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新型器官保存液的研制及其對(duì)大鼠肺臟低溫保存的效果研究

發(fā)布時(shí)間:2022-12-09 02:43
  背景:器官保存液與缺血再灌注損傷及維持器官活性密切相關(guān)。Perfadex是一種有效的、也是目前應(yīng)用最廣的肺保存液。但是,其總體肺保存時(shí)間有限(≤12小時(shí)),并且其術(shù)后原發(fā)性移植物失功(primary graft dysfunction,PGD)的幾率達(dá)10-20%。此外,其昂貴的價(jià)格也限制了其在國內(nèi)移植領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。所以,研制一種新型的經(jīng)濟(jì)有效的器官保存液勢(shì)在必行。方法:將肺上皮細(xì)胞(BEAS-2B)或肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC)培養(yǎng)至80-90%融合,去除細(xì)胞培養(yǎng)基,分別加入不同的待測(cè)保存液,如Perfadex,PBS,0.9%Na Cl,Steen液,DMEM,DMEM+10%FBS等,然后將細(xì)胞置入4℃充滿50%O2(含或不含5%CO2)的細(xì)胞冷凍箱中來模擬冷缺血過程。18 h或42 h后,將細(xì)胞分別轉(zhuǎn)回到37℃常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基環(huán)境來模擬再灌注過程,再灌注4 h。隨后,應(yīng)用MTS測(cè)驗(yàn)來評(píng)估細(xì)胞活性。我們以傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)基營養(yǎng)成份搭配為基礎(chǔ),研制成新型的器官保存液JT-1,并將其在大鼠肺冷缺血模型上進(jìn)行驗(yàn)證,大鼠肺臟在不同的保存液中低溫(4℃)保存24 h后,采集標(biāo)本并進(jìn)行檢測(cè)及... 

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
前言
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞對(duì)照表
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1 器官移植的歷史及國內(nèi)外肺移植現(xiàn)狀
        1.1 器官移植的起源和早期嘗試
        1.2 國內(nèi)外肺移植現(xiàn)狀
    2 器官保存損傷的機(jī)制
    3 器官保存技術(shù)
        3.1 靜態(tài)冷保存
        3.2 器官保存液
        3.3 體外肺灌注技術(shù)(ex vivo lung perfusion, EVLP)
        3.4 常用的體外肺灌注液
    4 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第2章 新型器官保存液的研制、篩選和優(yōu)化
    2.1 研究背景
    2.2 缺血再灌注損傷細(xì)胞模型的建立
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 器官保存液的成分篩選和優(yōu)化(細(xì)胞再灌注損傷模型)
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.3 研究結(jié)果
        2.3.4 研究結(jié)論
    2.4 新型器官保存液JT-1 對(duì)細(xì)胞缺血再灌注損傷的保護(hù)作用
        2.4.1 新型器官保存液的配制
        2.4.2 定性分析
        2.4.3 穩(wěn)定性
        2.4.4 新型器官保存液對(duì)細(xì)胞缺血再灌注損傷的保護(hù)作用
    2.5 小結(jié)
第3章 新型器官保存液JT-1 對(duì)大鼠肺臟低溫保存的效果評(píng)價(jià)
    3.1 研究背景
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)所需儀器設(shè)備
        3.2.3 肺獲取和保存
        3.2.4 肺組織標(biāo)本的采集
        3.2.5 標(biāo)本的處理及觀察指標(biāo)
        3.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 小結(jié)
第4章 結(jié)論
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號(hào):3714653

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