目的:脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是一種嚴(yán)重的致殘性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。由于神經(jīng)元的不可再生性導(dǎo)致患者會出現(xiàn)不同程度的運(yùn)動、感覺以及括約肌功能障礙等癥狀。脊髓損傷常導(dǎo)致患者生活質(zhì)量明顯下降并且高額的醫(yī)療費(fèi)用給患者家庭帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。脊髓損傷通常包括兩個病理過程即原發(fā)性脊髓損傷和繼發(fā)性脊髓損傷。原發(fā)性損傷是指由直接或間接外力瞬間導(dǎo)致的損傷,繼發(fā)性損傷是在原發(fā)性損傷基礎(chǔ)上發(fā)生的局部缺血、水腫、氧化應(yīng)激和炎癥等一系列復(fù)雜的反應(yīng)。由于繼發(fā)性脊髓損傷的這一系列病理過程具有可調(diào)控性,這在很大程度上影響患者的預(yù)后。因此對繼發(fā)性脊髓損傷病理過程的調(diào)控成為當(dāng)今脊髓損傷治療的研究熱點(diǎn)之一。自噬(autophagy)是一種廣泛存在于真核細(xì)胞內(nèi)的溶酶體依賴性的降解過程。自噬通過雙層膜包裹待降解的細(xì)胞成分形成自噬泡,自噬泡隨后與溶酶體融合成為自噬溶酶體。待降解物質(zhì)在溶酶體內(nèi)被各種酶消化和降解,以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞自身的代謝和某些細(xì)胞器的更新,這對維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)有非常重要作用。研究發(fā)現(xiàn)提高腦創(chuàng)傷或脊髓損傷疾病模型中損傷區(qū)組織自噬能提高動物預(yù)后。例如,自噬能通過抑制大鼠脊髓損傷后細(xì)胞凋亡而減少神...

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分：大鼠脊髓損傷后損傷區(qū)脊髓組織中自噬表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑盒及儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 研究對象和分組
        2.3 建立大鼠脊髓損傷模型
        2.4 標(biāo)本采集
            2.4.1 Western blot標(biāo)本采集及制樣
            2.4.2 免疫熒光標(biāo)本采集及切片
        2.5 Western blot法檢測
            2.5.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑的配置
            2.5.2 上樣及電泳
        2.6 免疫熒光法檢測
        2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 脊髓損傷后不同時間點(diǎn)Beclin-1和LC3的表達(dá)變化
            3.1.1 脊髓損傷后不同時間點(diǎn)Beclin-1的表達(dá)變化
            3.1.2 脊髓損傷后不同時間點(diǎn)LC3的表達(dá)變化
        3.2 脊髓損傷后損傷區(qū)組織前角神經(jīng)元自噬增強(qiáng)
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分：Netrin-1對脊髓損傷大鼠神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制的初步實(shí)驗(yàn)研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑盒及儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 研究對象、分組以及給藥
        2.3 建立大鼠脊髓損傷模型
        2.4 標(biāo)本采集
        2.5 Western blot法檢測
        2.6 免疫熒光法檢測
        2.7 TUNEL檢測
        2.8 HE染色
        2.9 尼氏染色
        2.10 BBB運(yùn)動功能評分
        2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后運(yùn)動功能恢復(fù)。
        3.2 Netrin-1減少了大鼠脊髓損傷后前角神經(jīng)元和脊髓組織丟失
        3.3 Netrin-1激活大鼠脊髓損傷后AMPK/m TOR信號通路
        3.4 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后前角神經(jīng)元的自噬
        3.5 Netrin-1抑制了大鼠脊髓損傷后前角神經(jīng)元的凋亡
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分：Netrin-1對脊髓損傷大鼠神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制的進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑盒及儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 研究對象、分組以及給藥
        2.3 建立大鼠脊髓損傷模型
        2.4 標(biāo)本采集
        2.5 Western blot法檢測
        2.6 免疫熒光法檢測
        2.7 尼氏染色
        2.8 BBB運(yùn)動功能評分
        2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Netrin-1通過激活A(yù)MPK/mTOR信號通路促進(jìn)前角神經(jīng)元內(nèi)TFEB核轉(zhuǎn)位
        3.2 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后前角神經(jīng)元內(nèi)溶酶體的生成
        3.3 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后前角神經(jīng)元自噬潮
        3.4 Netrin-1抑制了大鼠脊髓損傷后前角神經(jīng)元的凋亡
        3.5 Netrin-1減少了大鼠脊髓損傷后前角神經(jīng)元的丟失
        3.6 Netrin-1提高了大鼠脊髓損傷后運(yùn)動功能恢復(fù)
    4 討論
    5 結(jié)論
本文創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3938513