目的通過(guò)研究沉默信息調(diào)節(jié)因子1(SIRT1)基因敲除對(duì)骨關(guān)節(jié)炎小鼠VEGF/AKT通路的作用,探討骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨退變的可能機(jī)制。方法將小鼠分為兩組:SIRT1^+/+小鼠骨關(guān)節(jié)炎模型組(A組,n=6);SIRT1^-/-小鼠骨關(guān)節(jié)炎模型組(B組,n=6)。熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)SIRT1基因表達(dá)情況;HE染色、番紅O-固綠雙染色觀(guān)察膝關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)結(jié)構(gòu)改變,Mankin評(píng)分評(píng)價(jià)膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)軟骨退變,免疫組化染色檢測(cè)膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中SIRT1、VEGF和AKT蛋白水平。結(jié)果 B組SIRT1 m RNA表達(dá)量為2.24417±1.316569,明顯低于A(yíng)組(P<0.01)。HE染色和番紅O-固綠雙染色結(jié)果顯示,B組膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)軟骨退變明顯,Mankin評(píng)分分值為9.8333±1.94079分,明顯高于A(yíng)組(P<0.05),B組SIRT1、VEGF和AKT免疫組化染色積分分別為3.3333±1.96638、10.0000±2.44949和1.3333±1.21106,B組SIRT1蛋白表達(dá)與A組相比差異不顯著(P>0.05);B組VEG...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1. 1 材料
        1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2主要儀器
        1.1.3主要試劑
    1. 2 方法
        1.2.1軟骨特異性敲除SIRT1基因小鼠的繁育
        1.2.2實(shí)驗(yàn)分組及膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎模型的建立
        1.2.3熒光定量PCR反應(yīng)鑒定軟骨特異性敲除SIRT1基因小鼠的基因表型
        1.2.4軟骨組織學(xué)檢測(cè)
        1.2.5免疫組化染色
        1.2.6免疫組化結(jié)果觀(guān)察與判定
        1.2.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2. 1 軟骨特異性敲除SIRT1 基因小鼠的鑒定
    2. 2軟骨特異性敲除SIRT1 基因小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨組織學(xué)觀(guān)察
    2. 3 SIRT1、VEGF、AKT免疫組化染色
3 討論



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