成纖維細胞生長因子18(FGF18)腺病毒包裝及其在小鼠骨關(guān)節(jié)炎治療中的作用
發(fā)布時間:2024-03-23 09:09
目的:探究成纖維生長因子18(Fibroblast growth factor18,FGF18)對軟骨細胞分化的影響,以及其對內(nèi)側(cè)半月板不穩(wěn)定模型(Destabilization of the medial meniscus,DMM)小鼠骨關(guān)節(jié)炎的治療效果,為利用FGF18治療骨關(guān)節(jié)炎提供實驗依據(jù)。方法:利用PCR的方法獲取FGF18全長基因片段,再用AgeⅠ和NheⅠ酶切目的基因和pYr-1.1載體,連接后得到pYr-FGF18質(zhì)粒。通過LR體外同源重組,將pYr-FGF18的表達框轉(zhuǎn)移到pAd/PL-DEST腺病毒表達載體上,得到pAd/PL-FGF18質(zhì)粒。用PacⅠ酶切pAd/PLFGF18,將線性化的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HEK293A細胞中包裝得到Ad-FGF18重組腺病毒載體,并進行擴增、純化。Ad-GFP腺病毒也用同樣的方法得到。用Ad-FGF18腺病毒感染HEK293A細胞并鑒定感染后的細胞中FGF18基因是否過表達。用Ad-FGF18腺病毒感染軟骨細胞,觀察其對軟骨細胞分化的影響。對小鼠施行DMM手術(shù),術(shù)后第2周開始關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射Ad-FGF18腺病毒,持續(xù)6周,術(shù)后第8周處死。...
【文章頁數(shù)】:78 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要縮略語及英文索引
第一章 前言
第二章 材料與方法
第三章 實驗結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
碩士期間的科研成果
致謝
本文編號:3935695
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【學(xué)位級別】:碩士
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主要縮略語及英文索引
第一章 前言
第二章 材料與方法
第三章 實驗結(jié)果
第四章 討論
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