發(fā)布時間：2022-01-14 01:45

　　目的基于PI3K/AKT/NOTCH/Wnt軸探索COX2對骨肉瘤細胞轉(zhuǎn)移及EMT的影響,為抗骨肉瘤藥物開發(fā)提供分子基礎(chǔ)和潛在的分子靶點。方法1采用Ad Easy腺病毒轉(zhuǎn)染系統(tǒng)構(gòu)建COX2高表達MG63細胞株;并分組為（1）Blank組:不做任何處理的正常培養(yǎng)的MG63細胞;（2）plvx-Ds Red組:感染空載體腺病毒plvx-Ds Red的MG63細胞;（3）plvx-COX2-Ds Red組:感染重組腺病毒plvx-COX2-Ds Red的MG63細胞;細胞免疫熒光實驗檢測載體是否轉(zhuǎn)染成功;Wetern bloting實驗和q PCR實驗檢測各組細胞中COX2的表達。2細胞分組:（1）Blank組:不做任何處理的正常培養(yǎng)的MG63細胞;（2）plvx-Ds Red組:感染空載體腺病毒plvx-Ds Red的MG63細胞;（3）plvx-COX2-Ds Red組:感染重組腺病毒plvx-COX2-Ds Red的MG63細胞;（4）COX2+NS398組:plvx-COX2-Ds Red組細胞用COX2抑制劑NS398 5μM處理24h的細胞;（5）COX2+EP4A組:plvx-... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

腺病毒載體轉(zhuǎn)染MG63細胞的GRP變化（200），GRP：紅色熒光蛋白

C 各組細胞中 COX2 蛋白及 mRNA 表達變化，A：Western blotWestern bloting 實驗條帶的統(tǒng)計分析；C：qRCR 實驗結(jié)果分析與 Blank 組相比，**P＜0.01。 在多數(shù)腫瘤中均表現(xiàn)出促癌的作用[139, 140]，但其在骨肉瘤中的乏相關(guān)的文獻，本研究為探索 COX2 在骨肉瘤中的作用及其選取 MG63 細胞作為研究對象，以腺病毒作為載體構(gòu)建高表達研究中采用的轉(zhuǎn)染系統(tǒng)為 AdEasy 腺病毒轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。該轉(zhuǎn)染系體 pAdEasy-1、穿梭質(zhì)粒 pAdTrack-CWV、包裝細胞 HEK29E.coli BJ5183構(gòu)成。骨架載體pAdeasy-1是由長度為36kb的雙病毒 Adenovirus 改造而來。該腺病毒可通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞后腺病毒基因組轉(zhuǎn)移至細胞核內(nèi)，保持在染色體外，不整合進

胞增殖情況的相對變化（n=6），與Blank組相比，**P＜0.01；與 plvx-CO組相比，##P＜0.01.胞遷移能力的變化ank 組相比，plvx-DsRed 組細胞遷移數(shù)目有略微下降，但無顯5），plvx-COX2-DsRed 組細胞遷移數(shù)目顯著上升，差異有統(tǒng)計；與 plvx-COX2-DsRed 組細胞相比，COX2＋NS398 組、COX數(shù)目顯著下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），COX2＋NSA 組細胞遷移數(shù)目之間相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]Twist在骨肉瘤轉(zhuǎn)移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化中作用及機制[D]. 尹科.中南大學(xué) 2013
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碩士論文
[1]PGE2通過PI3K/AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活CREB促進膽管癌生長侵襲的研究[D]. 戎榮.南京醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]Notch與NF-κB信號通路的串話在乙肝相關(guān)性肝癌發(fā)生中的作用[D]. 周海燕.華中科技大學(xué) 2011
[3]NSAIDs對lovo結(jié)腸癌細胞株COX-2、hmLH1、hmSH2、Bcl-2、caspase-3蛋白的影響及抗腫瘤機制的初步研究[D]. 哈雪梅.河北醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號：3587560