目的:1、觀察mt DNA對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞PD-L1表達(dá)的影響;2、以UO126(MEK1/2通路抑制劑),SB203580(p38通路抑制劑),SN50(NF-k B通路抑制劑),LY294002(PI3K通路抑制劑)干預(yù)上述信號(hào)通路,篩選明顯抑制PD-L1表達(dá)的細(xì)胞通路,并用氯喹(chloroquine,CQ)作用于經(jīng)mt DNA刺激的巨噬細(xì)胞觀察p38信號(hào)通路的變化,探討巨噬細(xì)胞表達(dá)PD-L1的胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路;3、研究mt DNA誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞免疫活性的影響,并通過(guò)抗PD-L1單克隆抗體阻斷PD-L1/PD-1信號(hào)分子改善其對(duì)T細(xì)胞功能的抑制。方法:采用體外實(shí)驗(yàn)研究。1.根據(jù)mt DNA濃度,分為3組:空白對(duì)照組;1ug/ml mt DNA組;10ug/ml mt DNA。分別加入PBS1ul;1ug/ml mt DNA和10ug/ml mt DNA,24小時(shí)提取各組,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PD-L1表達(dá)。根據(jù)檢測(cè)時(shí)間不同分為6組,每組均加入10ug/ml mt DNA,分別在0小時(shí)、6小時(shí)、12,小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)提取各組,流式檢測(cè)PD-L1表達(dá)。2.將巨噬細(xì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 mtDNA誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)PD-L1
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 不同濃度mt DNA對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞PD-L1 分子表達(dá)
        2.2 不同時(shí)間，相同濃度mt DNA對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞PD-L1 分子表達(dá)
第二部分 P38 細(xì)胞通路介導(dǎo)mtDNA誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞PD-L1 表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各信號(hào)通路抑制劑對(duì)mt DNA誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞表面PD-L1 分子表達(dá)影響
        2.2 P-P38 及P38 蛋白的Western blot結(jié)果
第三部分 PD-L1/PD-1 信號(hào)分子在mtDNA誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞與CD4+T細(xì)胞共培養(yǎng)中的作用
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果
        2.1 不同培養(yǎng)條件CD4+T細(xì)胞體外增殖能力
        2.2 CD4+T細(xì)胞與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)體系IFN-γ的分泌水平
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3929477