研究目的:骨性關(guān)節(jié)炎最重要的細(xì)胞病理學(xué)變化包括軟骨細(xì)胞肥大化、軟骨細(xì)胞凋亡、軟骨細(xì)胞被成骨細(xì)胞替代。細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)由以膠原為主要成分向以鈣磷酸鹽為主要成分轉(zhuǎn)化,導(dǎo)致軟骨細(xì)胞外基質(zhì)被骨組織所替代,并最終形成骨性關(guān)節(jié)炎的主要組織學(xué)特點(diǎn)。鎂是人體內(nèi)常量元素,是細(xì)胞內(nèi)含量?jī)H次于鈣離子的二價(jià)陽(yáng)離子,它在維持人體的正常生理功能、促進(jìn)細(xì)胞和生物酶活性中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用,其參與多種酶促反應(yīng)、蛋白合成和能量代謝;調(diào)控骨組織生長(zhǎng)和維持神經(jīng)肌肉的興奮性;保持胃腸道和激素功能的穩(wěn)定性。Ca²⁺和Mg²⁺作為人體內(nèi)含量最大的兩種二價(jià)陽(yáng)離子,細(xì)胞外液的平衡調(diào)控著細(xì)胞外微環(huán)境中鈣鹽沉積和組織鈣化水平;同時(shí)生理性的骨形成、骨吸收和病理性的異位骨化、軟骨細(xì)胞鈣化也受到這兩種離子的調(diào)控影響。目前發(fā)現(xiàn),鈣化的肌腱組織和韌帶中,鈣含量較正常組織增高,且隨著肌腱退變和鈣化的嚴(yán)重程度而加劇,而鎂的含量則隨著肌腱老化和退變而下降;近年研究表明,Mg²⁺與細(xì)胞外基質(zhì)的鈣化過程密切相關(guān),涉及很多常見的病理狀態(tài),如骨質(zhì)疏...

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.細(xì)胞外高濃度Mg2+抑制OM中ATDC5外基質(zhì)鈣化

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文3結(jié)果3.1高濃度Mg2+抑制ATDC5軟骨細(xì)胞外基質(zhì)鈣化當(dāng)OM培養(yǎng)基中鎂離子含量在1.6mM/L或更高濃度時(shí)，ATDC5細(xì)胞外基質(zhì)鈣化程度受到顯著的抑制（圖1a），與在OM中培養(yǎng)的ATDC5細(xì)胞相比，隨著Mg2+濃度的增加，....

圖2.高濃度Mg2+的OM培養(yǎng)基和單純OM培養(yǎng)基，可以調(diào)控促軟骨形成，軟骨細(xì)胞肥大

肥大化及鈣化的主要調(diào)控因素，此外X型膠原蛋白由肥大軟骨細(xì)胞表達(dá)，其高表達(dá)是軟骨細(xì)胞肥大化的主要標(biāo)志。在本研究中我們發(fā)現(xiàn)，OM培養(yǎng)基和含有高濃度Mg2+的OM培養(yǎng)基中，Runx2和膠原蛋白X的表達(dá)出現(xiàn)顯著差異。MGP與鈣離子具有高親和力，于其他含Gla基團(tuán)的蛋....

圖3Westernblot結(jié)果顯示，培養(yǎng)7d后，成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基可激活A(yù)TDC5中軟骨細(xì)胞肥大化

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文3.3高濃度Mg2+調(diào)控ATDC5軟骨細(xì)胞蛋白表達(dá)Runx2，MMP13，Col1α1和Col10α1蛋白表達(dá)與我們?cè)赗eal-timePCR中發(fā)現(xiàn)的結(jié)果一致。成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基可以激活A(yù)TDC5軟骨細(xì)胞肥大化，增加Runx2轉(zhuǎn)錄因子....

圖4.磷酸化的ERK敏感且易于降解，因此我們選擇在OM培養(yǎng)基和OM+2.4mM/LMg2+培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞24小時(shí)后，收集ATDC5細(xì)胞總蛋白，并進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)

3.4高濃度Mg抑制ATDC5信號(hào)通路ERK1/2蛋白磷酸化表達(dá)及自噬相關(guān)蛋白表達(dá)骨發(fā)育和骨質(zhì)疏松癥已經(jīng)被越來越多的研究所證實(shí)，自噬過程已經(jīng)被證實(shí)參與ECM鈣化形成[23]。骨細(xì)胞中自噬的抑制導(dǎo)致骨量的下降，而低水平自噬表達(dá)影響骨重建相關(guān)，表明自噬對(duì)于鈣化過程是必....

本文編號(hào)：3945443