目的本研究一方面從臨床收集骨關(guān)節(jié)炎(OA)患者關(guān)節(jié)液分析其中CTHRC1和IL-1β的含量,另一方面制備原代大鼠軟骨細(xì)胞,用IL-1β處理誘發(fā)骨關(guān)節(jié)炎細(xì)胞模型,分析CTHRC1在骨關(guān)節(jié)炎患者軟骨細(xì)胞凋亡中的分子機(jī)制。方法收集安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院(合肥)2012年6月至2016年4月間行膝關(guān)節(jié)置換術(shù)的OA患者(67.9±7.2歲,男:女,11:39)關(guān)節(jié)液標(biāo)本(n=50)。同時采集安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院30例(62.8±11.2歲,男:女,1:4)無OA或其他關(guān)節(jié)疾病史的外傷患者關(guān)節(jié)液標(biāo)本。采用ELISA試劑盒檢測OA和創(chuàng)傷患者關(guān)節(jié)液中CTHRC1和IL-1β的表達(dá)水平。制備原代大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,用IL-1β處理誘發(fā)骨關(guān)節(jié)炎細(xì)胞模型,通過Western blot觀察CTHRC1和JNK1/2的表達(dá)量變化,CCK-8試劑盒分析IL-1β作用后軟骨細(xì)胞的增殖能力的變化,流式細(xì)胞術(shù)分析IL-1β作用后軟骨細(xì)胞的凋亡比例變化,分析CTHRC1、IL-1β和JNK1/2信號通路在骨關(guān)節(jié)炎中的關(guān)系。隨后使用表達(dá)CTHRC1和CTHRC1-sh RNA的慢病毒感染骨關(guān)節(jié)炎細(xì)胞模型,分析CTHR...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1IL-1β參與骨關(guān)節(jié)炎的信號途徑

安徽醫(yī)科大學(xué)博士研究生畢業(yè)論文17PI3K/Akt和JNK信號途徑，增加氧分壓通過調(diào)節(jié)谷胱甘肽抗氧化系統(tǒng)使軟骨細(xì)胞更容易受到氧化應(yīng)激介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。次黃嘌呤-黃嘌呤氧化酶（XOD）誘導(dǎo)生成的H2O2抑制關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的生長，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物4-羥基炔諾酮(HNE)通過激活caspas....

圖2shRNA質(zhì)粒構(gòu)建的示意圖

安徽醫(yī)科大學(xué)博士研究生畢業(yè)論文27EDTA（pH=8.0）、57.1mL冰乙酸，定容至1L，室溫保存?zhèn)溆肒an溶液用去離子水溶解卡那霉素粉末配制成50mg/mL的貯存液，過濾除菌后分裝與1.5mlEP管中，-20℃保存?zhèn)溆肁mp溶液用去離子水溶解氨芐青霉素粉末配制成50mg/mL....

圖5pLVX-Puro載體圖譜

安徽醫(yī)科大學(xué)博士研究生畢業(yè)論文322)將凍存的病毒液在冰上溶解，在EP管中按10倍稀釋連續(xù)10個稀釋度（10~10-8）。3)吸棄96孔板中的培養(yǎng)基，每孔加入100μl稀釋好的病毒液，繼續(xù)培養(yǎng)48h。4)在倒置熒光顯微鏡下觀察結(jié)果，并計(jì)數(shù)發(fā)熒光的細(xì)胞數(shù)目，以此計(jì)算病毒滴度。2.4....

本文編號：3918510