研究背景和目的骨缺損是臨床骨科常見的病癥,自體骨等傳統(tǒng)植骨材料移植均存在各自的問題。干細(xì)胞富集技術(shù)通過非培養(yǎng)的方式獲取足量自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）,并使之與傳統(tǒng)骨替代材料（如:多孔β-磷酸三鈣,β-TCP）在術(shù)中一期整合以制備活性成骨材料用于骨缺損治療。本研究利用我科研發(fā)的濾過式干細(xì)胞富集技術(shù)快速制備MSCs/β-TCP復(fù)合材料,綜合評(píng)價(jià)其在骨缺損修復(fù)中的安全性、可行性與有效性。方法1.通過比較富集前后MSCs的生物學(xué)行為評(píng)估富集操作對(duì)細(xì)胞安全性的影響;2.通過檢測(cè)羊MSCs在MSCs/β-TCP內(nèi)部的粘附、鋪展、增殖、分化評(píng)估復(fù)合材料的生物相容性;3.通過對(duì)前期以該技術(shù)治療的骨折伴發(fā)骨缺損的患者進(jìn)行臨床隨訪,結(jié)合影像學(xué)及功能學(xué)結(jié)果綜合評(píng)估該技術(shù)在骨缺損修復(fù)中的臨床療效;4.通過將羊MSCs/β-TCP填充于3D打印的山羊股骨外髁狀鈦合金框架探索干細(xì)胞富集與3D打印聯(lián)合應(yīng)用在負(fù)重區(qū)復(fù)雜解剖形態(tài)骨缺損修復(fù)中的可行性。結(jié)果1.富集處理后MSCs的細(xì)胞形態(tài),表面分子標(biāo)志,細(xì)胞周期,凋亡以及基因表達(dá)譜均未發(fā)生明顯改變,提示富集操作的安全性;2.體外培養(yǎng)中,MSCs在復(fù)合材料中能夠很好地... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
緒論
第一章 富集操作對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    1.1 引言
    1.2 材料和方法
        1.2.1 主要儀器和試劑材料
        1.2.2 樣本來源及倫理申明
        1.2.3 MSCs的原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)
        1.2.4 富集前后骨髓MSCs細(xì)胞形態(tài)檢測(cè)
        1.2.5 富集前后骨髓MSCs特異性表面標(biāo)志檢測(cè)
        1.2.6 富集前后骨髓MSCs細(xì)胞周期檢測(cè)
        1.2.7 富集前后骨髓MSCs細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        1.2.8 富集前后骨髓MSCs細(xì)胞基因表達(dá)譜檢測(cè)
        1.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 富集前后骨髓MSCs細(xì)胞形態(tài)觀察
        1.3.2 富集前后骨髓MSCs細(xì)胞表面特異性分子標(biāo)志表達(dá)對(duì)比
        1.3.3 富集前后骨髓MSCs細(xì)胞周期對(duì)比
        1.3.4 富集前后骨髓MSCs細(xì)胞凋亡情況對(duì)比
        1.3.5 富集前后骨髓MSCs基因表達(dá)的變化
    1.4 討論
    1.5 本章小結(jié)
第二章 富骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物材料的體外生物性能評(píng)估
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 主要儀器和試劑材料
        2.2.2 羊骨髓MSCs/β-TCP復(fù)合材料的制備
        2.2.3 復(fù)合材料羊MSCs/β-TCP中MSCs的形態(tài)與分布情況觀察
            2.2.3.1 電子掃描顯微鏡觀察
            2.2.3.2 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察
        2.2.4 復(fù)合材料MSCs/β-TCP中MSCs的增殖情況檢測(cè)
        2.2.5 復(fù)合材料MSCs/β-TCP的成骨能力檢測(cè)
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 復(fù)合材料MSCs/β-TCP中MSCs的粘附、鋪展與基質(zhì)分泌
        2.3.2 復(fù)合材料MSCs/β-TCP中MSCs的增殖情況
        2.3.3 復(fù)合材料MSCs/β-TCP的成骨能力
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第三章 濾過式干細(xì)胞富集技術(shù)治療新鮮骨折伴發(fā)骨缺損的總體臨床療效
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 主要儀器和試劑材料
        3.2.2 入組病例的納入與排除標(biāo)準(zhǔn)
        3.2.3 骨髓采集及利用濾過式干細(xì)胞富集技術(shù)制備MSCs/β-TCP復(fù)合材料
        3.2.4 手術(shù)實(shí)施
        3.2.5 富集前后MSCs計(jì)數(shù)及回植總數(shù)計(jì)算
        3.2.6 富集前后有核細(xì)胞細(xì)胞活力檢測(cè)
        3.2.7 人骨髓MSCs鑒定
            3.2.7.1 人骨髓MSCs三系分化誘導(dǎo)
            3.2.7.2 人骨髓MSCs特異性分子表型測(cè)定
        3.2.8 新鮮骨折伴發(fā)骨缺損患者的臨床療效隨訪與數(shù)據(jù)采集
            3.2.8.1 新鮮骨折伴發(fā)骨缺損患者的影像學(xué)隨訪
            3.2.8.2 新鮮骨折伴發(fā)骨缺損患者的功能學(xué)評(píng)估
        3.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 患者一般情況
        3.3.2 SECCS對(duì)骨髓MSCs的富集效率以及骨髓MSCs回植總數(shù)
        3.3.3 SECCS處理前后骨髓有核細(xì)胞活力變化
        3.3.4 人骨髓MSCs鑒定
        3.3.5 濾過式干細(xì)胞富集技術(shù)治療新鮮骨折骨缺損的臨床療效評(píng)估
            3.3.5.1 骨缺損的整體修復(fù)效果
            3.3.5.2 新鮮壓縮性脛骨平臺(tái)骨折骨缺損的臨床療效
            3.3.5.3 新鮮壓縮性跟骨骨折骨缺損的臨床療效
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第四章 濾過式干細(xì)胞富集技術(shù)治療骨缺損與普通骨替代材料治療骨缺損的臨床療效比較
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 主要儀器和試劑材料
        4.2.2 病例入組標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)的確定
        4.2.3 富集前后MSCs計(jì)數(shù)及回植總數(shù)計(jì)算
        4.2.4 富集前后骨髓有核細(xì)胞細(xì)胞活力檢測(cè)
        4.2.5 MSCs/β-TCP移植治療與單純?chǔ)?TCP治療的臨床療效對(duì)比
            4.2.5.1 MSCs/β-TCP與單純?chǔ)?TCP移植治療的影像學(xué)隨訪與分析
            4.2.5.2 MSCs/β-TCP與單純?chǔ)?TCP移植治療的新骨生成率對(duì)比
            4.2.5.3 MSCs/β-TCP與單純?chǔ)?TCP移植治療的功能學(xué)對(duì)比
        4.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 一般資料
        4.3.2 MSCs的富集效率以及回植總數(shù)
        4.3.3 富集前后骨髓有核細(xì)胞活力變化
        4.3.4 MSCs/β-TCP移植治療與單純?chǔ)?TCP治療的臨床療效對(duì)比
            4.3.4.1 骨折愈合時(shí)間、關(guān)節(jié)面下沉對(duì)比
            4.3.4.2 新骨生成率對(duì)比
            4.3.4.3 功能學(xué)對(duì)比
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
第五章 濾過式干細(xì)胞富集技術(shù)聯(lián)合3D打印技術(shù)修復(fù)復(fù)雜解剖形態(tài)骨缺損的探索
    5.1 引言
    5.2 材料和方法
        5.2.1 主要儀器和試劑材料
        5.2.2 山羊股骨外髁復(fù)雜解剖形態(tài)骨缺損模型3D打印方案設(shè)計(jì)
        5.2.3 鈦合金框架遠(yuǎn)端PCL襯墊設(shè)計(jì)、制備以及與框架的整合
        5.2.4 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)施
            5.2.4.1 實(shí)驗(yàn)分組
            5.2.4.2 SECCS制備MSCs/β-TCP復(fù)合材料及骨性復(fù)合體構(gòu)造
            5.2.4.3 人工軟骨面制備及其與骨性復(fù)合體的整合
            5.2.4.4 山羊股骨外髁缺損模型制造及修復(fù)手術(shù)
        5.2.5 回植MSCs及有核細(xì)胞計(jì)數(shù)
        5.2.6 體外軟骨分化誘導(dǎo)
        5.2.7 骨修復(fù)效果檢測(cè)
        5.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 山羊股骨外髁3D打印鈦合金框架設(shè)計(jì)與制備
        5.3.2 體外軟骨分化誘導(dǎo)
        5.3.3 MSCs及有核細(xì)胞富集效果
        5.3.4 復(fù)雜解剖形態(tài)骨缺損修復(fù)效果
    5.4 討論
    5.5 本章小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的文章及其他成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]非骨水泥人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)中髖臼骨缺損重建方式選擇及對(duì)臼杯位置影響的研究[J]. 曹林虎,譚倫,林旭,吳超,曾俊.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2015(06)



本文編號(hào)：3629772