剖析TNF-α誘導(dǎo)牙髓干細(xì)胞成骨分化期間IncRNA的改變
發(fā)布時(shí)間:2022-07-29 19:10
目的 牙髓干細(xì)胞(dental pulp stem cells,DPSCs)是目前國(guó)內(nèi)外研究骨組織工程的理想細(xì)胞,究其原因是細(xì)胞來(lái)源容易獲得,且功能多元化,近年來(lái)其研究成果不斷取得突破。研究表明,長(zhǎng)鏈非編碼RNA(IncRNA)在間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過(guò)程中起著相當(dāng)重要的作用。然而,IncRNA是否參與DPSCs的成骨分化尚不清楚。本研究旨在檢測(cè)IncRNA是否參與DPSCs成骨分化過(guò)程。通過(guò)RNA測(cè)序(RNA-Seq)逆轉(zhuǎn)錄-定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)及分析驗(yàn)證,確定成骨分化不同階段中的IncRNA表達(dá)的不同變化。結(jié)果1.TNF-α促進(jìn)DPSC的成骨分化:在第7天和14天時(shí),分別在培養(yǎng)牙髓干細(xì)胞的培養(yǎng)基中加10 ng/mL TNF-α。在第7天,用TNF-α刺激后,ALP染色顯示其在成骨分化過(guò)程中強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),表明DPSCs正在進(jìn)行成骨分化。而在細(xì)胞培養(yǎng)第14天時(shí)用TNF-α干預(yù),ALP染色顯示陽(yáng)性表達(dá)增加至85-90%。這些結(jié)果表明,在牙髓干細(xì)胞分化過(guò)程中,經(jīng)TNF-α誘導(dǎo)情況下,促進(jìn)DPSC的成骨分化。2.成骨分化過(guò)程中基因表達(dá)變化:為了進(jìn)一步驗(yàn)證牙髓干細(xì)胞成骨分化基因表達(dá)的...
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 課題研究的目的和意義
1.2 國(guó)內(nèi)外研究概況
1.2.1 牙髓干細(xì)胞(DPSCs)
1.2.2 牙髓干細(xì)胞分化過(guò)程中的信號(hào)通路
1.2.3 長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)
1.2.4 牙髓干細(xì)胞與lncRNA的相關(guān)性
1.2.5 總結(jié)
1.3 論文的主要研究?jī)?nèi)容
第二章 材料與方法
2.1 研究資料及儀器設(shè)備
2.1.1 組織標(biāo)本
2.1.2 牙髓干細(xì)胞培養(yǎng)
2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
2.2 實(shí)驗(yàn)流程與方法
2.2.1 成骨細(xì)胞分化模型、堿性磷酸酶(ALP)染色
2.2.2 RNA提取,RNA-seq和生物信息學(xué)分析
2.2.3 RT-qPCR
2.2.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
3.1 TNF-A促進(jìn)DPSC的成骨分化
3.2 成骨分化過(guò)程中基因表達(dá)變化
3.3 在DPSCs成骨分化過(guò)程中的INCRNA表達(dá)的變化
3.4 LNCRNA和MRNA在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過(guò)程中的差異表達(dá)
3.5 INCRNA差異表達(dá)的分析
3.6 由TNF-α誘導(dǎo)的高效的成骨分化需要LNcRNA XIST
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
英文縮寫(xiě)詞表
在攻讀碩士學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文與參加的項(xiàng)目
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人乳牙牙髓干細(xì)胞在干細(xì)胞治療中的應(yīng)用[J]. 李曉霞,方滕姣子,余湜,趙玉鳴,葛立宏. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(05)
[2]長(zhǎng)鏈非編碼RNA DANCR促進(jìn)滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞的增殖與分化[J]. 楊超,張雷,周利武,趙建寧. 中國(guó)組織工程研究. 2017(25)
[3]生理性根吸收過(guò)程中乳牙牙髓干細(xì)胞通過(guò)α7 nAChR調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞分化能力的研究[J]. 汪璐璐,袁帥,杜樣,周志斐,鄔禮政,王小競(jìng). 實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(02)
[4]骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液促進(jìn)滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化[J]. 崔巖,張治宇,程戰(zhàn),曾雪艷,倪勝輝. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)
[5]淫羊藿總黃酮對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過(guò)程BMP-2/RunX2/OSX通路的影響[J]. 梁廣勝,陳偉才,殷嫦嫦,殷明,曹雪琴. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2016(05)
[6]Sema4D基因沉默對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨及成脂肪分化相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 張韜,陳冬冬,翁艷,馮爾宥,張怡元. 廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(02)
[7]體外觀察三種支架材料對(duì)人乳牙牙髓干細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[J]. 于玲,劉陽(yáng),張媛媛,謝娜,劉飛,郭青玉. 實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2016(02)
[8]淫羊藿甙誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化實(shí)驗(yàn)研究[J]. 黃荷,曾意榮,簡(jiǎn)林養(yǎng). 新中醫(yī). 2016(01)
[9]甲狀旁腺激素對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化中LPL和ALP的影響[J]. 高飛,林梅,葛志敏,郭中豪. 中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2015(12)
[10]共沉默miR-221-3p/222-3p表達(dá)抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及促成軟骨分化[J]. 閆繼紅,楊姝,孫海梅,曹丹丹,張秀英,季鳳清,郭多,吳波,孫婷怡,周德山. 中國(guó)組織工程研究. 2015(50)
本文編號(hào):3667019
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 課題研究的目的和意義
1.2 國(guó)內(nèi)外研究概況
1.2.1 牙髓干細(xì)胞(DPSCs)
1.2.2 牙髓干細(xì)胞分化過(guò)程中的信號(hào)通路
1.2.3 長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)
1.2.4 牙髓干細(xì)胞與lncRNA的相關(guān)性
1.2.5 總結(jié)
1.3 論文的主要研究?jī)?nèi)容
第二章 材料與方法
2.1 研究資料及儀器設(shè)備
2.1.1 組織標(biāo)本
2.1.2 牙髓干細(xì)胞培養(yǎng)
2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
2.2 實(shí)驗(yàn)流程與方法
2.2.1 成骨細(xì)胞分化模型、堿性磷酸酶(ALP)染色
2.2.2 RNA提取,RNA-seq和生物信息學(xué)分析
2.2.3 RT-qPCR
2.2.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
2.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第三章 結(jié)果
3.1 TNF-A促進(jìn)DPSC的成骨分化
3.2 成骨分化過(guò)程中基因表達(dá)變化
3.3 在DPSCs成骨分化過(guò)程中的INCRNA表達(dá)的變化
3.4 LNCRNA和MRNA在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過(guò)程中的差異表達(dá)
3.5 INCRNA差異表達(dá)的分析
3.6 由TNF-α誘導(dǎo)的高效的成骨分化需要LNcRNA XIST
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
英文縮寫(xiě)詞表
在攻讀碩士學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文與參加的項(xiàng)目
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人乳牙牙髓干細(xì)胞在干細(xì)胞治療中的應(yīng)用[J]. 李曉霞,方滕姣子,余湜,趙玉鳴,葛立宏. 華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(05)
[2]長(zhǎng)鏈非編碼RNA DANCR促進(jìn)滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞的增殖與分化[J]. 楊超,張雷,周利武,趙建寧. 中國(guó)組織工程研究. 2017(25)
[3]生理性根吸收過(guò)程中乳牙牙髓干細(xì)胞通過(guò)α7 nAChR調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞分化能力的研究[J]. 汪璐璐,袁帥,杜樣,周志斐,鄔禮政,王小競(jìng). 實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(02)
[4]骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液促進(jìn)滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化[J]. 崔巖,張治宇,程戰(zhàn),曾雪艷,倪勝輝. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)
[5]淫羊藿總黃酮對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過(guò)程BMP-2/RunX2/OSX通路的影響[J]. 梁廣勝,陳偉才,殷嫦嫦,殷明,曹雪琴. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2016(05)
[6]Sema4D基因沉默對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨及成脂肪分化相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 張韜,陳冬冬,翁艷,馮爾宥,張怡元. 廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(02)
[7]體外觀察三種支架材料對(duì)人乳牙牙髓干細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[J]. 于玲,劉陽(yáng),張媛媛,謝娜,劉飛,郭青玉. 實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2016(02)
[8]淫羊藿甙誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化實(shí)驗(yàn)研究[J]. 黃荷,曾意榮,簡(jiǎn)林養(yǎng). 新中醫(yī). 2016(01)
[9]甲狀旁腺激素對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化中LPL和ALP的影響[J]. 高飛,林梅,葛志敏,郭中豪. 中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2015(12)
[10]共沉默miR-221-3p/222-3p表達(dá)抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及促成軟骨分化[J]. 閆繼紅,楊姝,孫海梅,曹丹丹,張秀英,季鳳清,郭多,吳波,孫婷怡,周德山. 中國(guó)組織工程研究. 2015(50)
本文編號(hào):3667019
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