新型器官保存液的研制及其對大鼠肺臟低溫保存的效果研究
發(fā)布時間:2022-12-09 02:43
背景:器官保存液與缺血再灌注損傷及維持器官活性密切相關(guān)。Perfadex是一種有效的、也是目前應(yīng)用最廣的肺保存液。但是,其總體肺保存時間有限(≤12小時),并且其術(shù)后原發(fā)性移植物失功(primary graft dysfunction,PGD)的幾率達10-20%。此外,其昂貴的價格也限制了其在國內(nèi)移植領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。所以,研制一種新型的經(jīng)濟有效的器官保存液勢在必行。方法:將肺上皮細胞(BEAS-2B)或肺微血管內(nèi)皮細胞(HPMEC)培養(yǎng)至80-90%融合,去除細胞培養(yǎng)基,分別加入不同的待測保存液,如Perfadex,PBS,0.9%Na Cl,Steen液,DMEM,DMEM+10%FBS等,然后將細胞置入4℃充滿50%O2(含或不含5%CO2)的細胞冷凍箱中來模擬冷缺血過程。18 h或42 h后,將細胞分別轉(zhuǎn)回到37℃常規(guī)細胞培養(yǎng)基環(huán)境來模擬再灌注過程,再灌注4 h。隨后,應(yīng)用MTS測驗來評估細胞活性。我們以傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)基營養(yǎng)成份搭配為基礎(chǔ),研制成新型的器官保存液JT-1,并將其在大鼠肺冷缺血模型上進行驗證,大鼠肺臟在不同的保存液中低溫(4℃)保存24 h后,采集標本并進行檢測及...
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對照表
第1章 文獻綜述
1 器官移植的歷史及國內(nèi)外肺移植現(xiàn)狀
1.1 器官移植的起源和早期嘗試
1.2 國內(nèi)外肺移植現(xiàn)狀
2 器官保存損傷的機制
3 器官保存技術(shù)
3.1 靜態(tài)冷保存
3.2 器官保存液
3.3 體外肺灌注技術(shù)(ex vivo lung perfusion, EVLP)
3.4 常用的體外肺灌注液
4 結(jié)論
參考文獻
第2章 新型器官保存液的研制、篩選和優(yōu)化
2.1 研究背景
2.2 缺血再灌注損傷細胞模型的建立
2.2.1 實驗材料
2.2.2 實驗方法
2.3 器官保存液的成分篩選和優(yōu)化(細胞再灌注損傷模型)
2.3.1 實驗材料
2.3.2 實驗方法
2.3.3 研究結(jié)果
2.3.4 研究結(jié)論
2.4 新型器官保存液JT-1 對細胞缺血再灌注損傷的保護作用
2.4.1 新型器官保存液的配制
2.4.2 定性分析
2.4.3 穩(wěn)定性
2.4.4 新型器官保存液對細胞缺血再灌注損傷的保護作用
2.5 小結(jié)
第3章 新型器官保存液JT-1 對大鼠肺臟低溫保存的效果評價
3.1 研究背景
3.2 實驗部分
3.2.1 實驗動物和分組
3.2.2 實驗所需儀器設(shè)備
3.2.3 肺獲取和保存
3.2.4 肺組織標本的采集
3.2.5 標本的處理及觀察指標
3.2.6 統(tǒng)計學分析
3.3 實驗結(jié)果
3.4 小結(jié)
第4章 結(jié)論
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝
本文編號:3714653
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對照表
第1章 文獻綜述
1 器官移植的歷史及國內(nèi)外肺移植現(xiàn)狀
1.1 器官移植的起源和早期嘗試
1.2 國內(nèi)外肺移植現(xiàn)狀
2 器官保存損傷的機制
3 器官保存技術(shù)
3.1 靜態(tài)冷保存
3.2 器官保存液
3.3 體外肺灌注技術(shù)(ex vivo lung perfusion, EVLP)
3.4 常用的體外肺灌注液
4 結(jié)論
參考文獻
第2章 新型器官保存液的研制、篩選和優(yōu)化
2.1 研究背景
2.2 缺血再灌注損傷細胞模型的建立
2.2.1 實驗材料
2.2.2 實驗方法
2.3 器官保存液的成分篩選和優(yōu)化(細胞再灌注損傷模型)
2.3.1 實驗材料
2.3.2 實驗方法
2.3.3 研究結(jié)果
2.3.4 研究結(jié)論
2.4 新型器官保存液JT-1 對細胞缺血再灌注損傷的保護作用
2.4.1 新型器官保存液的配制
2.4.2 定性分析
2.4.3 穩(wěn)定性
2.4.4 新型器官保存液對細胞缺血再灌注損傷的保護作用
2.5 小結(jié)
第3章 新型器官保存液JT-1 對大鼠肺臟低溫保存的效果評價
3.1 研究背景
3.2 實驗部分
3.2.1 實驗動物和分組
3.2.2 實驗所需儀器設(shè)備
3.2.3 肺獲取和保存
3.2.4 肺組織標本的采集
3.2.5 標本的處理及觀察指標
3.2.6 統(tǒng)計學分析
3.3 實驗結(jié)果
3.4 小結(jié)
第4章 結(jié)論
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝
本文編號:3714653
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