目的:缺血再灌注(Ischemia-reperfusion,IR)引起的骨骼肌損傷在臨床醫(yī)學和法醫(yī)學實踐中都很常見。骨骼肌損傷后的再生主要指衛(wèi)星細胞(Satellite cells,SCs)的激活、增殖、分化、肌母細胞的延伸與融合以及新生肌管的形成,最后形成完整的骨骼肌纖維。一些轉(zhuǎn)錄因子比如,MyoD、myogenin均參與調(diào)控衛(wèi)星細胞的增殖與分化過程和骨骼肌纖維的形成。眾多實驗研究發(fā)現(xiàn),Ⅱ型大麻素受體(Cannabinoid type 2 receptor,CB2R)具有保護組織損傷,促進組織再生的作用。本課題組前期研究指出,在大鼠的骨骼肌挫傷后的骨骼肌細胞、肌成纖維細胞及巨噬細胞中都時序性的表達一定水平的CB2R。同時,在給予CB2R的激動劑后,肌細胞的再生明顯得到改善。由此可見,CB2R對骨骼肌的再生起到促進作用。巨噬細胞是一種免疫細胞,依賴于自身高度的可塑性和異質(zhì)性,可以分為兩種表型狀態(tài),即經(jīng)典途徑活化的M1和選擇性途徑活化的M2。目前有文章指出,巨噬細胞對組織再生的調(diào)控主要是通過改變自身的極化來發(fā)揮不同的作用。本課題組的前期實驗結(jié)果指出在皮膚損傷模型中CB2R可以改變巨噬細胞的...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
    2.2 研究對象和分組
    2.3 實驗方法
        2.3.1 小鼠后肢骨骼肌缺血再灌注損傷模型制作
        2.3.2 組織取材與處理
        2.3.3 CB2R-KO小鼠基因型測定
        2.3.4 H&E染色
        2.3.5 免疫組織化學染色
        2.3.6 免疫熒光染色
        2.3.7 腹腔巨噬細胞分離
        2.3.8 巨噬細胞誘導分型
        2.3.9 細胞共培養(yǎng)實驗
        2.3.10 細胞免疫熒光
        2.3.11 流式細胞術(shù)
        2.3.12 Western blot檢測
        2.3.13 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計
3 結(jié)果
    3.1 CB2R基因敲除驗證結(jié)果
    3.2 CB2R敲除導致骨骼肌缺血再灌注損傷后肌細胞再生受損
    3.3 CB2R敲除增加骨骼肌損傷區(qū)M1型細胞浸潤,減少M2型細胞浸潤
    3.4 CB2R敲除增強M1基因的蛋白表達,減弱M2基因的蛋白表達
    3.5 CB2R敲除促進巨噬細胞在體外向M1極化而抑制向M2極化
    3.6 C2C12成肌細胞誘導分化后形態(tài)學改變
    3.7 CB2R敲除的巨噬細胞阻礙C2C12成肌細胞分化
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：4018164