目的:S期激酶相關(guān)蛋白2（S-phase kinase associated protein 2,Skp2）在泛素化降解修飾中起到識別底物的功能,通過降解細(xì)胞周期蛋白而調(diào)控腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展。近年來,Skp2被認(rèn)為在多種腫瘤中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)控作用,但Skp2在骨肉瘤中的作用目前尚不明確。本文擬通過轉(zhuǎn)染Skp2 cDNA表達(dá)質(zhì)�；蛐「蓴_RNA（small interference RNA,siRNA）改變骨肉瘤中Skp2的表達(dá),探討Skp2對骨肉瘤生長、轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為的影響及其可能的分子機(jī)制。由于Skp2還與腫瘤耐藥密切相關(guān),本文將使用甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）持續(xù)誘導(dǎo)的方法建立骨肉瘤耐藥細(xì)胞株,檢測MTX耐藥細(xì)胞生物學(xué)特性;并進(jìn)一步用Skp2短發(fā)夾RNA（short hairpin RNA,shRNA）感染耐藥細(xì)胞,獲得穩(wěn)定下調(diào)Skp2的耐藥細(xì)胞株,檢測Skp2對細(xì)胞耐藥的影響及其分子機(jī)制。方法:第一部分:利用轉(zhuǎn)染的方法向骨肉瘤細(xì)胞株MG63和U2OS導(dǎo)入Skp2的過表達(dá)質(zhì)粒以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)Skp2的表達(dá),實(shí)驗(yàn)分組分別為對照組（沒有經(jīng)過任何處理）、control cDN... 

【文章頁數(shù)】：152 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 SKP2促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞生長和遷移
    1 研究內(nèi)容與方法
        1.1 研究對象
        1.2 內(nèi)容與方法
        1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
第二部分 下調(diào)SKP2對骨肉瘤MG63和SW1353細(xì)胞生長和遷移的影響
    1 研究內(nèi)容與方法
        1.1 研究對象
        1.2 內(nèi)容與方法
        1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
第三部分 SKP2參與骨肉瘤對甲氨蝶呤耐藥敏感性的研究
    1 研究內(nèi)容與方法
        1.1 研究對象
        1.2 內(nèi)容與方法
        1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
個人簡歷
導(dǎo)師評閱表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3700465