Runx2基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)修復(fù)膝關(guān)節(jié)軟骨損傷的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2022-10-30 11:30
目的:構(gòu)建新西蘭大耳兔膝關(guān)節(jié)軟骨損傷模型,通過(guò)觀(guān)察不同干預(yù)情況下兔膝關(guān)節(jié)軟骨損傷的修復(fù)水平,探索Runx2基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是否可以促進(jìn)膝關(guān)節(jié)軟骨損傷的修復(fù),以期為廣大膝關(guān)節(jié)軟骨損傷患者提供更有效的臨床治療方案。方法:新西蘭大耳兔20只,雄性,體重約2.5~2.7kg。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后進(jìn)行膝關(guān)節(jié)軟骨損傷造模手術(shù),造模成功后隨機(jī)分為4組,每組5只,分別為A:空白對(duì)照組、B:透明質(zhì)酸鈉組、C:單純骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組、D:Runx2轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組,分別于第4、8周進(jìn)行膝關(guān)節(jié)取材,取材后對(duì)各組標(biāo)本進(jìn)行軟骨組織修復(fù)肉眼觀(guān)察;通過(guò)RT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組損傷部位修復(fù)物中Ⅱ型膠原(ColII)、蛋白聚糖(Agg)、Ⅹ型膠原(Col-x)、Ⅰ型膠原(Col-I)及Runx2的m RNA表達(dá)量;通過(guò)Western Blot實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)各組的II型膠原蛋白表達(dá)量;對(duì)各組標(biāo)本軟骨切片分別進(jìn)行HE染色、Masson染色,分析各組修復(fù)物性質(zhì)和修復(fù)機(jī)制。結(jié)果:1、膝關(guān)節(jié)軟骨損傷造模成功后,各實(shí)驗(yàn)組軟骨缺損部分都得到不同程度的修復(fù),通過(guò)組織學(xué)肉眼觀(guān)察發(fā)現(xiàn),干預(yù)4周后,與空白對(duì)照組相比,透明質(zhì)酸鈉組損傷...
【文章頁(yè)數(shù)】:38 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
Abbreviation Inde
摘要
Abstract
第一章 導(dǎo)言
第二章 文獻(xiàn)綜述
2.1 軟骨缺損概述
2.1.1 軟骨缺損的病理表現(xiàn)
2.1.2 軟骨損傷的治療方法
2.2 Runx2基因研究進(jìn)展
2.3 Runx2基因在軟骨損傷修復(fù)的作用
2.4 小結(jié)與探討
第三章 實(shí)驗(yàn)材料及方法
3.1 實(shí)驗(yàn)整體技術(shù)路線(xiàn)圖
3.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
3.3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
3.4 模型建立
3.4.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)
3.4.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3.4.3 膝關(guān)節(jié)軟骨損傷模型建立
3.5 實(shí)驗(yàn)分組
3.6 取材及檢測(cè)指標(biāo)
3.7 數(shù)據(jù)處理方法
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.1 軟骨損傷修復(fù)肉眼觀(guān)
4.2 RT-PCRmRNA表達(dá)情況
4.3 相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
4.4 組織病理學(xué)表現(xiàn)
4.4.1 蘇木精—伊紅染色
4.4.2 Masson染色
第五章 分析與討論
5.1 軟骨的自我修復(fù)能力
5.2 Runx2轉(zhuǎn)染組與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組的對(duì)比
5.3 Runx2轉(zhuǎn)染組與透明質(zhì)酸鈉組的對(duì)比
5.4 各組修復(fù)物組成成分構(gòu)成
5.5 展望
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]老年骨質(zhì)疏松患者股骨Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2水平與骨密度的關(guān)系[J]. 解光越,侯曉華,張志勇,高雯. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2016(08)
[2]淫羊藿對(duì)大鼠骨量及骨髓基質(zhì)干細(xì)胞增殖、分化過(guò)程中Cbfa1和Osterix表達(dá)的影響[J]. 高建清,莊素新,黃小敬,袁健東,林垂聰,陳雷. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2016(02)
[3]補(bǔ)腎活血湯治療老年橈骨遠(yuǎn)端骨折的臨床療效觀(guān)察[J]. 黃永銓,羅毅文,王斌,胡年宏,張迅超,陳東風(fēng),侯秋科,徐志明,劉亞梅. 中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志. 2015(03)
[4]補(bǔ)腎通絡(luò)方對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松模型大鼠骨組織RANKL/OPG基因表達(dá)的影響[J]. 閔文,黃桂成,華永慶,黃正泉. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2013(15)
[5]自體軟骨細(xì)胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的機(jī)制探討[J]. 余方圓,盧世璧,黃利虹,許文靜,彭江,趙斌,袁玫,黃靖香. 中國(guó)骨傷. 2010(09)
[6]軟骨組織工程中相關(guān)生長(zhǎng)因子理論研究的最新資訊[J]. 李成,王偉. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(28)
本文編號(hào):3698808
【文章頁(yè)數(shù)】:38 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
Abbreviation Inde
摘要
Abstract
第一章 導(dǎo)言
第二章 文獻(xiàn)綜述
2.1 軟骨缺損概述
2.1.1 軟骨缺損的病理表現(xiàn)
2.1.2 軟骨損傷的治療方法
2.2 Runx2基因研究進(jìn)展
2.3 Runx2基因在軟骨損傷修復(fù)的作用
2.4 小結(jié)與探討
第三章 實(shí)驗(yàn)材料及方法
3.1 實(shí)驗(yàn)整體技術(shù)路線(xiàn)圖
3.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
3.3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
3.4 模型建立
3.4.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)
3.4.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3.4.3 膝關(guān)節(jié)軟骨損傷模型建立
3.5 實(shí)驗(yàn)分組
3.6 取材及檢測(cè)指標(biāo)
3.7 數(shù)據(jù)處理方法
第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.1 軟骨損傷修復(fù)肉眼觀(guān)
4.2 RT-PCRmRNA表達(dá)情況
4.3 相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
4.4 組織病理學(xué)表現(xiàn)
4.4.1 蘇木精—伊紅染色
4.4.2 Masson染色
第五章 分析與討論
5.1 軟骨的自我修復(fù)能力
5.2 Runx2轉(zhuǎn)染組與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組的對(duì)比
5.3 Runx2轉(zhuǎn)染組與透明質(zhì)酸鈉組的對(duì)比
5.4 各組修復(fù)物組成成分構(gòu)成
5.5 展望
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]老年骨質(zhì)疏松患者股骨Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2水平與骨密度的關(guān)系[J]. 解光越,侯曉華,張志勇,高雯. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2016(08)
[2]淫羊藿對(duì)大鼠骨量及骨髓基質(zhì)干細(xì)胞增殖、分化過(guò)程中Cbfa1和Osterix表達(dá)的影響[J]. 高建清,莊素新,黃小敬,袁健東,林垂聰,陳雷. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2016(02)
[3]補(bǔ)腎活血湯治療老年橈骨遠(yuǎn)端骨折的臨床療效觀(guān)察[J]. 黃永銓,羅毅文,王斌,胡年宏,張迅超,陳東風(fēng),侯秋科,徐志明,劉亞梅. 中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志. 2015(03)
[4]補(bǔ)腎通絡(luò)方對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松模型大鼠骨組織RANKL/OPG基因表達(dá)的影響[J]. 閔文,黃桂成,華永慶,黃正泉. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2013(15)
[5]自體軟骨細(xì)胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的機(jī)制探討[J]. 余方圓,盧世璧,黃利虹,許文靜,彭江,趙斌,袁玫,黃靖香. 中國(guó)骨傷. 2010(09)
[6]軟骨組織工程中相關(guān)生長(zhǎng)因子理論研究的最新資訊[J]. 李成,王偉. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(28)
本文編號(hào):3698808
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