目的:制備超順磁性脂質(zhì)體作為基因載體,并評(píng)估載體條件和生物安全性。優(yōu)化體外轉(zhuǎn)染條件,提高磁轉(zhuǎn)染效率。探討攜帶Survivin干擾基因的磁性脂質(zhì)體對(duì)骨肉瘤MG-63細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法:1.采用化學(xué)共沉淀法制備Fe₃O₄納米粒子,將其和Lip2000制成磁性脂質(zhì)體。通過瓊脂糖凝膠電泳觀察質(zhì)粒結(jié)合能力。Zeta電位分析儀和振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)(VSM)用于檢測載體的Zeta電位和磁性。透射電子顯微鏡(TEM)用于觀察轉(zhuǎn)染細(xì)胞的能力。細(xì)胞劃痕法和MTT法評(píng)估磁性脂質(zhì)體的細(xì)胞毒性。2.用倒置熒光顯微鏡,觀察不同磁性場作用時(shí)間下轉(zhuǎn)染人腎上皮細(xì)胞(HEK-293)后GFP綠色熒光的表達(dá),從而優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件,以及轉(zhuǎn)染骨肉瘤細(xì)胞(MG-63、143b)的能力。流式技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后GFP表達(dá)強(qiáng)度,并評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。3.構(gòu)建Survivin干擾質(zhì)粒,CTL發(fā)光法、CCK8法檢測磁性脂質(zhì)體載干擾基因?qū)侨饧?xì)胞MG-63細(xì)胞活性和增值的影響;Tanswell檢測對(duì)細(xì)胞遷徙的影響;PI-Hoechst試劑盒檢測對(duì)MG-63細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果:1.凝膠電泳顯示構(gòu)建的所含磁性...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 超順磁性脂質(zhì)體復(fù)合物制備和表征
    1 材料和方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
第二部分 超順磁性脂質(zhì)體細(xì)胞轉(zhuǎn)染和體外抑瘤的研究
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：3745813