目的:張力是影響皮膚創(chuàng)面愈合的重要因素。皮膚缺損越大的創(chuàng)面存在越大的機(jī)械張力,高張力常常引起創(chuàng)面愈合延遲,最終導(dǎo)致病理性瘢痕的形成。皮膚成纖維細(xì)胞的增殖、遷移和分化被認(rèn)為是創(chuàng)面愈合過(guò)程中的關(guān)鍵因素,調(diào)控成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性可能是促進(jìn)創(chuàng)面愈合的有效手段。我們前期研究證實(shí)高幅度牽張力會(huì)刺激成纖維細(xì)胞增殖與分化,誘導(dǎo)肌成纖維細(xì)胞形成。局部應(yīng)用間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)能夠促進(jìn)創(chuàng)面愈合,但是存在潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn)。近年來(lái),干細(xì)胞的應(yīng)用理念已經(jīng)延伸到利用干細(xì)胞的外泌體影響其它細(xì)胞的功能,調(diào)控機(jī)體微環(huán)境。目前,脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體(ADMSCs-exos)對(duì)張力性創(chuàng)面愈合的作用尚不完全清楚。本研究通過(guò)探索ADMSCs-exos促進(jìn)張力性創(chuàng)面愈合的作用機(jī)制,為提升張力性創(chuàng)面修復(fù)效率和預(yù)防增生性瘢痕提供理論依據(jù),為臨床治療張力性創(chuàng)面提供新思路。方法:1.從健康人的皮膚和脂肪組織中分離出正常的皮膚成纖維細(xì)胞和脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞。采用梯度超速離心法從人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞中提取外泌體(Exosomes),BCA法檢測(cè)外泌體濃度,并通過(guò)透射電鏡觀察外泌體粒子形態(tài)特征,應(yīng)用粒度儀檢測(cè)外泌體的直徑分布,利用蛋白免疫印跡...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本與材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來(lái)源
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑常用溶液配制
        1.4 常用溶液配制
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 原代細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 ADMSCs-exos 的提取及鑒定
        2.3 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 ADMSCs-exos 對(duì)張力性創(chuàng)面愈合的作用
        2.4 體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 ADMSCs-exos 促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1 ADMSCs-exos的分離提取及鑒定
        1.1 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞和人皮膚成纖維細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        1.2 ADMSCs-exos 的鑒定
    2 ADMSCs-exos對(duì)張力性創(chuàng)面愈合的作用
    3 ADMSCs-exos促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和遷移
    4 ADMSCs-exos促進(jìn)成纖維細(xì)胞的膠原合成
    5 ADMSCs-exos通過(guò)激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路促進(jìn)創(chuàng)面愈合
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3750105