一、目的檢測(cè)LncRNANNT-AS1骨肉瘤組織與骨肉瘤細(xì)胞系中的表達(dá)水平,分析其表達(dá)與臨床病理特征的相關(guān)性。進(jìn)一步通過體外細(xì)胞系功能及體內(nèi)OS-732裸鼠荷瘤模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探討LncRNA NNT-AS1在骨肉瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用及相關(guān)機(jī)制。二、材料與方法首先檢測(cè)了 LncRNA NNT-AS1在47例骨肉瘤組織中的表達(dá),隨后檢測(cè)了其在永生化的成骨細(xì)胞以及骨肉瘤細(xì)胞系中的表達(dá)水平。體外研究,首先采用CCK-8實(shí)驗(yàn)以及克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)干擾LncRNA NNT-AS1的內(nèi)源性表達(dá)之后細(xì)胞增殖能力;隨后使用流式細(xì)胞術(shù)分析了干擾LncRNA NNT-AS1后,骨肉瘤細(xì)胞的凋亡,細(xì)胞周期分布水平;同時(shí)使用了 Transwell實(shí)驗(yàn)分析了干擾LncRNA NNT-AS1后細(xì)胞的侵襲能力以及增殖、轉(zhuǎn)移相關(guān)關(guān)鍵蛋白的表達(dá)變化。體內(nèi)研究,將內(nèi)源性LncRNA NNT-AS1下調(diào)的OS-732細(xì)胞皮下注射到裸鼠腋下,按時(shí)間點(diǎn)測(cè)量裸鼠體重與移植瘤大小。5周后處死裸鼠,切取移植瘤瘤體組織檢測(cè)移植瘤組織中腫瘤增殖的情況(通過C-Myc染色)。三、結(jié)果1.LncRNA NNT-AS1在骨肉瘤組織、細(xì)胞中顯著上調(diào)...

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

圖２－１蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線??Ｆｉｇ．２－１?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ??

圖２－２電泳凝膠與ＰＶＤＦ膜疊放示意圖??Ｆｉｇ．２－２?ｔｈｅ?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｇｅｌ?ａｎｄ?ＰＶＤＦ?ｆｉｌｍ??？＇

圖２－４靶向下調(diào)ＬｎｃＲＮＡ?ＮＮＴ－ＡＳＩ細(xì)胞增殖水平的變化??－－－－

圖２－５干擾ＬｎｃＲＮＡ?ＮＮＴ－ＡＳ１表達(dá)抑制骨肉瘤細(xì)胞的克隆形成率??－

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