目的:張力是影響皮膚創(chuàng)面愈合的重要因素。皮膚缺損越大的創(chuàng)面存在越大的機械張力,高張力常常引起創(chuàng)面愈合延遲,最終導致病理性瘢痕的形成。皮膚成纖維細胞的增殖、遷移和分化被認為是創(chuàng)面愈合過程中的關(guān)鍵因素,調(diào)控成纖維細胞的生物學特性可能是促進創(chuàng)面愈合的有效手段。我們前期研究證實高幅度牽張力會刺激成纖維細胞增殖與分化,誘導肌成纖維細胞形成。局部應(yīng)用間充質(zhì)干細胞(MSCs)能夠促進創(chuàng)面愈合,但是存在潛在的致癌風險。近年來,干細胞的應(yīng)用理念已經(jīng)延伸到利用干細胞的外泌體影響其它細胞的功能,調(diào)控機體微環(huán)境。目前,脂肪間充質(zhì)干細胞外泌體(ADMSCs-exos)對張力性創(chuàng)面愈合的作用尚不完全清楚。本研究通過探索ADMSCs-exos促進張力性創(chuàng)面愈合的作用機制,為提升張力性創(chuàng)面修復效率和預防增生性瘢痕提供理論依據(jù),為臨床治療張力性創(chuàng)面提供新思路。方法:1.從健康人的皮膚和脂肪組織中分離出正常的皮膚成纖維細胞和脂肪間充質(zhì)干細胞。采用梯度超速離心法從人脂肪間充質(zhì)干細胞中提取外泌體(Exosomes),BCA法檢測外泌體濃度,并通過透射電鏡觀察外泌體粒子形態(tài)特征,應(yīng)用粒度儀檢測外泌體的直徑分布,利用蛋白免疫印跡...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1 實驗標本與材料
        1.1 實驗標本來源
        1.2 實驗儀器設(shè)備
        1.3 實驗試劑常用溶液配制
        1.4 常用溶液配制
    2 實驗方法
        2.1 原代細胞的培養(yǎng)
        2.2 ADMSCs-exos 的提取及鑒定
        2.3 體內(nèi)實驗驗證 ADMSCs-exos 對張力性創(chuàng)面愈合的作用
        2.4 體外實驗驗證 ADMSCs-exos 促進創(chuàng)面愈合的作用
        2.5 統(tǒng)計學分析
實驗結(jié)果
    1 ADMSCs-exos的分離提取及鑒定
        1.1 脂肪間充質(zhì)干細胞和人皮膚成纖維細胞形態(tài)學觀察
        1.2 ADMSCs-exos 的鑒定
    2 ADMSCs-exos對張力性創(chuàng)面愈合的作用
    3 ADMSCs-exos促進成纖維細胞的增殖和遷移
    4 ADMSCs-exos促進成纖維細胞的膠原合成
    5 ADMSCs-exos通過激活Wnt/β-catenin信號通路促進創(chuàng)面愈合
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號：3750105