本文關(guān)鍵詞：ROS介導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化參與燒傷后肺損傷的機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：嚴重燒傷會導(dǎo)致機體內(nèi)環(huán)境發(fā)生劇烈變化,可對機體造成嚴重損害。創(chuàng)傷應(yīng)激,熱力的直接損害,組織灌注不足,以及全身炎癥反應(yīng),這種種刺激,使嚴重燒傷后,損害不僅僅局限于受損的皮膚,還影響體內(nèi)多種臟器的功能,產(chǎn)生多臟器功能障礙。嚴重燒傷后,多臟器功能不全發(fā)病率高達28.1%,一旦發(fā)生,難以逆轉(zhuǎn)。由于肺臟與外界環(huán)境直接相通,容易受到外界環(huán)境因素的侵襲,因此對嚴重燒傷患者,尤其是伴有吸入性損傷或基礎(chǔ)肺疾病的患者,肺損傷是燒傷后臟器損傷中最常見的損傷之一。多種因素參與了急性肺損傷的發(fā)病機制,其歸納起來主要分為兩大部分:細胞因素和體液因素。細胞因素包括活化的炎性細胞如中性粒細胞、巨噬細胞以及肺固有細胞如肺泡上皮細胞、血管內(nèi)皮細胞等。體液因素包括各種炎性介質(zhì)、細胞因子、氧化應(yīng)激等。嚴重燒傷后,可以激活其中的多種因素,對肺臟造成損傷。其中炎性細胞大量活化,合成和釋放一系列的炎性介質(zhì),從而導(dǎo)致強烈的全身炎癥反應(yīng),是燒傷誘導(dǎo)的肺損傷的重要原因。NLRP3炎癥小體是固有免疫的組成成分,是由多種蛋白組成的復(fù)合體。炎性小體能夠調(diào)節(jié)caspase-1的活化進而在天然免疫防御的過程中促進細胞因子前體pro-IL-1β和pro-IL-18的切割成熟,而IL-1β和IL-18是強有力的炎癥啟動因子,能夠促進炎癥反應(yīng)的發(fā)生。因此我們推測NLRP3炎癥小體在燒傷后肺損傷的發(fā)病過程中起著重要作用。故本研究通過體內(nèi)和體外實驗,探究了嚴重燒傷后NLRP3炎癥小體信號通路的表達及其對肺損傷的作用,并進一步研究了燒傷后NLRP3炎癥小體活化的機制。實驗方法:1.建立30%總體表面積嚴重燙傷大鼠肺損傷模型,并檢測燙傷后各時間點NLRP3、Caspase-1等炎癥小體信號在肺組織中的表達水平及IL-1β、IL-18等炎癥啟動因子在血清和肺組織中的表達,探討嚴重燒傷后NLRP3炎癥小體的活化情況并為后續(xù)實驗確定時間節(jié)點。2.通過腹腔注射NLRP3炎癥小體抑制劑BAY11-7082,觀察其對嚴重燙傷大鼠NLRP3炎癥小體信號通路活化的影響;通過觀察肺組織病理切片,肺損傷指標研究其對嚴重燙傷大鼠肺損傷的效應(yīng),探討NLRP3炎癥小體在嚴重燒傷后肺損傷中的作用。3.通過分離提取大鼠肺泡灌洗液中的肺泡巨噬細胞并用嚴重燒傷大鼠血清刺激來模擬燒傷后肺損傷的微環(huán)境,觀察燒傷血清刺激后肺泡巨噬細胞中NLRP3炎癥小體信號通路活化情況及ROS產(chǎn)生情況,探討嚴重燒傷后NLRP3炎癥小體活化的可能機制。4.通過使用ROS清除劑N-acetylcysteine,觀察燒傷血清刺激肺泡巨噬細胞后NLRP3炎癥小體信號通路活化情況,明確ROS在嚴重燒傷后NLRP3炎癥小體活化過程中的作用。主要結(jié)果:1.大鼠30%總體表面積燙傷后,肺組織中NLRP3、Caspase-1等炎癥小體信號及IL-1β、IL-18等炎癥啟動因子的基因和蛋白水平在燙傷后48h呈時間依賴性逐漸升高趨勢,并在24h或48h達到最高值。2.腹腔注射NLRP3炎癥小體抑制劑BAY11-7082后,嚴重燙傷大鼠肺組織中的NLRP3、Caspase-1等炎癥小體信號及IL-1β、IL-18等炎癥啟動因子的基因和蛋白水平被顯著抑制,且抑制NLRP3炎癥小體的活化可顯著減輕嚴重燒傷引起的肺部病理損害,降低肺部的炎癥水平。3.燒傷血清刺激肺泡巨噬細胞后,細胞內(nèi)NLRP3炎癥小體信號通路顯著活化,ROS水平顯著升高。ROS可能調(diào)控嚴重燒傷后NLRP3炎癥小體的活化。4.使用ROS清除劑后,燒傷血清刺激的肺泡巨噬細胞中的NLRP3炎癥小體活化程度可被顯著抑制,說明嚴重燒傷后NLRP3炎癥小體的活化是部分ROS依賴的。結(jié)論:燒傷后可激活肺泡巨噬細胞中的NLRP3炎癥小體信號通路,而活化的NLRP3炎癥小體可進一步促進IL-1β和IL-18等炎癥啟動因子的表達,進而擴大炎癥反應(yīng),導(dǎo)致肺損傷。燒傷誘導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化是部分ROS依賴的過程。而抑制NLRP3炎癥小體的活性或清除細胞內(nèi)過量的ROS,均可有效減輕肺損傷。
【關(guān)鍵詞】：燒傷 肺損傷 NLRP3 炎癥小體 ROS IL-1β IL-18
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R644
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-14
• 文獻回顧14-28
• 第一部分NLRP3炎癥小體在嚴重燒傷大鼠急性肺損傷中的作用研究28-46
• 1 材料28-31
• 2 方法31-38
• 3 結(jié)果38-43
• 4 討論43-46
• 第二部分ROS在燒傷血清誘導(dǎo)巨噬細胞NLRP3炎癥小體活化中的機制研究46-61
• 1 材料46-49
• 2 方法49-54
• 3 結(jié)果54-58
• 4 討論58-61
• 小結(jié)61-62
• 參考文獻62-74
• 個人簡歷和研究成果74-75
• 致謝75

  本文關(guān)鍵詞：ROS介導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化參與燒傷后肺損傷的機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：434210