目的:已發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼RNA（LncRNA）SNHG5、Gclnc1在腫瘤中起重要作用。然而,lncRNA SNHG5和Gclnc1在骨肉瘤中的作用和機(jī)制尚不清楚。本研究的目的是探討SNHG5與Gclnc1在骨肉瘤中的具體功能及調(diào)控機(jī)制方法:通過對于在線數(shù)據(jù)庫GEO的骨肉瘤的芯片進(jìn)行生信分析,預(yù)測lncRNA SNHG5在骨肉瘤中的表達(dá)與預(yù)后情況。收集骨肉瘤組織標(biāo)本20例,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR）技術(shù)檢測lncRNA Gclnc1在骨肉瘤標(biāo)本的表達(dá)情況。選取143B、MG63（基因敲低）和U2OS、U2R（過表達(dá)）細(xì)胞株進(jìn)行SNHG5的功能研究。選取MG63（基因敲低）和U2OS（過表達(dá)）細(xì)胞株進(jìn)行Gclnc1的功能研究。在對SNHG5進(jìn)行敲低和過表達(dá)后,通過MTT法、克隆形成實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞儀、Transwell實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)探討SNHG5、miR-212-3p和SGK3對骨肉瘤細(xì)胞生長的影響。RT-PCR、蛋白免疫印跡法（Western blot）分析和熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)等方法檢測lncRNA SNHG5與miR-212-3p之間的相互作用。在對Gclnc1進(jìn)行敲低和... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省211工程院校

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

生信分析顯示lncRNASNHG5在骨肉瘤細(xì)胞中高表達(dá)且與預(yù)后相關(guān)

第3章結(jié)果12圖2SNHG5通過調(diào)控caspase的關(guān)鍵蛋白調(diào)控細(xì)胞凋亡*p<0.053.3SNHG5通過EMT過程調(diào)節(jié)骨肉瘤細(xì)胞的遷移和侵襲為了研究SNHG5在細(xì)胞轉(zhuǎn)移過程中的作用，并探討SNHG5與EMT進(jìn)展的關(guān)系，我們進(jìn)行了Transwell試驗(yàn)、細(xì)胞劃痕試驗(yàn)。Transwell試驗(yàn)和傷口愈合試驗(yàn)的結(jié)果顯示，SNHG5的敲低顯著減少了143B細(xì)胞的遷移和侵襲(圖3A-B)。相反，SNHG5的過表達(dá)大大促進(jìn)了U2OS細(xì)胞的遷移和侵襲(圖3A-B)。我們接下來檢測了EMT相關(guān)標(biāo)記物在我們的研究中是否發(fā)生了改變。結(jié)果顯示，與對照組相比，沉默SNHG5后，N-cadherin,Vimentin,andβ-catenin的蛋白表達(dá)顯著降低，而E-cadherin的蛋白表達(dá)顯著增加(圖3C)。而在U2OS細(xì)胞過表達(dá)SNHG5后產(chǎn)生相反作用(圖3C)。此外，與EMT標(biāo)記物一樣，轉(zhuǎn)錄因子Twist和ZEB1的mRNA表達(dá)與SNHG5平行變化(圖3D)，這表明lncRNASNHG5參與了骨肉瘤細(xì)胞的EMT進(jìn)程。

SNHG5調(diào)控骨肉瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移*p<0.05

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Mesenchymal stem cells: Molecular characteristics and clinical applications[J]. Farbod Rastegar,Deana Shenaq,Eric R Wagner,Stephanie H Kim,Russell R Reid,Hue H Luu,Rex C Haydon.  World Journal of Stem Cells. 2010(04)



本文編號：3624019