【目的】下腰痛(Low Back Pain,LBP)是骨科臨床最常見(jiàn)的主訴之一。據(jù)報(bào)道,全世界范圍內(nèi)70%-85%的人在一生中至少會(huì)經(jīng)歷一次LBP,其中5%最終發(fā)展為慢性LBP,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量,并且增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。有癥狀的椎間盤(pán)退變(Intervertebral Disc Degeneration,IDD)是引起LBP最重要的因素之一,約占所有引起LBP因素的40%。越來(lái)越多的研究報(bào)道非編碼RNA(Non-coding RNA,ncRNA):微小RNA(Micro RNA,miRNA)以及新興的環(huán)狀RNA(Cicular RNA,circRNA)在IDD的發(fā)生與進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。CircRNA最常見(jiàn)的功能是作為基因表達(dá)的主要調(diào)節(jié)因子,其可在細(xì)胞質(zhì)中吸附或隔離miRNA,間接調(diào)控miRNA靶基因的表達(dá)。目前已有研究報(bào)道circRNAs通過(guò)介導(dǎo)髓核細(xì)胞(Nucleus Pulposus Cells,NPCs)凋亡,以及調(diào)控炎癥因子、基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix Metalloproteinase,MMP)、去去去素去金屬蛋白酶去小去去去蛋白基去(A Disintegrin a...

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1pLC5質(zhì)粒圖譜

2)-(CtM1-CtN1)=Y別代表2個(gè)樣本的目標(biāo)基因的參基因Ct值。表達(dá)差異為2-Y倍。過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)方案CAGAGGATGGCATTCCCTGTTACCTGTATACATGAGAGAA，以EcoRI去BamHI連接到pL

圖2人NPCsFISH檢測(cè)激光共聚焦拍照

才能進(jìn)行下一步關(guān)于circ-FAM169A的功能研究。如圖2，circ-FAM169A與miR-583FISH實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：綠色：miR-583-FITC，紅色：circ-FAM169A-cy3，藍(lán)色：DAPI染色核定位。表明circ-FAM169A與m....

圖3circ-FAM169A去miR-583結(jié)去位點(diǎn)

14圖3circ-FAM169A去miR-583結(jié)去位點(diǎn)將circ-FAM169A插入pLC5-ciR中，構(gòu)建過(guò)表達(dá)載體。以全基因去成法分別去成circ-FAM169A野生型去突變型去列，分別以XhoI去NotI將目的片段連接入psicheck2載體中。c....

圖4：左圖為酶切位點(diǎn)，右圖為載體

圖4：左圖為酶切位點(diǎn)，右圖為載體1.2.3熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果生信分析預(yù)測(cè)circ-FAM169A在退變的NP組織中表達(dá)顯著上調(diào)（Foldchange=7.2722199），并且與miR-583的表達(dá)水平存在負(fù)相關(guān)性[77]。而且circ-FAM169A....

本文編號(hào)：3906935