發(fā)布時間：2022-01-24 13:06

　　目的探討低氧預(yù)處理的人脂肪來源干細(xì)胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）和常氧處理的人脂肪來源干細(xì)胞在體外環(huán)境中對人皮膚真皮成纖維細(xì)胞（Human Dermal Fibroblasts,HDFs）衰老作用的影響。方法取正常成年人皮下脂肪組織和皮膚真皮組織,脂肪組織應(yīng)用酶消化、真皮組織應(yīng)用組織塊法在體外進(jìn)行分離、培養(yǎng)人脂肪來源干細(xì)胞（ADSCs）和人真皮成纖維細(xì)胞（HDFs）,并進(jìn)行細(xì)胞鑒定;根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要培養(yǎng)細(xì)胞、凍存。將生長狀態(tài)良好的人脂肪來源干細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),分別放入低氧培養(yǎng)工作站（1%O₂、5%CO₂、94%N₂,37℃）和普通培養(yǎng)箱即常氧培養(yǎng)箱(21%O_2、5%CO₂、其余氮?dú)馄胶?37℃)培養(yǎng),分別處理48小時后入組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為3組:空白對照組、實(shí)驗(yàn)組I、和實(shí)驗(yàn)組II。空白對照組為單純培養(yǎng)真皮成纖維細(xì)胞;實(shí)驗(yàn)組I為常氧組、實(shí)驗(yàn)組II為低氧組,兩組均采用懸掛式細(xì)胞培養(yǎng)皿（Transwell小室）構(gòu)建ADSCs與HDFs之間非接... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

1人脂肪干細(xì)胞（ADSCs）鏡下形態(tài)

圖 3.1.2 ADSCs 成脂、成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后染色。A：ADSCs 成脂誘導(dǎo)培養(yǎng) 14 天后，油紅 O 結(jié)果，鏡下見橘紅色脂肪滴（×40）；B：ADSCs 成骨誘導(dǎo)培養(yǎng) 21 后，茜素紅染色結(jié)果，鏡橘紅色典型鈣化結(jié)節(jié)（×200）3.1.3 ADSCs 流式細(xì)胞儀鑒定表面標(biāo)記物通過流式細(xì)胞儀鑒定細(xì)胞表面抗原，結(jié)果示：所培養(yǎng)細(xì)胞的 CD73、CD90 表達(dá)

通過流式細(xì)胞儀鑒定細(xì)胞表面抗原，結(jié)果示：所培養(yǎng)細(xì)胞的 CD73、CD90 表達(dá)大于 95%， CD34、CD45 表達(dá)均小于 10%，因此表明該細(xì)胞 CD73、CD90 為陽性表達(dá)CD34、CD45 為陰性表達(dá)，符合參考文獻(xiàn)所述 ADSCs 表面標(biāo)記物的特征，可鑒定所養(yǎng)的細(xì)胞為 ADSCs。如圖 3.1.3 所示。


本文編號：3606627