目的:慢性排斥反應(yīng)是導致遠期移植物功能衰竭的主要原因。移植物動脈硬化是不同移植物慢性排斥反應(yīng)中共有的組織病理學特征。血管平滑肌細胞(SMC)表型轉(zhuǎn)化是調(diào)節(jié)移植物動脈新生內(nèi)膜形成及動脈硬化的起始及進展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本研究旨在探索轉(zhuǎn)錄因子Sox9在移植損傷誘導的移植物動脈SMC表型轉(zhuǎn)化中的作用及其潛在的分子機制。方法:用短發(fā)夾RNA(shRNA)慢病毒載體特異性地敲低移植動脈中膜SMC中靶基因的轉(zhuǎn)錄表達,并建立大鼠動脈移植模型。采用H&E及EVG染色對移植動脈進行形態(tài)學分析,采用基因轉(zhuǎn)錄組測序篩選與移植動脈SMC分化,增殖等相關(guān)的差異基因,并用免疫組織化學,組織熒光染色及蛋白免疫印跡(western blotting)檢測移植動脈中Sox9,血管SMC分化標志基因(Calponin和SM22α),自噬相關(guān)分子(Atg5,Atg7,Beclin-1,LC3Ⅰ/Ⅱ等)及增殖細胞核抗原(PCNA)的表達水平。在體外,培養(yǎng)大鼠動脈SMC,給予藥物刺激,shRNA慢病毒感染及質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,實時定量PCR(qRT-PCR)及western blotting定量細胞內(nèi)相關(guān)分子的mRNA及蛋白表達。免疫...

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【學位級別】：博士

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摘要
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前言
實驗方法
實驗結(jié)果
討論
參考文獻
綜述
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在校期間發(fā)表論文及所獲獎勵
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