本文關(guān)鍵詞：BMSCs在小鼠同種異體皮膚移植抗排斥中的作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone Mesenchymal stem cells,BMSCs)對(duì)小鼠同種異體皮膚移植的免疫調(diào)節(jié)作用及其可能機(jī)制。方法:將30只雄性C57BC/6小鼠受體隨機(jī)分為3組,分別為同系移植組、對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組,每組10只。同系移植組受體在移植同系皮膚術(shù)后2小時(shí)自尾靜脈注射PBS 350μL,對(duì)照組受體在同種異體皮膚移植術(shù)后2小時(shí)自尾靜脈注射PBS 350μL,實(shí)驗(yàn)組受體在同種異體皮膚移植術(shù)后2小時(shí)自尾靜脈注射2×104/g BMSCs。檢測(cè)項(xiàng)目包括:(1)移植皮膚存活時(shí)間;(2)移植物病理學(xué)檢查;(3)Real-Time PCR檢測(cè)受體脾臟FOXP3 m RNA相對(duì)表達(dá)量;(4)ELISA檢測(cè)受體血清中的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4。結(jié)果:同系移植組移植皮膚存活均超過(guò)20天。相對(duì)于對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組小鼠移植皮膚的存活時(shí)間延長(zhǎng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。移植物HE染色顯示:實(shí)驗(yàn)組炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)數(shù)量明顯少于對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組脾臟FOXP3 m RNA表達(dá)量明顯高于對(duì)照組(P0.05)。與對(duì)照組比較,實(shí)驗(yàn)組血清中的IL-2、INF-γ和TNF-α含量降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),IL-4含量升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、成功分離并鑒定出BMSCs;2、成功建立小鼠皮膚移植模型;3、BMSCs能夠延長(zhǎng)同種異體移植皮膚的存活時(shí)間,其機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)節(jié)脾臟FOXP3 m RNA的表達(dá)和相關(guān)細(xì)胞因子分泌來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：排斥反應(yīng) 間充質(zhì)干細(xì)胞 皮膚移植
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R622
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文縮略詞表8-9
• 第1章 引言9-11
• 第2章 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定11-18
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料11-13
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11
• 2.1.2 主要試劑及耗材11-12
• 2.1.3 主要儀器12
• 2.1.4 主要試劑和溶液的配制12-13
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-15
• 2.2.1 BMSCs采集13-14
• 2.2.2 BMSCs換液和傳代培養(yǎng)14
• 2.2.3 流式細(xì)胞儀鑒定BMSCs14
• 2.2.4 BMSCs分化14-15
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果15-16
• 2.3.1 BMSCs表面標(biāo)記鑒定15-16
• 2.3.2 BMSCs多向分化的功能鑒定16
• 2.4 討論16-17
• 2.5 結(jié)論17-18
• 第3章 小鼠皮膚移植模型的建立18-22
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18
• 3.1.2 主要試劑及耗材18
• 3.1.3 主要儀器18-19
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法19-20
• 3.2.1 小鼠皮膚移植模型建立19-20
• 3.3 術(shù)后處理與觀察20
• 3.4 結(jié)果20
• 3.5 討論20-21
• 3.6 結(jié)論21-22
• 第4章 BMSCs在小鼠同種異體皮膚移植抗排斥中的作用及機(jī)制研究22-39
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料22-25
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物22
• 4.1.2 主要試劑及耗材22-23
• 4.1.3 主要儀器23
• 4.1.4 主要試劑和溶液的配制23-24
• 4.1.5 PBS緩沖液配制24-25
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法25-33
• 4.2.1 小鼠皮膚移植動(dòng)物模型的建立25
• 4.2.2 小鼠BMSCs的制備25
• 4.2.3 實(shí)驗(yàn)分組25
• 4.2.4 移植效果評(píng)價(jià)25
• 4.2.5 實(shí)驗(yàn)取材25-26
• 4.2.6 HE染色26
• 4.2.7 ELISA法檢測(cè)小鼠血清IL-2 表達(dá)含量26-27
• 4.2.8 ELISA法檢測(cè)小鼠血清IFN-γ 表達(dá)含量27-28
• 4.2.9 ELISA法檢測(cè)小鼠血清TNF-α 表達(dá)含量28-29
• 4.2.10 ELISA法檢測(cè)小鼠血清IL-4 表達(dá)含量29-30
• 4.2.11 脾臟組織RNA提取30-31
• 4.2.12 逆轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)31-32
• 4.2.13 Real-Time PCR實(shí)驗(yàn)32-33
• 4.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析33
• 4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-36
• 4.4.1 移植皮膚存活情況33
• 4.4.2 HE染色法觀察移植部位皮膚情況33-35
• 4.4.3 Real-Time PCR檢測(cè)受體脾臟FOXP3 m RNA相對(duì)表達(dá)量35
• 4.4.4 ELISA法檢測(cè)受體血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α 和IL-435-36
• 4.5 討論36-37
• 4.6 全文總結(jié)37-39
• 致謝39-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 綜述43-49
• 參考文獻(xiàn)47-49

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本文編號(hào)：426086