背景:缺血性心臟病可導致不可逆轉的心肌損傷,并最終導致心力衰竭,是世界范圍內死亡的主要原因。及時的恢復血流灌注可挽救缺血心肌,但再灌注本身也可加重缺血造成的損傷,這一概念被稱為心肌缺血再灌注（I/R）損傷。瑞芬太尼是一種超短效的μ阿片受體激動藥,具有鎮(zhèn)痛效果確切、起效迅速、作用時間短、無蓄積且較少受年齡影響等優(yōu)點,因而廣泛用于臨床麻醉,尤其是心血管麻醉。大量基礎和臨床研究表明瑞芬太尼后處理（RPC）可模擬缺血后處理,減輕心肌I/R損傷,發(fā)揮強大的心肌保護作用。近年來,越來越多的研究表明自噬廣泛參與心肌I/R損傷的發(fā)生發(fā)展,且自噬在缺血階段和再灌注階段起著不同的作用;大多數(shù)學者認為缺血期間適度的自噬可保護心肌,而再灌注期間過度的自噬和受損的自噬流則對心肌不利。因而恢復再灌注期間受損的自噬流成為減輕心肌I/R損傷的一個潛在治療靶點。既往研究已證實缺血后處理在再灌注早期可激活自噬并促進受損的自噬流,發(fā)揮抗I/R損傷的心肌保護作用。由于RPC可模擬缺血后處理減輕心肌I/R損傷,因此我們推測自噬可能也參與了RPC的抗I/R損傷的心肌保護作用。本研究擬探討RPC是否可促進再灌注期間受損的自噬流,從... 

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
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英文摘要
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實驗動物及細胞株
    2.2 實驗儀器
    2.3 實驗藥品與試劑
    2.4 實驗方法與內容
        2.4.1 大鼠在體實驗
            2.4.1.1 在體制備大鼠心肌I/R損傷模型
            2.4.1.2 實驗分組與給藥
            2.4.1.3 大鼠血清肌鈣蛋白 I(Cardiac troponin I, cTnI)濃度的測定
            2.4.1.4 大鼠心肌梗死體積的測定
            2.4.1.5 大鼠心肌組織免疫熒光檢測
            2.4.1.6 大鼠心肌組織Western blot檢測
        2.4.2 H9c2心肌細胞實驗
            2.4.2.1 培養(yǎng)H9c2心肌細胞
            2.4.2.2 心肌細胞H/R損傷模型的建立及RPC處理
            2.4.2.3 實驗分組
            2.4.2.4 心肌細胞轉染
            2.4.2.5 CCK-8 法檢測心肌細胞活力
            2.4.2.6 細胞免疫熒光檢測
            2.4.2.7 心肌細胞 Western blot 檢測
            2.4.2.8 H9c2 心肌細胞 HO/PI 染色
    2.5 統(tǒng)計分析
3 結果
    3.1 RPC對大鼠心肌I/R損傷引起自噬的影響
        3.1.1 RPC對再灌注早期LC3點聚集的影響
        3.1.2 RPC對再灌注早期LC3Ⅱ和p62 蛋白表達的影響
        3.1.3 RPC 對再灌注早期自噬體和溶酶體融合的影響
        3.1.4 RPC對心肌I/R損傷自噬流的影響
        3.1.5 CQ 對 RPC 抗心肌 I/R 損傷的保護作用的影響
        3.1.6 CQ對RPC抗心肌凋亡作用的影響
    3.2 RPC對 H9c2 心肌細胞H/R損傷引起自噬的影響
        3.2.1 RPC對復氧早期自噬體形成的影響
        3.2.2 RPC 對復氧早期自噬體和溶酶體融合的影響
        3.2.3 RPC對復氧不同時間自噬流的影響
        3.2.4 RPC對復氧不同時間細胞活力的影響
        3.2.5 Baf對 RPC促進H/R損傷自噬流的影響
        3.2.6 CQ對 RPC促進H/R損傷自噬流的影響
        3.2.7 Baf對 RPC抗 H/R損傷的保護作用的影響
        3.2.8 CQ對 RPC抗 H/R損傷的保護作用的影響
        3.2.9 心肌細胞ATG7基因敲低效應的驗證
        3.2.10 ATG7 基因敲低對 RPC 心肌保護作用的影響
4 討論
    4.1 大鼠心肌I/R損傷和H9c2 心肌細胞H/R損傷模型的建立
        4.1.1 大鼠心肌I/R損傷模型的建立
        4.1.2 H9c2心肌細胞H/R損傷模型的建立
    4.2 瑞芬太尼劑量的選擇
        4.2.1 瑞芬太尼用于大鼠心肌I/R損傷的劑量選擇
        4.2.2 瑞芬太尼用于心肌細胞H/R損傷的劑量選擇
    4.3 慢病毒載體介導H9c2心肌細胞ATG7基因敲低
    4.4 自噬參與RPC介導的心肌保護作用
    4.5 RPC增強自噬流保護心肌的機制研究
        4.5.1 LC3和p62在心肌I/R損傷中的作用
        4.5.2 Beclin1 在心肌I/R損傷中的作用
        4.5.3 LAMP2 在心肌I/R損傷中的作用
    4.6 下一步研究計劃
5 結論
6 參考文獻
附錄
    個人簡歷
        1.基本信息
        2.受教育經(jīng)歷
        3.工作經(jīng)歷
        4.博士期間發(fā)表的科研論文
致謝
綜述 自噬在心肌缺血再灌注損傷中的研究進展
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Autophagy: a double-edged sword for neuronal survival after cerebral ischemia[J]. Wenqi Chen,Yinyi Sun,Kangyong Liu,Xiaojiang Sun.  Neural Regeneration Research. 2014(12)



本文編號：3667228