tài)下尾椎髓核細(xì)胞(C組),90%融合狀態(tài)下尾椎髓核細(xì)胞(D組),共四組細(xì)胞行RT-PCR檢測細(xì)胞中YAP的表達(dá)差異；5、同時對步驟4中50%及90%融合狀態(tài)下的腰椎髓核細(xì)胞與尾椎髓核細(xì)胞的細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)行Western-blot檢測,依次命名An、Ac、Bn、Bc、Cn、Cc、Dn、Dc,對比YAP表達(dá)差異；6、尾椎髓核細(xì)胞正常傳代至P3代后,予以營養(yǎng)剝奪,用不含血清的培養(yǎng)液培養(yǎng),10天后對含血清的髓核細(xì)胞與不含血清的髓核細(xì)胞行Western-blot檢測YAP蛋白表達(dá)情況,進行對比。結(jié)果：1、不同髓核細(xì)胞在培養(yǎng)過程中培養(yǎng)周期不同,提示增殖情況不一,其中腰椎髓核細(xì)胞培養(yǎng)周期較尾椎髓核細(xì)胞增殖周期長；P0代髓核細(xì)胞中存在不同形態(tài)的細(xì)胞,腰椎以短梭形或多角形為主,尾椎以圓形或橢圓形為主；隨著傳代次數(shù)的增多,部分髓核細(xì)胞向長梭形轉(zhuǎn)變；P0代尾椎髓核細(xì)胞中存在內(nèi)含大空泡的脊索樣髓核細(xì)胞；2、P3代腰椎髓核細(xì)胞在低密度接觸時,免疫熒光法檢測提示細(xì)胞核中高表達(dá)YAP蛋白；高密度接觸時,提示細(xì)胞漿高表達(dá)YAP蛋白；3、RT-PCR檢測50%及90%融合狀態(tài)下的腰椎髓核細(xì)胞和尾椎髓核細(xì)胞中YAP的表達(dá),實驗結(jié)果顯示,B組YAP表達(dá)較A組減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；C組YAP表達(dá)較A組稍增多,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；B組YAP表達(dá)較D組稍減少,無統(tǒng)計學(xué)差異：C組YAP表達(dá)較D組增多,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4、Western-blot檢測提示腰椎髓核細(xì)胞與尾椎髓核細(xì)胞在50%融合狀態(tài)下的核內(nèi)YAP表達(dá)較90%融合狀態(tài)下表達(dá)高,胞質(zhì)表達(dá)低,其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。5、營養(yǎng)剝奪組尾椎髓核細(xì)胞總YAP表達(dá)較正常組表達(dá)減少。結(jié)論：1、髓核細(xì)胞中存在YAP蛋白的表達(dá)；2、尾椎髓核細(xì)胞較腰椎髓核細(xì)胞生長更加迅速,但其YAP表達(dá)無差異；3、細(xì)胞接觸與營養(yǎng)剝奪引起髓核細(xì)胞YAP信號的抑制或核質(zhì)分布表達(dá)差異。
【關(guān)鍵詞】：尾椎 腰椎 髓核細(xì)胞 細(xì)胞增殖 YAP
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R681.5
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮略語名詞對照表10-13
• 前言13-15
• 第一章：文獻(xiàn)綜述15-21
• 第二章：材料與方法21-33
• 第三章：實驗結(jié)果33-38
• 第四章：討論38-42
• 第五章：結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 致謝49-50
• 作者簡介50

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張麗;關(guān)曉明;馬迅;滿孝旭;趙勝;;人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因感染對人髓核細(xì)胞基本特性的影響[J];中國藥物與臨床;2013年S1期

2 李鋒;李光輝;陶鳳華;郭風(fēng)勁;許濤;潘峰;;兔髓核細(xì)胞誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為髓核細(xì)胞的研究[J];生物骨科材料與臨床研究;2006年06期

3 李旭;侯筱魁;湯亭亭;李惠武;郭剛;裴國獻(xiàn);;人轉(zhuǎn)化生長因子β_1重組腺病毒轉(zhuǎn)染傳代髓核細(xì)胞對細(xì)胞外基質(zhì)合成的影響[J];中國修復(fù)重建外科雜志;2007年12期

4 伊友明;陶鳳華;杜靜;潘峰;李鋒;;轉(zhuǎn)化生長因子-β1和胰島素樣生長因子-1對兔退變髓核細(xì)胞生物學(xué)活性的影響[J];華中醫(yī)學(xué)雜志;2009年03期

5 劉瑞平;徐南偉;;退變兔髓核細(xì)胞和正常髓核細(xì)胞生物學(xué)特性的比較[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2009年21期

6 梁偉國;葉冬平;戴麗冰;沈雁;;體外培養(yǎng)人正常椎間盤髓核細(xì)胞與退變髓核細(xì)胞的生物學(xué)性狀比較:可以為干預(yù)退變髓核細(xì)胞提供最佳時機嗎?[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2010年28期

7 王鋒;朱悅;;影響髓核細(xì)胞表達(dá)水通道蛋白1相關(guān)因素的實驗研究[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2011年06期

8 牛建鵬;衛(wèi)陳剛;任龍韜;;髓核細(xì)胞及其生物力學(xué)研究進展[J];臨床醫(yī)藥實踐;2011年08期

9 李鋒生;梁偉國;葉冬平;戴麗冰;陳鴻輝;;體外培養(yǎng)人退變髓核細(xì)胞的生物學(xué)性狀[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年28期

10 滿孝旭;馬迅;關(guān)曉明;張麗;;肝細(xì)胞生長因子對體外培養(yǎng)的人退變髓核細(xì)胞生物學(xué)活性影響[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2011年24期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙秀寶;馬信龍;馬劍雄;李稚君;李爽;孫曉雷;;周期性牽張力聯(lián)合灌注培養(yǎng)對大鼠髓核細(xì)胞影響的研究[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第30次學(xué)術(shù)年會暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會論文集[C];2010年

2 王會仁;董健;周曉崗;李熙雷;林紅;;人脂肪及骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞與髓核細(xì)胞非接觸共培養(yǎng)后的類髓核分化效應(yīng)研究[A];第十九屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2012年

3 李長青;周躍;羅剛;張傳志;;仿生髓核組織工程支架材料對體外培養(yǎng)髓核細(xì)胞合成代謝的影響[A];第八屆全國脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2007年

4 余磊;廖華;熊紹虎;;人髓核細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

5 梁偉國;葉冬平;戴麗冰;陳鴻輝;;BMP-2對人退變椎間盤髓核細(xì)胞影響的實驗研究[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復(fù)學(xué)術(shù)年會論文選集[C];2011年

6 梁偉國;葉冬平;戴麗冰;陳鴻輝;;bFGF對人退變椎間盤髓核細(xì)胞影響的實驗研究[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復(fù)學(xué)術(shù)年會論文選集[C];2011年

7 王海強;;CK8在退變椎間盤髓核細(xì)胞中的表達(dá)[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會脊柱醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會第六屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

8 葉冬平;梁偉國;戴麗冰;沈雁;;GFP-hTERT轉(zhuǎn)染人正常髓核細(xì)胞構(gòu)建永生化髓核細(xì)胞株的實驗研究[A];第20屆中國康協(xié)肢殘康復(fù)學(xué)術(shù)年會論文選集[C];2011年

9 李長青;周躍;羅剛;張傳志;;仿生髓核組織工程支架材料對體外培養(yǎng)髓核細(xì)胞生長增殖的影響[A];第八屆全國脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2007年

10 伍耀宏;徐寶山;李秀蘭;楊強;張楊;夏群;張春秋;許海委;;軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)多孔支架與山羊髓核細(xì)胞生物相容性研究[A];第十九屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 葉冬平;microRNA-155通過下調(diào)ERK1/2水平影響人正常椎間盤髓核細(xì)胞退變的實驗研究[D];暨南大學(xué);2015年

2 王崢;FOXC2和BMP-7在椎間盤退變性疾病中的作用及其機制的相關(guān)研究[D];吉林大學(xué);2016年

3 江維;SIRT1調(diào)控自噬對人椎間盤髓核細(xì)胞退變的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

4 陶軼卿;Ⅱ型膠原荷載成髓核細(xì)胞分化的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)椎間盤退變的體內(nèi)外研究[D];浙江大學(xué);2016年

5 王建喜;Caveolin-1通過Wnt/β-Catenin信號通路介導(dǎo)炎癥因子對髓核細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

6 蔡峰;酸敏感離子通道1a在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)退變椎間盤中的作用機制研究[D];東南大學(xué);2016年

7 高鋒;低強度脈沖超聲波促進人髓核細(xì)胞合成胞外基質(zhì)功能性成分的體外實驗研究[D];蘇州大學(xué);2011年

8 李喜功;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與退變髓核細(xì)胞體外共培養(yǎng)的實驗研究[D];蘇州大學(xué);2011年

9 張曉軍;低強度脈沖超聲對立體培養(yǎng)的人退變椎間盤髓核細(xì)胞的影響實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

10 馬凱歌;自噬參與壓力誘導(dǎo)的髓核細(xì)胞損傷及其機制研究[D];華中科技大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋鵬;高氧微環(huán)境刺激與細(xì)胞連續(xù)分裂在體外人髓核細(xì)胞老化中作用的初探[D];東南大學(xué);2015年

2 崔佳瞿;老化髓核細(xì)胞的致退變效應(yīng)及其機制的探索[D];東南大學(xué);2015年

3 孫灰灰;人老化髓核細(xì)胞的炎性因子表達(dá)變化分析[D];東南大學(xué);2015年

4 王祺;正常與退變髓核細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)Ⅱ型膠原蛋白的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

5 劉浠;椎間盤退變時髓核細(xì)胞中鋅指蛋白A20及相關(guān)炎癥因子的表達(dá)變化研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

6 曹進;慢病毒介導(dǎo)的MMP-3shRNA轉(zhuǎn)染對人退變髓核細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)[D];青島大學(xué);2016年

7 姜宏強;髓核細(xì)胞炎性因子分泌特性的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

8 毛幸;YAP在大鼠不同節(jié)段髓核細(xì)胞中的表達(dá)初探[D];東南大學(xué);2016年

9 徐遠(yuǎn);大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與髓核細(xì)胞體外共培養(yǎng)的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

10 衛(wèi)陳剛;正常和退變髓核細(xì)胞粘彈性的測量[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：YAP在大鼠不同節(jié)段髓核細(xì)胞中的表達(dá)初探，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：490597