本文關鍵詞：軟骨中硫化氫含量及其對白介素1β誘導的軟骨細胞基質金屬蛋白酶13表達的抑制作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究關節(jié)液及關節(jié)軟骨中硫化氫(hydrogen sulfide,H2S)及其合成酶的含量和變化,以及H2S對白介素1β(interlukin-1β,IL-1β)誘導的軟骨細胞人基質金屬蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)表達的影響。方法:收集在北京大學第一醫(yī)院行膝關節(jié)手術(關節(jié)鏡手術或膝關節(jié)置換術)患者的關節(jié)液及廢棄的關節(jié)軟骨,用亞甲基藍法檢測關節(jié)液H2S的含量;從廢棄的關節(jié)軟骨中分離出相對正常的軟骨細胞,用H2S分子探針方法檢測軟骨細胞中的內源性H2S,用免疫細胞化學方法檢測軟骨細胞中H2S合成酶胱硫醚-β-合成酶(cystathionine beta-synthase,CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine gamma-lyase,CSE)、巰基丙酮酸硫轉移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST);用Western blot法檢測H2S合成酶CBS、CSE、MPST在不同退變程度的軟骨組織中的含量。培養(yǎng)相對正常的人軟骨細胞至第三代,分為4組:(1)對照組:不加任何藥物;(2)IL-β組:單加5μg/L的IL-1β;(3)IL-1β+H2S組:提前0.5 h加200μmol/L的Na HS,再加5μg/L的IL-1β;(4)H2S組:單加200μmol/L的Na HS。Western blot法檢測各組細胞MMP-13蛋白、總核因子κB p65(nuclear factorκB p65,NF-κB p65)及磷酸化NF-κB p65蛋白的含量,Real-time PCR檢測各組細胞MMP-13基因的轉錄情況。結果:退變膝關節(jié)的關節(jié)液中H2S含量為(14.3±3.3)μmol/L,Outerbridge分級3級軟骨組織中CSE表達量顯著高于Outerbridge分級1級軟骨組織中的表達量(1.67±0.09 vs.1.26±0.11,P0.01),而CBS與MPST的表達量差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。IL-1β組MMP-13的表達較正常對照組明顯升高,且差異具有統(tǒng)計學意義(1.87±0.67 vs.0.22±0.10,P0.05),IL-1β+H2S組MMP-13的表達較IL-1β組明顯降低,且差異具有統(tǒng)計學意義(0.55±0.11 vs.1.87±0.67,P0.05),H2S組MMP-13的表達較正常對照組差異無統(tǒng)計學意義。Real-time PCR方法測量了藥物干預實驗中各組細胞MMP-13基因轉錄情況,結果顯示IL-1β組MMP-13基因轉錄較正常對照組明顯升高,且差異具有統(tǒng)計學意義(31.40±0.31 vs.1.00±0.00,P0.05),IL-1β+H2S組MMP-13基因轉錄較IL-1β組明顯降低,且差異具有統(tǒng)計學意義(24.41±1.28 vs.31.40±0.31,P0.05),H2S組MMP-13基因轉錄較正常對照組無顯著性變化。IL-1β組總p65含量較正常對照組明顯升高,且差異具有統(tǒng)計學意義(2.13±0.08 vs.0.73±0.08,P0.05),IL-1β+H2S組總p65含量較IL-1β組明顯降低,且差異具有統(tǒng)計學意義(1.24±0.13 vs.2.13±0.08,P0.05),H2S組總p65含量較正常對照組無顯著性變化;IL-1β組磷酸化p65含量較正常對照組明顯升高,且差異具有統(tǒng)計學意義(1.30±0.13 vs.0.19±0.04,P0.05),IL-1β+H2S組磷酸化p65含量較IL-1β組明顯降低,且差異具有統(tǒng)計學意義(0.92±0.26 vs.1.30±0.13,P0.05),H2S組磷酸化p65含量較正常對照組無顯著性變化。結論:H2S參與了軟骨退變,起到部分抑制細胞外基質降解酶MMP-13的作用,從而實現(xiàn)對軟骨細胞外基質的保護。
【作者單位】： 北京大學第一醫(yī)院骨科;北京大學第一醫(yī)院兒科;
【關鍵詞】： 硫化氫 骨關節(jié)炎 基質金屬蛋白酶 軟骨疾病
【分類號】：R684
【正文快照】： 退行性骨關節(jié)病(osteoarthritis,OA)是一種導致膝關節(jié)疼痛和功能障礙的退行性疾病,是60歲以上人群喪失勞動能力的主要原因之一[1]。關節(jié)軟骨退變是OA的主要特點之一,目前尚沒有一種能夠治愈OA的方法,終末期OA患者往往只能通過膝關節(jié)置換術來改善關節(jié)功能以提高生活質量。既往

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 肖春;靳雷;王鑫;顏世舉;韓康;張開亮;孫聰;裘秀春;范清宇;馬保安;;周期性靜水壓對人軟骨細胞活性的時間依賴性影響[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2014年01期

2 張嶺;李琪佳;趙季華;薛榮;甘洪全;劉英杰;王志強;;醫(yī)用多孔鉭材料復合大鼠軟骨細胞的生長特性及功能變化[J];解放軍醫(yī)學雜志;2014年06期

3 郭志紅;體外再生移植用軟骨[J];全球科技經(jīng)濟w

本文編號：476107