目的:建立大鼠脊髓損傷模型,利用多光子顯微成像技術(shù)觀察雷帕霉素是否通過(guò)SCI損傷后早期激活自噬促進(jìn)損傷區(qū)域神經(jīng)元的存活和軸突的延長(zhǎng),揭示脊髓損傷后自噬激活對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞及軸突的影響及對(duì)大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能的保護(hù)作用。方法:(1)清潔級(jí)SD雌性大鼠,隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組、安慰劑組、雷帕霉素組、3-MA組,Allen法建立大鼠脊髓損傷模型(打擊部位為T(mén)10),并用BBB評(píng)分評(píng)價(jià)損傷后不同時(shí)間點(diǎn)(1h、6h、1d、3d、5d、7d、10d)各組大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能的改變情況;(2)在損傷后不同時(shí)間點(diǎn)處死老鼠,取脊髓組織標(biāo)本,Western blot檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3II、Beclin1的表達(dá),觀察損傷后不同組別、不同時(shí)間點(diǎn)自噬蛋白的表達(dá)情況(3)將收集的脊髓標(biāo)本進(jìn)行切片,HE染色法于普通光鏡下觀察脊髓組織的變化情況并后期與多光子顯微鏡下觀察的圖像進(jìn)行對(duì)比;(4)在多光子顯微鏡下進(jìn)行觀察,利用先進(jìn)的圖像分析和光譜分析技術(shù),從微結(jié)構(gòu)和光譜角度反映不同階段神經(jīng)纖維的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征,獲得能夠定量反映軸突損傷修復(fù)過(guò)程不同階段軸突壞死及存活的變化趨勢(shì)的光學(xué)參數(shù)指標(biāo)。結(jié)果:(1)從損傷后第5d時(shí)間點(diǎn)開(kāi)始,雷帕...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略語(yǔ)
中文摘要
英文摘要
第一部分:自噬在大鼠脊髓損傷中的作用
    1.1 前言
    1.2 材料和方法
    1.3 結(jié)果
    1.4 討論
    1.5 小結(jié)
    1.6 參考文獻(xiàn)
第二部分:多光子顯微鏡監(jiān)測(cè)調(diào)控自噬下脊髓損傷的修復(fù)進(jìn)程
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
    2.6 參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



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