目的:LKB1在諸多腫瘤中出現(xiàn)表達(dá)異常和突變,但在骨肉瘤中的詳盡功能還未見報(bào)道。本課題旨在通過對(duì)LKB1在骨肉瘤細(xì)胞內(nèi)分子機(jī)制的研究,為臨床上對(duì)于預(yù)防和治療骨肉瘤提供了理論支持和新策略。方法:利用酵母雙雜交的方法篩選與LKB1相互作用的蛋白,免疫共沉淀加以驗(yàn)證,并且通過細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn),CCK8細(xì)胞活力測定等實(shí)驗(yàn)檢測其對(duì)于骨肉瘤細(xì)胞增殖能力的影響。結(jié)果:通過篩選得到RNF8、BAP1、HERC3等三個(gè)基因與LKB1存在相互作用,免疫共沉淀結(jié)果陽性。RNF8通過調(diào)控LKB1促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的增殖能力,BAP1通過增強(qiáng)LKB1進(jìn)而抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖能力。結(jié)論:RNF8、BAP1通過調(diào)控LKB1的泛素化修飾對(duì)于骨肉瘤的增殖發(fā)揮作用。 

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第一部分 前言
    1.骨肉瘤的研究現(xiàn)狀
    2.LKB1研究現(xiàn)狀
    3.蛋白泛素化
    4.酵母雙雜交
    5.技術(shù)路線圖
    參考文獻(xiàn)
第二部分 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
第三部分 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 篩選驗(yàn)證LKB1的相互作用蛋白
    3.2 LKB1穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的構(gòu)建
    3.3 LKB1 mRNA水平檢測
    3.4 RNF8通過調(diào)控LKB1泛素化修飾參與骨肉瘤細(xì)胞的功能
    3.5 RNF8、BAP1參與骨肉瘤細(xì)胞的增殖
第四部分 討論
第五部分 結(jié)論
第六部分 參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄1 試劑和溶液
    附錄2 縮略詞及術(shù)語表
    附錄3 引物等信息
攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3698700