背景在臨床中,由運(yùn)動(dòng)造成的關(guān)節(jié)軟骨損傷,造成關(guān)節(jié)軟骨局部缺損、退變,導(dǎo)致疼痛和關(guān)節(jié)活動(dòng)受限,進(jìn)而進(jìn)展為骨關(guān)節(jié)炎。因軟骨組織內(nèi)在愈合能力有限,局部軟骨缺損的治療中,自體細(xì)胞移植成為首選方案。目前,尚不能避免傳代造成的軟骨細(xì)胞“去分化”的問題。如何使軟骨細(xì)胞能在短期內(nèi)大量擴(kuò)增以及保持其特性并達(dá)到臨床需求,業(yè)已成為當(dāng)前急需解決的問題。目的采用Ⅱ型膠原酶消化和軟骨組織塊培養(yǎng)序貫法進(jìn)行新西蘭大白兔膝關(guān)節(jié)透明軟骨的軟骨細(xì)胞分離、培養(yǎng)并鑒定。觀察成纖維細(xì)胞因子-18（FGF18）和小分子藥物Kartogenin（KGN）聯(lián)合干預(yù)對(duì)軟骨細(xì)胞的增殖以及對(duì)其細(xì)胞特性的影響。方法1.獲取新西蘭兔雙側(cè)膝關(guān)節(jié)并分離透明軟骨組織,序貫采用單純0.2%Ⅱ型膠原酶消化法和組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代軟骨細(xì)胞分離、培養(yǎng),甲苯胺藍(lán)染色、Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光對(duì)軟骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定,并用CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)并繪制傳代細(xì)胞P1-P6軟骨細(xì)胞生長曲線。用酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法（ELISA）檢測(cè)P1、P5培養(yǎng)基內(nèi)Ⅰ、Ⅱ型膠原蛋白的含量并計(jì)算兩者比例關(guān)系。2.分別取P1和P5軟骨細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn),篩選FGF18和KGN濃度后,設(shè)置FGF18+KGN（濃度分... 

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
綜述:自體細(xì)胞移植及種子細(xì)胞選擇修復(fù)軟骨缺損的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝
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【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3714344