Semaphorins家族成員參與了軸突發(fā)育過程中的軸突導(dǎo)向。Semaphorin4D(Sema4D)已被證實(shí)具有促進(jìn)神經(jīng)再生和抑制神經(jīng)再生的雙重作用。在軸突的發(fā)育過程中,它既可以促進(jìn)軸突的生長,也可以促進(jìn)生長錐的塌陷。因此,Sema4D可能在創(chuàng)傷性神經(jīng)損傷的修復(fù)中起到了關(guān)鍵性作用。本學(xué)位論文中,主要探索了Sema4D在成年斑馬魚脊髓損傷修復(fù)模型中的神經(jīng)保護(hù)作用以及機(jī)制。實(shí)時(shí)熒光定量PCR和原位雜交的結(jié)果顯示,與假手術(shù)組相比,Sema4D mRNA在斑馬魚脊髓損傷后的急性期(脊髓損傷后72小時(shí))升高表達(dá);而在脊髓損傷后的修復(fù)期(脊髓損傷后11至21天),它的表達(dá)水平逐漸降低。Sema4D和Islet-1(運(yùn)動神經(jīng)元的標(biāo)記物)或Iba-1(小膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記物)的免疫共標(biāo)結(jié)果顯示,在脊髓損傷后4小時(shí)和12小時(shí),沿中央管分布的Sema4D陽性運(yùn)動神經(jīng)元被小膠質(zhì)細(xì)胞包繞。之后本課題對脊髓橫斷的斑馬魚進(jìn)行Sema4D morpholino給藥以抑制其蛋白表達(dá),順行和逆行神經(jīng)示蹤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,Sema4D參與了斑馬魚脊髓損傷后的軸突再生。游泳追蹤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,抑制Sema4D表達(dá)可阻礙斑馬魚脊髓損...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要試劑配制
    2.2 方法
        2.2.1 斑馬魚脊髓損傷模型構(gòu)建
        2.2.2 熒光定量PCR
        2.2.3 探針制備
        2.2.4 原位雜交
        2.2.5 Morpholino實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 免疫熒光
        2.2.7 正向神經(jīng)示蹤
        2.2.8 逆向神經(jīng)示蹤
        2.2.9 行為學(xué)測試
        2.2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    3.1 脊髓損傷引起Sema4D mRNA表達(dá)地迅速感應(yīng)
    3.2 Sema4D表達(dá)集中在脊髓中央管處
    3.3 脊髓損傷后Sema4D沿中央管和運(yùn)動神經(jīng)元發(fā)生共定位
    3.4 在脊髓損傷后的急性反應(yīng)階段，Sema4D和小膠質(zhì)細(xì)胞的激活密切相關(guān)
    3.5 下調(diào)Sema4D的表達(dá)抑制了斑馬魚脊髓損傷后軸突的再生
    3.6 抑制Sema4D的表達(dá)阻礙了斑馬魚脊髓損傷后運(yùn)動能力的恢復(fù)
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文情況
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號：3791609