發(fā)布時間：2023-10-06 14:30

　　瘢痕疙瘩是創(chuàng)傷愈合最常見的病理形式,特征是超過原始邊界的侵襲性生長和細胞外基質(zhì)如膠原蛋白的過度產(chǎn)生,但其病因和機制尚不清楚。瘢痕疙瘩嚴重影響外觀和身體功能,缺乏有效的治療方法,且手術(shù)切除后復發(fā)率高。因此聯(lián)合基因治療成為了新的研究熱點。目前已有許多研究表明,miRNA參與多種病理過程,并在纖維化過程中發(fā)揮重要作用。在這項研究中,我們研究了 miR-152-5p在瘢痕疙瘩中的作用和調(diào)節(jié)機制。與正常對照組織及其成纖維細胞相比,miR-152-5p在瘢痕疙瘩組織和原代成纖維細胞中表達均顯著下調(diào)。此外,研究發(fā)現(xiàn)miR-152-5p的下調(diào)與瘢痕疙瘩成纖維細胞的增殖,遷移,侵襲功能和細胞凋亡率相關(guān)。miR-152-5p的過表達顯著抑制了瘢痕疙瘩中纖維化的進程。Smad3是miR-152-5p的直接靶標,在瘢痕疙瘩中高表達。敲低Smad3和過表達miR-152-5p均可以抑制纖維化進展。另外,我們研究發(fā)現(xiàn)miR-152-5p和Smad3,可能是通過調(diào)節(jié)Erkl-2和Jak2/Stat3/Akt途徑及3型膠原蛋白的產(chǎn)生而發(fā)揮作用�？傊�,我們的研究表明參與纖維化進展的miR-152-5p/Smad3調(diào)節(jié)途...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

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引言
1 實驗材料
    1.1 實驗組織
    1.2 實驗細胞
    1.3 實驗試劑
    1.4 常用液體的配置
    1.5 實驗儀器和設(shè)備
    1.6 實驗的倫理
2 實驗樣本的入選標準和制備方法
    2.1 組織樣本的選材
    2.2 組織樣本的處理
    2.3 組織樣本總RNA的提取
    2.4 原代細胞的培養(yǎng)
    2.5 細胞樣本總RNA的提取
    2.6 細胞總蛋白的提取
    2.7 轉(zhuǎn)染細胞的制備
    2.8 載體構(gòu)建
3 實驗方法
    3.1 miR-152-5p在瘢痕疙瘩中表達水平的變化
    3.2 轉(zhuǎn)染后的表達變化
    3.3 CCK8實驗
    3.4 Transwell遷移和侵襲實驗
    3.5 劃痕實驗
    3.6 細胞周期實驗
    3.7 細胞凋亡實驗
    3.8 熒光雙報告基因?qū)嶒?br>    3.9 WB方法檢測相關(guān)蛋白表達水平變化
    3.10 結(jié)果統(tǒng)計分析和圖形處理
4 數(shù)據(jù)和結(jié)果
    4.1 第一部分 miR-152-5p對瘢痕疙瘩纖維化相關(guān)功能的影響及機制
    4.2 第二部分 Smad3表達在瘢痕疙瘩纖維化進程中的作用
    4.3 第三部分 驗證miR-152的靶點Smad3
    4.4 第四部分 miR-152-5p與Smad3在瘢痕疙瘩纖維化中的作用及機制
5 討論與結(jié)論
6 參考文獻
綜述
    參考文獻
作者簡介



本文編號：3851883