本文關(guān)鍵詞：TGF-β1預(yù)處理調(diào)控HIF-1α蛋白表達(dá)對心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)預(yù)處理調(diào)控缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)的蛋白表達(dá)水平是否可以影響心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷。方法:建立心肌細(xì)胞株H9c2缺氧/復(fù)氧損傷模型及缺氧預(yù)處理模型,將H9c2心肌細(xì)胞隨機分為5組:正常對照組(Control組)、缺氧復(fù)氧組(H/R組)、缺氧預(yù)處理組(HPC組)、TGF-β1預(yù)處理組(TGF-β1-Pre組)、TGF-β1抑制劑組(SB431542組),各組復(fù)氧結(jié)束后測定培養(yǎng)液乳酸脫氫酶(LDH)活性、HIF-1α蛋白表達(dá)水平及心肌細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:Control組、H/R組、HPC組、TGF-β1-Pre組、SB431542組的LDH活性(U/L)分別為201.2±48.9、936.6±93.7、727.0±75.9、747.3±63.1、957.3±55.3,心肌細(xì)胞凋亡率(%)分別為25.5±3.2、71.8±5.5、42.8±6.1、54.1±4.1、82.8±9.7,與H/R組比較,HPC組、TGF-β1-Pre組的LDH活性、心肌細(xì)胞凋亡率顯著降低(P0.05),HIF-1α蛋白表達(dá)水平升高(P0.05);與HPC組比較,TGF-β1-Pre組各項指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:不論在常氧條件還是在缺氧環(huán)境下,TGF-β1均可以增加HIF-1α的蛋白表達(dá)水平,并且在缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)所致的心肌細(xì)胞損傷中發(fā)揮抗凋亡作用,這種作用與調(diào)控HIF-1α的蛋白水平有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：轉(zhuǎn)化生長因子-β1 缺氧/復(fù)氧損傷 缺氧誘導(dǎo)因子-1α 預(yù)處理
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R614
【目錄】：

• 摘要8-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-13
• 研究內(nèi)容與方法13-19
• 1.研究對象13
• 1.1 主要試劑與耗材13
• 1.2 主要儀器13
• 2.方法13-18
• 2.1 實驗試劑的配制13-14
• 2.2 H9c2心肌細(xì)胞培養(yǎng)方法14-15
• 2.2.1 H9c2心肌細(xì)胞復(fù)蘇14
• 2.2.2 H9c2心肌細(xì)胞傳代14
• 2.2.3 H9c2心肌細(xì)胞凍存14-15
• 2.2.4 H9c2心肌細(xì)胞換液15
• 2.3 H9c2心肌細(xì)胞H/R模型的建立15
• 2.4 實驗干預(yù)方法15-16
• 2.4.1 不同濃度的TGF-β1 干預(yù)15
• 2.4.2 不同時間的TGF-β1 干預(yù)15
• 2.4.3 TGF-β1 在常氧或缺氧條件下干預(yù)15-16
• 2.5 實驗分組16
• 2.6 使用蛋白電泳（Western blot）檢測HIF-1α 的蛋白表達(dá)16-18
• 2.6.1 細(xì)胞蛋白的提取16
• 2.6.2 細(xì)胞蛋白濃度的測定16
• 2.6.3 聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）16-18
• 2.6.3.1 凝膠的配制16-17
• 2.6.3.2 電泳17
• 2.6.3.3 轉(zhuǎn)膜17
• 2.6.3.4 封閉17
• 2.6.3.5 一抗孵育17
• 2.6.3.6 洗膜及二抗孵育17
• 2.6.3.7 洗膜及曝光17-18
• 2.7 乳酸脫氫酶的測定18
• 2.8 細(xì)胞凋亡率的檢測18
• 2.9 Western blot及Tunel細(xì)胞凋亡結(jié)果分析18
• 3.統(tǒng)計學(xué)分析18-19
• 結(jié)果19-24
• 討論24-30
• 小結(jié)30-31
• 致謝31-32
• 參考文獻(xiàn)32-38
• 綜述38-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文44-45
• 導(dǎo)師評閱表45

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本文編號：377395