RES通過TLR4與PI3K/Akt信號通路發(fā)揮抗IL-1β誘導的骨關節(jié)炎作用的體外實驗研究
發(fā)布時間:2024-01-27 15:22
目的:探討RES是否可通過調(diào)控TLR4與PI3K/Akt信號通路發(fā)揮抗IL-1β誘導的SW1353細胞炎癥反應效應,為進一步闡明OA的發(fā)病機制及探索OA的營養(yǎng)治療提供實驗依據(jù)。方法:SW1353細胞系購置于中國科學院上海生科院細胞資源中心。CCK-8法檢測不同濃度RES(0100μmol/L)對加/不加IL-1β(10 ng/mL)處理對SW1353細胞增殖活力的影響;不同濃度TLR4抑制劑CLI-095及PI3K抑制劑LY294002對細胞增殖活力的影響。ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中MMP-13表達水平;Western blot法檢測TLR4、p-Akt及Akt的蛋白表達水平。結果:1、不同濃度RES和/或IL-1β對細胞增殖活力的影響與空白對照組相比,DMSO對細胞增殖活力無明顯影響(P>0.05);與DMSO組相比,RES(3.12525μmol/L)可促進細胞增殖活力(P<0.01),RES(100μmol/L)則顯著抑制細胞增殖活力(P<0.05);IL-1β(10 ng/mL)處理對細胞增殖活力無明顯影響(P&...
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 軟骨細胞來源
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器
2.1.4 試劑配制
2.2 實驗方法
2.2.1 SW1353細胞培養(yǎng)
2.2.2 細胞增殖活力檢測
2.2.3 細胞處理
2.2.4 ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中MMP-13表達水平
2.2.5 Westernblot法檢測TLR4、p-Akt、Akt的蛋白表達水平
2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結果
3.1 不同濃度RES和/或IL-1β處理對SW1353細胞增殖活力的影響
3.2 RES對IL-1β處理的SW1353細胞分泌MMP-13水平影響
3.3 RES對IL-1β處理的SW1353細胞中TLR4蛋白表達的影響
3.4 IL-1β處理對SW1353細胞中PI3K/Akt信號通路的影響
3.5 RES處理對SW1353細胞中PI3K/Akt信號通路的影響
3.6 TLR4信號通路抑制后,RES對IL-1β處理的SW1353細胞中PI3K/Akt信號通路的影響
3.7 PI3K/Akt信號通路抑制后,RES對IL-1β處理的SW1353細胞中TLR4信號通路的影響
4 討論
5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷
本文編號:3887194
【文章頁數(shù)】:60 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 軟骨細胞來源
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器
2.1.4 試劑配制
2.2 實驗方法
2.2.1 SW1353細胞培養(yǎng)
2.2.2 細胞增殖活力檢測
2.2.3 細胞處理
2.2.4 ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中MMP-13表達水平
2.2.5 Westernblot法檢測TLR4、p-Akt、Akt的蛋白表達水平
2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結果
3.1 不同濃度RES和/或IL-1β處理對SW1353細胞增殖活力的影響
3.2 RES對IL-1β處理的SW1353細胞分泌MMP-13水平影響
3.3 RES對IL-1β處理的SW1353細胞中TLR4蛋白表達的影響
3.4 IL-1β處理對SW1353細胞中PI3K/Akt信號通路的影響
3.5 RES處理對SW1353細胞中PI3K/Akt信號通路的影響
3.6 TLR4信號通路抑制后,RES對IL-1β處理的SW1353細胞中PI3K/Akt信號通路的影響
3.7 PI3K/Akt信號通路抑制后,RES對IL-1β處理的SW1353細胞中TLR4信號通路的影響
4 討論
5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
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