他克莫司下調(diào)miR-429抑制人成纖維細(xì)胞增殖的研究
發(fā)布時(shí)間：2022-01-10 08:25
目的:探究他克莫司通過(guò)下調(diào)miR-429抑制人成纖維細(xì)胞增殖來(lái)預(yù)防瘢痕粘連的作用及其潛在的作用機(jī)制。方法:為了確定術(shù)后瘢痕組織中miR-429的表達(dá)情況,我們將取自人體術(shù)后瘢痕組織中提取的RNA進(jìn)行了qRT-PCR檢測(cè);并將體外培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞,分別用0μM和50μM濃度的FK-506溶液處理24h,也采用qRT-PCR檢測(cè)用兩者結(jié)果分析他克莫司作用對(duì)人成纖維細(xì)胞中miR-429的影響。采用Western-blot檢測(cè)了人瘢痕成纖維細(xì)胞在轉(zhuǎn)染miR-429模擬物和對(duì)照物后PTEN表達(dá)量的變化。通過(guò)在線miRNA靶點(diǎn)預(yù)測(cè)數(shù)據(jù)庫(kù),預(yù)測(cè)了潛在的miR-429的靶標(biāo)基因PTEN,并依據(jù)預(yù)測(cè)的位點(diǎn)構(gòu)建了PTEN’3-UTR的野生型、突變型質(zhì)粒,之后采用雙熒光素酶報(bào)告檢測(cè)確定miR-429和PTEN的靶向關(guān)系。將FK-506作用的成纖維細(xì)胞分為濃度組（0,5,10,25,50,100μM）和時(shí)間組（0,12,24,36,48,60h）,通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FK-506對(duì)體外培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞增殖活性的影響。將經(jīng)過(guò)FK-506處理和miR-429慢病毒轉(zhuǎn)染的成纖維細(xì)胞進(jìn)行不同分組（對(duì)照組,FK-...
【文章來(lái)源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】：39 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
從人體癱痕組織中分離、培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞鏡下形態(tài)，x1000
大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 FK-506 能降低 miR-429 在人成纖維細(xì)胞中的表達(dá)為了確定人瘢痕組織中 miR-429 的表達(dá)情況，我們將樣本組織中提取的 RNA 進(jìn)行了qRT-PCR 檢測(cè)，并將不同樣本組織分組進(jìn)行了對(duì)比，結(jié)果根據(jù)圖 1-2 顯示的情況，人瘢痕組織中 miR-429 相對(duì)正常組織中 miR-429 的表達(dá)增加。為了確定他克莫司對(duì)人成纖維細(xì)胞中 miR-429 表達(dá)的影響，我們用 50μM 的 FK-506 單次施用 5 分鐘處理人成纖維細(xì)胞，之后立即用 PBS 洗滌三次，隨后培養(yǎng) 24h，然后使用 qRT-PCR 測(cè) miR-429 的表達(dá)。結(jié)果如圖 1-3 顯示，經(jīng)過(guò) FK-506 處理的纖維細(xì)胞中 miR-429 的水平顯著低于對(duì)照成纖維細(xì)胞中的水平。這些結(jié)果表明 FK-506 可以下調(diào)人成纖維細(xì)胞中 miR-429 的表達(dá)。
大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 FK-506 能降低 miR-429 在人成纖維細(xì)胞中的表達(dá)為了確定人瘢痕組織中 miR-429 的表達(dá)情況，我們將樣本組織中提取的 RNA 進(jìn)行了qRT-PCR 檢測(cè)，并將不同樣本組織分組進(jìn)行了對(duì)比，結(jié)果根據(jù)圖 1-2 顯示的情況，人瘢痕組織中 miR-429 相對(duì)正常組織中 miR-429 的表達(dá)增加。為了確定他克莫司對(duì)人成纖維細(xì)胞中 miR-429 表達(dá)的影響，我們用 50μM 的 FK-506 單次施用 5 分鐘處理人成纖維細(xì)胞，之后立即用 PBS 洗滌三次，隨后培養(yǎng) 24h，然后使用 qRT-PCR 測(cè) miR-429 的表達(dá)。結(jié)果如圖 1-3 顯示，經(jīng)過(guò) FK-506 處理的纖維細(xì)胞中 miR-429 的水平顯著低于對(duì)照成纖維細(xì)胞中的水平。這些結(jié)果表明 FK-506 可以下調(diào)人成纖維細(xì)胞中 miR-429 的表達(dá)。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]喉內(nèi)植入硅膠膜預(yù)防和治療雙側(cè)聲帶粘連[J]. 陳健,吳海濤,程磊,何培杰. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2018(23)
[2]Mitomycin C induces apoptosis in human epidural scar fibroblasts after surgical decompression for spinal cord injury[J]. Tao Sui,Da-wei Ge,Lei Yang,Jian Tang,Xiao-jian Cao,Ying-bin Ge. Neural Regeneration Research. 2017(04)
本文編號(hào)：3580384
【文章來(lái)源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】：39 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
從人體癱痕組織中分離、培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞鏡下形態(tài)，x1000
大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 FK-506 能降低 miR-429 在人成纖維細(xì)胞中的表達(dá)為了確定人瘢痕組織中 miR-429 的表達(dá)情況，我們將樣本組織中提取的 RNA 進(jìn)行了qRT-PCR 檢測(cè)，并將不同樣本組織分組進(jìn)行了對(duì)比，結(jié)果根據(jù)圖 1-2 顯示的情況，人瘢痕組織中 miR-429 相對(duì)正常組織中 miR-429 的表達(dá)增加。為了確定他克莫司對(duì)人成纖維細(xì)胞中 miR-429 表達(dá)的影響，我們用 50μM 的 FK-506 單次施用 5 分鐘處理人成纖維細(xì)胞，之后立即用 PBS 洗滌三次，隨后培養(yǎng) 24h，然后使用 qRT-PCR 測(cè) miR-429 的表達(dá)。結(jié)果如圖 1-3 顯示，經(jīng)過(guò) FK-506 處理的纖維細(xì)胞中 miR-429 的水平顯著低于對(duì)照成纖維細(xì)胞中的水平。這些結(jié)果表明 FK-506 可以下調(diào)人成纖維細(xì)胞中 miR-429 的表達(dá)。
大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 FK-506 能降低 miR-429 在人成纖維細(xì)胞中的表達(dá)為了確定人瘢痕組織中 miR-429 的表達(dá)情況，我們將樣本組織中提取的 RNA 進(jìn)行了qRT-PCR 檢測(cè)，并將不同樣本組織分組進(jìn)行了對(duì)比，結(jié)果根據(jù)圖 1-2 顯示的情況，人瘢痕組織中 miR-429 相對(duì)正常組織中 miR-429 的表達(dá)增加。為了確定他克莫司對(duì)人成纖維細(xì)胞中 miR-429 表達(dá)的影響，我們用 50μM 的 FK-506 單次施用 5 分鐘處理人成纖維細(xì)胞，之后立即用 PBS 洗滌三次，隨后培養(yǎng) 24h，然后使用 qRT-PCR 測(cè) miR-429 的表達(dá)。結(jié)果如圖 1-3 顯示，經(jīng)過(guò) FK-506 處理的纖維細(xì)胞中 miR-429 的水平顯著低于對(duì)照成纖維細(xì)胞中的水平。這些結(jié)果表明 FK-506 可以下調(diào)人成纖維細(xì)胞中 miR-429 的表達(dá)。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]喉內(nèi)植入硅膠膜預(yù)防和治療雙側(cè)聲帶粘連[J]. 陳健,吳海濤,程磊,何培杰. 臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2018(23)
[2]Mitomycin C induces apoptosis in human epidural scar fibroblasts after surgical decompression for spinal cord injury[J]. Tao Sui,Da-wei Ge,Lei Yang,Jian Tang,Xiao-jian Cao,Ying-bin Ge. Neural Regeneration Research. 2017(04)
本文編號(hào)：3580384
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