骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是膝關(guān)節(jié)疾病中一種最常見(jiàn)的疾病類型,其特征是關(guān)節(jié)軟骨的逐漸退化。據(jù)統(tǒng)計(jì),超過(guò)80%的中老年人患有不同程度的骨關(guān)節(jié)炎,因缺乏有效的臨床干預(yù)手段,嚴(yán)重降低了人們的生活質(zhì)量,加重了社會(huì)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前OA的具體發(fā)病機(jī)制還不明確,有證據(jù)表明,骨關(guān)節(jié)炎與軟骨病理密切相關(guān),其中包括軟骨細(xì)胞的肥大分化和纖維化分化。在OA進(jìn)程中,透明軟骨向肥大軟骨和纖維化軟骨細(xì)胞分化,誘導(dǎo)軟骨基質(zhì)降解、軟骨內(nèi)血管入侵和骨刺形成。另外,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的去分化通常發(fā)生在體外培養(yǎng)和擴(kuò)增的過(guò)程中,其特點(diǎn)是Ⅱ型膠原(collage typeⅡ,COL-Ⅱ)的丟失和Ⅰ型膠原(collage type Ⅰ,COL-Ⅰ)的增加。當(dāng)軟骨細(xì)胞作為種子細(xì)胞用于軟骨組織工程時(shí),表型不穩(wěn)定和容易獲得成纖維細(xì)胞樣表型嚴(yán)重影響軟骨修復(fù)的結(jié)果。綜上所述,如何抑制軟骨細(xì)胞肥大和軟骨細(xì)胞纖維化分化是OA治療和軟骨組織工程中備受關(guān)注的問(wèn)題。積雪草酸(Asiatic acid,AA)是一種從積雪草中分離得到的五環(huán)三萜類化合物,具有多種藥理作用,包括抗氧化、抗炎、保肝等作用。最近的研究表明,AA可抑制心肌肥厚和肝纖...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.2.1人OA軟骨細(xì)胞的提取過(guò)程

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文10吸取消化后的軟骨碎屑并且置于50mL離心管中，在400g條件下離心20min,使得細(xì)胞充分沉淀在試管底部。隨后，將離心好的試管取出，小心棄去上層清液，用1mL含有10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀，輕輕吹打使細(xì)胞分散均勻；然后用微量移液槍吸....

圖4.1.1AA對(duì)人OA軟骨細(xì)胞活力的影響

4.1.1不同濃度AA處理人OA軟骨細(xì)胞后的死活染色和CCK-8結(jié)果不同濃度AA(0、5、10和20μM)AA處理人OA軟骨細(xì)胞24h后，分別采用CCK-8試劑盒和死活染色試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活性。AA的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如圖4.1A所示。圖....

圖4.2.1未加藥物處理(control)和AA處理人OA軟骨細(xì)胞后(AA)兩組Runx2、COL10a1和MMP-13mRNAt**P<0.01ns:

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文164.2AA對(duì)人OA軟骨細(xì)胞肥大化表型的影響4.2.1AA處理人OA軟骨細(xì)胞后肥大化標(biāo)記物COL-X、MMP-13和Runx2的qRT-PCR結(jié)果為了分析AA是否能夠抑制人OA軟骨細(xì)胞的肥大化，我們首先用5μMAA處理人OA軟骨細(xì)胞三天，然后使用qRT-PC....

圖4.2.2未加藥物處理(control)和AA處理人OA軟骨細(xì)胞后(AA)兩組COL-X、MMP-13和Runx2的免疫熒光染色結(jié)果

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文164.2AA對(duì)人OA軟骨細(xì)胞肥大化表型的影響4.2.1AA處理人OA軟骨細(xì)胞后肥大化標(biāo)記物COL-X、MMP-13和Runx2的qRT-PCR結(jié)果為了分析AA是否能夠抑制人OA軟骨細(xì)胞的肥大化，我們首先用5μMAA處理人OA軟骨細(xì)胞三天，然后使用qRT-PC....

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