超順磁性脂質(zhì)體載Survivin基因?qū)侨饬黾毎绊懙难芯?/H1>

發(fā)布時間：2023-02-19 07:43

　　目的:制備超順磁性脂質(zhì)體作為基因載體,并評估載體條件和生物安全性。優(yōu)化體外轉(zhuǎn)染條件,提高磁轉(zhuǎn)染效率。探討攜帶Survivin干擾基因的磁性脂質(zhì)體對骨肉瘤MG-63細胞生物學(xué)行為的影響。方法:1.采用化學(xué)共沉淀法制備Fe₃O₄納米粒子,將其和Lip2000制成磁性脂質(zhì)體。通過瓊脂糖凝膠電泳觀察質(zhì)粒結(jié)合能力。Zeta電位分析儀和振動樣品磁強計(VSM)用于檢測載體的Zeta電位和磁性。透射電子顯微鏡(TEM)用于觀察轉(zhuǎn)染細胞的能力。細胞劃痕法和MTT法評估磁性脂質(zhì)體的細胞毒性。2.用倒置熒光顯微鏡,觀察不同磁性場作用時間下轉(zhuǎn)染人腎上皮細胞(HEK-293)后GFP綠色熒光的表達,從而優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件,以及轉(zhuǎn)染骨肉瘤細胞(MG-63、143b)的能力。流式技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后GFP表達強度,并評估轉(zhuǎn)染效率。3.構(gòu)建Survivin干擾質(zhì)粒,CTL發(fā)光法、CCK8法檢測磁性脂質(zhì)體載干擾基因?qū)侨饧毎鸐G-63細胞活性和增值的影響;Tanswell檢測對細胞遷徙的影響;PI-Hoechst試劑盒檢測對MG-63細胞凋亡的影響。結(jié)果:1.凝膠電泳顯示構(gòu)建的所含磁性...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 超順磁性脂質(zhì)體復(fù)合物制備和表征
    1 材料和方法
    2 實驗結(jié)果
    3 討論
第二部分 超順磁性脂質(zhì)體細胞轉(zhuǎn)染和體外抑瘤的研究
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
參考文獻
全文總結(jié)
文獻綜述
    參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：3745813

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