目的:缺血再灌注(Ischemia-reperfusion,IR)引起的骨骼肌損傷在臨床醫(yī)學(xué)和法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中都很常見。骨骼肌損傷后的再生主要指衛(wèi)星細(xì)胞(Satellite cells,SCs)的激活、增殖、分化、肌母細(xì)胞的延伸與融合以及新生肌管的形成,最后形成完整的骨骼肌纖維。一些轉(zhuǎn)錄因子比如,MyoD、myogenin均參與調(diào)控衛(wèi)星細(xì)胞的增殖與分化過程和骨骼肌纖維的形成。眾多實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),Ⅱ型大麻素受體(Cannabinoid type 2 receptor,CB2R)具有保護(hù)組織損傷,促進(jìn)組織再生的作用。本課題組前期研究指出,在大鼠的骨骼肌挫傷后的骨骼肌細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞及巨噬細(xì)胞中都時(shí)序性的表達(dá)一定水平的CB2R。同時(shí),在給予CB2R的激動(dòng)劑后,肌細(xì)胞的再生明顯得到改善。由此可見,CB2R對(duì)骨骼肌的再生起到促進(jìn)作用。巨噬細(xì)胞是一種免疫細(xì)胞,依賴于自身高度的可塑性和異質(zhì)性,可以分為兩種表型狀態(tài),即經(jīng)典途徑活化的M1和選擇性途徑活化的M2。目前有文章指出,巨噬細(xì)胞對(duì)組織再生的調(diào)控主要是通過改變自身的極化來發(fā)揮不同的作用。本課題組的前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果指出在皮膚損傷模型中CB2R可以改變巨噬細(xì)胞的...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
    2.2 研究對(duì)象和分組
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 小鼠后肢骨骼肌缺血再灌注損傷模型制作
        2.3.2 組織取材與處理
        2.3.3 CB2R-KO小鼠基因型測(cè)定
        2.3.4 H&E染色
        2.3.5 免疫組織化學(xué)染色
        2.3.6 免疫熒光染色
        2.3.7 腹腔巨噬細(xì)胞分離
        2.3.8 巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)分型
        2.3.9 細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
        2.3.10 細(xì)胞免疫熒光
        2.3.11 流式細(xì)胞術(shù)
        2.3.12 Western blot檢測(cè)
        2.3.13 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)
3 結(jié)果
    3.1 CB2R基因敲除驗(yàn)證結(jié)果
    3.2 CB2R敲除導(dǎo)致骨骼肌缺血再灌注損傷后肌細(xì)胞再生受損
    3.3 CB2R敲除增加骨骼肌損傷區(qū)M1型細(xì)胞浸潤,減少M(fèi)2型細(xì)胞浸潤
    3.4 CB2R敲除增強(qiáng)M1基因的蛋白表達(dá),減弱M2基因的蛋白表達(dá)
    3.5 CB2R敲除促進(jìn)巨噬細(xì)胞在體外向M1極化而抑制向M2極化
    3.6 C2C12成肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化后形態(tài)學(xué)改變
    3.7 CB2R敲除的巨噬細(xì)胞阻礙C2C12成肌細(xì)胞分化
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：4018164