目的通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)探究β-欖香烯是否通過減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷,促進(jìn)損傷神經(jīng)元的神經(jīng)突起生長,促進(jìn)大鼠脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù),為臨床提供全新的治療策略。方法首先通過CCK-8試驗(yàn)與LDH釋放試驗(yàn)檢測β-欖香烯在正常培養(yǎng)條件下對脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元細(xì)胞系VSC4.1細(xì)胞活力與毒性的影響。隨后構(gòu)建氯化鈷模型模擬細(xì)胞缺氧損傷,CCK-8試驗(yàn)與LDH釋放試驗(yàn)檢測β-欖香烯對氯化鈷損傷后的VSC4.1細(xì)胞活力與毒性的影響,流式Annexin/PI雙染檢測對氯化鈷損傷后的VSC4.1細(xì)胞凋亡的影響。免疫印跡檢測對照組、β-欖香烯給藥組、氯化鈷損傷組、β-欖香烯+氯化鈷組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白(grp78、chop)表達(dá)與凋亡相關(guān)蛋白(cleaved-caspase3)表達(dá)。隨后我們運(yùn)用免疫熒光染色觀察β-欖香烯與Y27632對原代皮質(zhì)神經(jīng)元神經(jīng)突生長情況,pull down試驗(yàn)檢測兩者對RhoA激酶活化影響,免疫印跡檢測兩者對RhoA通路下游limk與confilin蛋白磷酸化的影響。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,我們運(yùn)用Allen’s擊打法進(jìn)行脊髓損傷模型的構(gòu)建,Tunel染色檢測假手術(shù)組、損傷組與β-欖香烯治療組脊髓前...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
ABSTRACT
縮寫、符號清單、術(shù)語
1. 前言
2. 實(shí)驗(yàn)方法
3. 材料和主要實(shí)驗(yàn)儀器
4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 低濃度β-欖香烯在正常培養(yǎng)條件下促進(jìn)VSC4.1運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元增殖
    4.2 β-欖香烯減輕氯化鈷誘導(dǎo)的VSC4.1運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的化學(xué)缺氧損傷
    4.3 β-欖香烯減輕氯化鈷誘導(dǎo)的VSC4.1運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元凋亡
    4.4 β-欖香烯通過減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制氯化鈷引起的細(xì)胞凋亡
    4.5 β-欖香烯促進(jìn)神經(jīng)突的生長
    4.6 β-欖香烯通過抑制RhoA激酶的活化促進(jìn)神經(jīng)突的生長
    4.7 β-欖香烯減少大鼠脊髓損傷后脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元凋亡
    4.8 β-欖香烯促進(jìn)大鼠脊髓損傷后GAP43表達(dá),并促進(jìn)后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)
5. 討論
6. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡歷



本文編號：3851584