大鼠頸脊髓慢性壓迫后哺乳動物雷帕霉素靶蛋白的表達
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【摘要】:目的:目前對于慢性輕度壓迫的脊髓型頸椎病尚缺乏理想的實驗動物模型。本實驗通過將新型慢性吸水膨脹性材料植入大鼠椎管而模擬脊髓型頸椎病的發(fā)病過程,進而研究此模型中哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(The mammalian target of rapamycin,m TOR)表達與髓內細胞凋亡,并探討m TOR與凋亡在脊髓損傷及修復過程中的作用。方法:將吸水膨脹性材料通過后路手術植入雄性SD大鼠椎管內并作為實驗組,對照組將材料植入后立即取出,實驗組與對照組各15只大鼠。每日評測大鼠BBB運動功能評分。分別于術后1天、3天、7天、10天及14天對大鼠進行MRI檢測,然后處死大鼠,將脊髓制成組織切片。最后通過HE染色觀察組織細胞形態(tài)學改變;通過TUNEL染色觀察脊髓內凋亡細胞數量;并通過免疫組化法檢測m TOR表達。結果:術后3天內所有大鼠BBB評分恢復正常;MRI顯示隨著時間推移,脊髓受壓逐漸明顯,但水腫逐漸消退,切口瘢痕組織形成,周圍軟組織輕度水腫,未見出血及脊髓軟化;HE染色顯示髓內水腫,細胞空泡樣變,運動神經元數量減少以后角更為明顯,各組大鼠脊髓受壓部位內可見輕度炎性細胞浸潤;TUNEL染色顯示各時間點實驗組大鼠脊髓內凋亡細胞數目高于對照組,差異具有統計學意義,但實驗組內對比無統計學差異;免疫組化結果顯示實驗組中單位面積內m TOR陽性細胞的數量呈先增高再降低的趨勢,在7天時達到頂峰,且與其他實驗組數據對比具有統計學差異。各時間點對照組的單位面積內m TOR陽性細胞的數量無統計學差異。實驗組中單位面積內m TOR陽性細胞的數量始終低于對照組,差異具有統計學意義。結論:大鼠頸脊髓在受到持續(xù)性輕度壓迫后,m TOR信號通路被激活。該信號通路的激活具有神經保護的功能,但其機制在急性期與亞急性、慢性期中有所不同。輕度的脊髓受壓并未引起髓內嚴重的細胞凋亡,輕度脊髓損傷后的脊髓自發(fā)性修復在神經功能恢復過程中起到了一定的作用。
【關鍵詞】:慢性壓迫 哺乳動物雷帕霉素靶蛋白 凋亡
【學位授予單位】:山西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R681.5
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 前言10-12
- 1 材料與方法12-21
- 1.1 實驗動物12
- 1.2 慢性吸水膨脹材料12-13
- 1.3 主要儀器與試劑13-14
- 1.4 大鼠慢性脊髓壓迫模型的制備14-15
- 1.5 動物分組15
- 1.6 運動功能評分15-16
- 1.7 影像學觀察16
- 1.8 組織學觀察16-20
- 1.9 統計學方法20-21
- 2 結果21-28
- 2.1 BBB評分21
- 2.2 材料膨脹曲線21
- 2.3 MRI結果21-22
- 2.4 HE染色22
- 2.5 TUNEL染色22-25
- 2.6 免疫組化25-28
- 3 討論28-31
- 4 結論31-32
- 參考文獻32-35
- 綜述35-44
- 參考文獻40-44
- 在學期間發(fā)表的學術論文與研究成果44-45
- 致謝45-46
- 個人簡歷46
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本文編號:414374
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