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ClC-3在17β-雌二醇對(duì)SNI模型鼠疼痛影響中的作用機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2022-08-11 13:27
  目的:該研究旨在探討電壓門(mén)控氯通道-3(voltage-gated chloride channel-3,ClC-3)是否在17β-雌二醇(17β-Estradiol,E2)對(duì)卵巢切除(OVX)大鼠坐骨神經(jīng)損傷(SNI)誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛的影響中發(fā)揮作用,闡明17β-雌二醇調(diào)控去勢(shì)雌鼠神經(jīng)病理性疼痛可能的機(jī)制。方法:此項(xiàng)研究選用研究對(duì)象為雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠。大鼠雙側(cè)去卵巢術(shù)2周后,再對(duì)大鼠行神經(jīng)病理性疼痛模型(坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷模型,Spared Nerve Injury,SNI)手術(shù)。雌性SD大鼠隨機(jī)分組為去卵巢(OVX)組,OVX+SNI組,OVX+SNI+E2組,OVX+SNI+E2+DMSO(溶劑,dimethyl sulfoxid,二甲基亞砜)組,OVX+SNI+E2+Cltx(ClC-3特異性阻斷劑,Chlorotoxin)組。OVX+SNI+E2大鼠在OVX兩周后每天一次皮下注射(s.c.)17β-雌二醇(30μg/kg/day),... 

【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略詞對(duì)照表
前言
材料與方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑的配制方法
        1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器和軟件
    2 方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)分組情況
        2.2 動(dòng)物模型的制備
        2.3 行為學(xué)測(cè)試
        2.4 鞘內(nèi)置管及阻斷劑注射給藥方法
        2.5 雌激素替代給藥與血清雌激素濃度測(cè)量的方法
        2.6 DRG組織的準(zhǔn)備
        2.7 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.8 免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western- blot)
        2.9 實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)(qRT-PCR)
        2.10 背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元胞體的分離與消化
        2.11 全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄大鼠DRG神經(jīng)元電生理特性
        2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1 去卵巢2 周后的大鼠行為學(xué)沒(méi)有改變、ClC-3 的表達(dá)沒(méi)有變化
    2 ClC-3 主要表達(dá)于OVX大鼠的中/小型DRG神經(jīng)元
    3 OVX大鼠SNI后 DRG神經(jīng)元ClC-3 表達(dá)下調(diào)
    4 17β-雌二醇給藥可減輕SNI后 OVX大鼠的冷痛覺(jué)過(guò)敏
    5 17β-雌二醇給藥后ClC-3 蛋白和m RNA表達(dá)的恢復(fù)
    6 鞘內(nèi)注射Cltx可以抑制17β-雌二醇對(duì)Cl C-3 蛋白的上調(diào)作用,并加劇痛覺(jué)過(guò)敏,但不影響ClC-3 mRNA的增加
    7 在OVX和 OVX+ SNI大鼠中鞘內(nèi)注射Cltx會(huì)增加痛覺(jué)過(guò)敏和下調(diào)ClC-3 蛋白表達(dá)
    8 17β-雌二醇可降低OVX大鼠SNI引起的DRG神經(jīng)元興奮性,但被Cltx阻斷
討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師評(píng)閱表


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]GPER agonist G1 suppresses neuronal apoptosis mediated by endoplasmic reticulum stress after cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Zi-Wei Han,Yue-Chen Chang,Ying Zhou,Hang Zhang,Long Chen,Yang Zhang,Jun-Qiang Si,Li Li.  Neural Regeneration Research. 2019(07)
[2]Mechanism of persistent hyperalgesia in neuropathic pain caused by chronic constriction injury[J]. Qin-Yi Chen,Chao-Yang Tan,Yang Wang,Ke-Tao Ma,Li Li,Jun-Qiang Si.  Neural Regeneration Research. 2019(06)
[3]TRPV1 may increase the effectiveness of estrogen therapy on neuroprotection and neuroregeneration[J]. Ricardo Ramírez-Barrantes,Ivanny Marchant,Pablo Olivero.  Neural Regeneration Research. 2016(08)
[4]Modulatory effect of substance P on GABA-activated currents from rat dorsal root ganglion[J]. Jun-qiang SI2, Zhi-qin ZHANG, Chun-xia LI, Li-feng WANG, Yun-lei YANG3, Zhi-wang LI3Department of Physiology, Medical College Shihezi University, Shihezi 832002, China3 Now in Tongji Medical College, Huazhong University of Sci-ence and Technology, Wuhan 430030, China..  Acta Pharmacologica Sinica. 2004(05)



本文編號(hào):3674742

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