低氧預處理人脂肪來源干細胞對皮膚成纖維細胞衰老作用影響的研究
發(fā)布時間：2022-01-24 13:06
目的探討低氧預處理的人脂肪來源干細胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）和常氧處理的人脂肪來源干細胞在體外環(huán)境中對人皮膚真皮成纖維細胞（Human Dermal Fibroblasts,HDFs）衰老作用的影響。方法取正常成年人皮下脂肪組織和皮膚真皮組織,脂肪組織應用酶消化、真皮組織應用組織塊法在體外進行分離、培養(yǎng)人脂肪來源干細胞（ADSCs）和人真皮成纖維細胞（HDFs）,并進行細胞鑒定;根據實驗需要培養(yǎng)細胞、凍存。將生長狀態(tài)良好的人脂肪來源干細胞進行傳代培養(yǎng),分別放入低氧培養(yǎng)工作站（1%O2、5%CO2、94%N2,37℃）和普通培養(yǎng)箱即常氧培養(yǎng)箱(21%O2、5%CO2、其余氮氣平衡,37℃)培養(yǎng),分別處理48小時后入組進行實驗研究。實驗設計為3組:空白對照組、實驗組I、和實驗組II�？瞻讓φ战M為單純培養(yǎng)真皮成纖維細胞;實驗組I為常氧組、實驗組II為低氧組,兩組均采用懸掛式細胞培養(yǎng)皿（Transwell小室）構建ADSCs與HDFs之間非接...
【文章來源】：青島大學山東省
【文章頁數】：59 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
1人脂肪干細胞（ADSCs）鏡下形態(tài)
圖 3.1.2 ADSCs 成脂、成骨誘導培養(yǎng)后染色。A：ADSCs 成脂誘導培養(yǎng) 14 天后，油紅 O 結果，鏡下見橘紅色脂肪滴（×40）；B：ADSCs 成骨誘導培養(yǎng) 21 后，茜素紅染色結果，鏡橘紅色典型鈣化結節(jié)（×200）3.1.3 ADSCs 流式細胞儀鑒定表面標記物通過流式細胞儀鑒定細胞表面抗原，結果示：所培養(yǎng)細胞的 CD73、CD90 表達
通過流式細胞儀鑒定細胞表面抗原，結果示：所培養(yǎng)細胞的 CD73、CD90 表達大于 95%， CD34、CD45 表達均小于 10%，因此表明該細胞 CD73、CD90 為陽性表達CD34、CD45 為陰性表達，符合參考文獻所述 ADSCs 表面標記物的特征，可鑒定所養(yǎng)的細胞為 ADSCs。如圖 3.1.3 所示。
本文編號：3606627
【文章來源】：青島大學山東省
【文章頁數】：59 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
1人脂肪干細胞（ADSCs）鏡下形態(tài)
圖 3.1.2 ADSCs 成脂、成骨誘導培養(yǎng)后染色。A：ADSCs 成脂誘導培養(yǎng) 14 天后，油紅 O 結果，鏡下見橘紅色脂肪滴（×40）；B：ADSCs 成骨誘導培養(yǎng) 21 后，茜素紅染色結果，鏡橘紅色典型鈣化結節(jié)（×200）3.1.3 ADSCs 流式細胞儀鑒定表面標記物通過流式細胞儀鑒定細胞表面抗原，結果示：所培養(yǎng)細胞的 CD73、CD90 表達
通過流式細胞儀鑒定細胞表面抗原，結果示：所培養(yǎng)細胞的 CD73、CD90 表達大于 95%， CD34、CD45 表達均小于 10%，因此表明該細胞 CD73、CD90 為陽性表達CD34、CD45 為陰性表達，符合參考文獻所述 ADSCs 表面標記物的特征，可鑒定所養(yǎng)的細胞為 ADSCs。如圖 3.1.3 所示。
本文編號：3606627
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