【目的】脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是指由于外力作用于脊柱并導致相應(yīng)脊髓壓迫或斷裂,進而造成傳導通路中斷以及對應(yīng)節(jié)段感覺運動功能的障礙。脊髓損傷作為一種嚴重的致殘性中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷,其會嚴重降低患者的生活質(zhì)量并增加患者生活與經(jīng)濟上的負擔。近些年來,國內(nèi)外脊髓損傷發(fā)病率呈逐年上升趨勢,然而由于脊髓損傷的病理分子機制極其復(fù)雜,因此臨床上對脊髓損傷修復(fù)缺少行之有效的方法。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是具有調(diào)控基因表達作用的以一種非編碼RNA。近些年來關(guān)于長鏈非編碼RNA的相關(guān)研究越來越多,且其在脊髓損傷病理變化中的作用也亟待闡明。本研究擬通過應(yīng)用microarray芯片——高通量組學方法對大鼠脊髓損傷后不同時間點的信使RNA(messenger RNA,mRNA)和lncRNAs表達情況進行檢測,并通過生物信息學分析得到可能參與脊髓損傷后關(guān)鍵生物學過程的差異表達mRNA及l(fā)ncRNA。此外本研究擬進一步驗證并闡明關(guān)鍵lncRNA的功能,為脊髓損傷提供新的潛在治療靶點。【方法】本課題首先制備大鼠脊髓挫傷模型,應(yīng)用micro...

【文章頁數(shù)】：125 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、脊髓損傷后mRNA的表達譜分析
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實驗材料與器械
        1.1.2 大鼠脊髓挫傷模型制備
        1.1.3 芯片檢測
        1.1.4 生物信息學分析
        1.1.5 統(tǒng)計學分析
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 大鼠脊髓挫傷模型制備
        1.2.2 樣本RNA質(zhì)檢
        1.2.3 生物信息學分析
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、脊髓損傷后lncRNA的表達譜分析
    2.1 對象和方法
        2.1.1 實驗材料與器械
        2.1.2 大鼠脊髓挫傷模型制備
        2.1.3 芯片檢測
        2.1.4 生物信息學分析
        2.1.5 統(tǒng)計學分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 樣本聚類及相關(guān)性分析
        2.2.2 差異lncRNAs的篩選
        2.2.3 差異lncRNAs的功能分析
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、NONRATT006058 調(diào)控Brca1 抑制神經(jīng)元突起生長的研究
    3.1 對象和方法
        3.1.1 實驗材料與器械
        3.1.2 qRT-PCR驗證關(guān)鍵mRNA及 lncRNA
        3.1.3 大鼠脊髓神經(jīng)元原代培養(yǎng)
        3.1.4 熒光原位雜交明確NONRATT006058 在神經(jīng)元內(nèi)定位
        3.1.5 慢病毒過表達NONRATT006058 大鼠神經(jīng)元細胞模型構(gòu)建
        3.1.6 NONRATT006058 特異性RNA抑制劑感染神經(jīng)元
        3.1.7 qRT-PCR檢測NONRATT006058及Brca1 表達變化
        3.1.8 Westem blot檢測Brca1 表達變化
        3.1.9 神經(jīng)元免疫細胞熒光染色觀察突起生長
        3.1.10 統(tǒng)計學分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 NONRATT006058 與其靶基因Brca1 表達變化初步驗證
        3.2.2 大鼠神經(jīng)元細胞原代培養(yǎng)及明確NONRATT006058 定位
        3.2.3 過表達及抑制表達NONRATT006058 大鼠神經(jīng)元細胞模型構(gòu)建
        3.2.4 NONRATT006058 在大鼠神經(jīng)元中可調(diào)節(jié)Brca1 表達
        3.2.5 NONRATT006058 調(diào)控大鼠神經(jīng)元突起生長
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述 長鏈非編碼RNA與脊髓損傷的研究進展
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3799695