目的:脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是一種嚴重的致殘性中樞神經系統疾病。由于神經元的不可再生性導致患者會出現不同程度的運動、感覺以及括約肌功能障礙等癥狀。脊髓損傷常導致患者生活質量明顯下降并且高額的醫(yī)療費用給患者家庭帶來了巨大的經濟負擔。脊髓損傷通常包括兩個病理過程即原發(fā)性脊髓損傷和繼發(fā)性脊髓損傷。原發(fā)性損傷是指由直接或間接外力瞬間導致的損傷,繼發(fā)性損傷是在原發(fā)性損傷基礎上發(fā)生的局部缺血、水腫、氧化應激和炎癥等一系列復雜的反應。由于繼發(fā)性脊髓損傷的這一系列病理過程具有可調控性,這在很大程度上影響患者的預后。因此對繼發(fā)性脊髓損傷病理過程的調控成為當今脊髓損傷治療的研究熱點之一。自噬(autophagy)是一種廣泛存在于真核細胞內的溶酶體依賴性的降解過程。自噬通過雙層膜包裹待降解的細胞成分形成自噬泡,自噬泡隨后與溶酶體融合成為自噬溶酶體。待降解物質在溶酶體內被各種酶消化和降解,以實現細胞自身的代謝和某些細胞器的更新,這對維持細胞穩(wěn)態(tài)有非常重要作用。研究發(fā)現提高腦創(chuàng)傷或脊髓損傷疾病模型中損傷區(qū)組織自噬能提高動物預后。例如,自噬能通過抑制大鼠脊髓損傷后細胞凋亡而減少神...

【文章頁數】：118 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分：大鼠脊髓損傷后損傷區(qū)脊髓組織中自噬表達變化的實驗研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑盒及儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 研究對象和分組
        2.3 建立大鼠脊髓損傷模型
        2.4 標本采集
            2.4.1 Western blot標本采集及制樣
            2.4.2 免疫熒光標本采集及切片
        2.5 Western blot法檢測
            2.5.1 主要實驗試劑的配置
            2.5.2 上樣及電泳
        2.6 免疫熒光法檢測
        2.7 統計學分析
    3 結果
        3.1 脊髓損傷后不同時間點Beclin-1和LC3的表達變化
            3.1.1 脊髓損傷后不同時間點Beclin-1的表達變化
            3.1.2 脊髓損傷后不同時間點LC3的表達變化
        3.2 脊髓損傷后損傷區(qū)組織前角神經元自噬增強
    4 討論
    5 結論
第二部分：Netrin-1對脊髓損傷大鼠神經保護作用及機制的初步實驗研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑盒及儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 研究對象、分組以及給藥
        2.3 建立大鼠脊髓損傷模型
        2.4 標本采集
        2.5 Western blot法檢測
        2.6 免疫熒光法檢測
        2.7 TUNEL檢測
        2.8 HE染色
        2.9 尼氏染色
        2.10 BBB運動功能評分
        2.11 統計學分析
    3 結果
        3.1 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后運動功能恢復。
        3.2 Netrin-1減少了大鼠脊髓損傷后前角神經元和脊髓組織丟失
        3.3 Netrin-1激活大鼠脊髓損傷后AMPK/m TOR信號通路
        3.4 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后前角神經元的自噬
        3.5 Netrin-1抑制了大鼠脊髓損傷后前角神經元的凋亡
    4 討論
    5 結論
第三部分：Netrin-1對脊髓損傷大鼠神經保護作用機制的進一步實驗研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑盒及儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 研究對象、分組以及給藥
        2.3 建立大鼠脊髓損傷模型
        2.4 標本采集
        2.5 Western blot法檢測
        2.6 免疫熒光法檢測
        2.7 尼氏染色
        2.8 BBB運動功能評分
        2.9 統計學分析
    3 結果
        3.1 Netrin-1通過激活AMPK/mTOR信號通路促進前角神經元內TFEB核轉位
        3.2 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后前角神經元內溶酶體的生成
        3.3 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后前角神經元自噬潮
        3.4 Netrin-1抑制了大鼠脊髓損傷后前角神經元的凋亡
        3.5 Netrin-1減少了大鼠脊髓損傷后前角神經元的丟失
        3.6 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后運動功能恢復
    4 討論
    5 結論
本文創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3938513