骨關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)是目前世界范圍內(nèi)影響最廣泛的退行性關(guān)節(jié)疾病,影響全世界數(shù)千萬人,是造成老年人殘疾的首要原因,對(duì)個(gè)人和國(guó)家都造成巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。但由于我們對(duì)該疾病的機(jī)制尚不完全了解,目前臨床上還沒有對(duì)因治療的方法。之前有研究表明,表皮生長(zhǎng)因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)信號(hào)通路在軟骨發(fā)育和病理過程中起到重要作用,但其在骨關(guān)節(jié)炎中的直接作用和病理機(jī)制尚未完全闡明。另外,骨關(guān)節(jié)炎在臨床上還未有根據(jù)致病的分子機(jī)制分型,醫(yī)生們使用相同的治療手段處理所有骨關(guān)節(jié)炎患者,但在實(shí)際治療過程中,相同手段針對(duì)不同患者預(yù)后并不一致,這提示我們骨關(guān)節(jié)炎可能有不同的病理分型。本研究旨在進(jìn)一步闡明EGFR在骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)展中的作用,探究臨床骨關(guān)節(jié)炎患者中是否存在相應(yīng)的患者亞群,尋找新的藥物治療手段。本研究以EGFR為研究對(duì)象,利用誘導(dǎo)型條件性敲除Egfr小鼠、小分子抑制劑吉非替尼和殼聚糖微球,構(gòu)建了骨關(guān)節(jié)炎小鼠模型和緩釋給藥系統(tǒng),并結(jié)合高通量測(cè)序等生物信息學(xué)方法,對(duì)EGFR在骨關(guān)節(jié)炎中的影響和作用機(jī)制進(jìn)行了相關(guān)研究,最后利用臨床樣本驗(yàn)證了...

【文章頁數(shù)】：138 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－２?基因的ＰＣＲ鑒定結(jié)果??

?第一章ＥＧＦＲ在小鼠骨關(guān)節(jié)炎模型中的作用??陰性的小鼠（圖１－２）。??１?２?３?４?５??陶ＨＲ??圖１－２?基因的ＰＣＲ鑒定結(jié)果??１．４．２原代軟骨細(xì)胞的分離??使用膠原酶消化的方法，我們成功獲得了?斤Ｖ和五妙＃的??小鼠軟骨細(xì)胞，兩種細(xì)胞的形態(tài)并無明顯差異（圖１－３）....

圖１－３軟骨細(xì)胞貼壁培養(yǎng)形態(tài)

?第一章ＥＧＦＲ在小鼠骨關(guān)節(jié)炎模型中的作用??陰性的小鼠（圖１－２）。??１?２?３?４?５??陶ＨＲ??圖１－２?基因的ＰＣＲ鑒定結(jié)果??１．４．２原代軟骨細(xì)胞的分離??使用膠原酶消化的方法，我們成功獲得了?斤Ｖ和五妙＃的??小鼠軟骨細(xì)胞，兩種細(xì)胞的形態(tài)并無明顯差異（圖１－３）....

圖１－４五ｇ斤體外敲除效率驗(yàn)證

顯著差異［２８］，因此我們繼續(xù)使用此濃度，并探究了?ＴＧＦ－ａ對(duì)軟骨表型影響的具體??作用時(shí)間，發(fā)現(xiàn)在ＴＧＦ－ａ處理４個(gè)小時(shí)后，ＩＩ型膠原的基因Ｃｏ／２ａｉ表達(dá)量開始下??降，在１２小時(shí)后迖到最低點(diǎn)，并一直維持到４８小時(shí)以上（圖１－５）。??Ｃｏｌ２ａｌ?Ｃｏｌ２ａｌ??１．５?....

圖１－５?ＴＧＦ－ａ處理不同時(shí)間對(duì)Ｃｏ／２ｏ７表達(dá)的影響??

〇１１ｍ?ＧＡｐＤＨｒ＾ｌ??＃七〇??圖１－４五ｇ斤體外敲除效率驗(yàn)證。左圖：ｑＰＣＲ結(jié)果，＊叩＜０．０１；右圖：ＷｅｓｔｅｍＢｌｏｔ結(jié)??果。ＷＴ，野生型，即組；ＫＯ，基因敲除組，即組。??１．４．４?ＥＧＦＲ激活影響軟骨細(xì)胞表型??驗(yàn)證體外敲除效率后，我們使用ＴＧＦ－ａ激活軟....

本文編號(hào)：4021881