目的:目的一:研究應(yīng)力對(duì)大鼠BMSCs成骨、成脂肪分化的影響及分化過(guò)程中miR-140-5P表達(dá)水平的變化;目的二:研究miR-140-5P對(duì)應(yīng)力作用下的大鼠BMSCs成骨、成脂肪分化的影響;目的三:研究牽張應(yīng)力與miR-140-5P兩者通過(guò)TGFβ 1/Smad2信號(hào)傳導(dǎo)通路對(duì)大鼠BMSCs分化的調(diào)控作用。方法:第一步:分組誘導(dǎo)大鼠體外BMSCs成骨、成脂分化,對(duì)實(shí)驗(yàn)組予以加載牽張應(yīng)力。誘導(dǎo)一定時(shí)間后檢測(cè)成骨分化組成骨標(biāo)志物的表達(dá)程度與成脂分化組成脂標(biāo)志物的表達(dá)程度,同時(shí)PCR檢測(cè)不同時(shí)期各組miR-140-5P的表達(dá)水平。第二步:構(gòu)建miR-140-5P的過(guò)表達(dá)與低表達(dá)模型,對(duì)實(shí)驗(yàn)組繼續(xù)予以加載應(yīng)力,分組進(jìn)行成骨、成脂肪誘導(dǎo)分化。誘導(dǎo)完成后分別用PCR、WB檢測(cè)miR-140-5P過(guò)表達(dá)與低表達(dá)模型中成骨分化誘導(dǎo)組成骨標(biāo)志物的表達(dá)水平與成脂分化誘導(dǎo)組成脂標(biāo)志物的表達(dá)水平。第三步:miR-140-5P的過(guò)表達(dá)與低表達(dá)模型與應(yīng)力組及無(wú)應(yīng)力組交叉配對(duì),檢測(cè)當(dāng)miR-140-5P表達(dá)水平與牽張應(yīng)力均發(fā)生變化時(shí),TGFβ 1/Smad2信號(hào)通路標(biāo)志物表達(dá)水平的變化。結(jié)果:第一步結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組中... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１：大鼠股骨ＢＭＳＣｓ培養(yǎng)圖片；ａ：原代ＢＭＳＣｓ，?ｂ；第三代ＢＭＳＣｓ??

Ｌ＇?．??圖１－１：大鼠股骨ＢＭＳＣｓ培養(yǎng)圖片；ａ：原代ＢＭＳＣｓ，?ｂ；第三代ＢＭＳＣｓ??Ｆｉｇｕｒｅｌ－１?：?Ｆｅｍｕｒ?ＢＭＳＣｓ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｐｉｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｒａｔｓ；?ａ：?ｐｒｉｍａｒｙ?ＢＭＳＣｓ，?ｂ；?ｔｈｉｒｄ?ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?ＢＭＳＣｓ??ａ?ＡＬＰ染色?ｂ紅油Ｏ染色??普通培養(yǎng)組?’?．＇，’?．?＇普通培養(yǎng)組??ＢＭＰ＇”?了，Ｗ．?？??成骨誘導(dǎo)組＇?‘？?成脂誘導(dǎo)組??圖１－２：?ＢＭＳＣｓ成骨、成脂分化完成后染色結(jié)果ａ：成骨分化的ＢＭＳＣｓ與平衡培養(yǎng)的ＢＭＳＣｓ，?ＡＬＰ??染色結(jié)果；ｂ：成脂分化的ＢＭＳＣｓ與平衡培養(yǎng)的ＢＭＳＣｓ，紅油０染色結(jié)果。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２：?ＢＭＳＣｓ?Ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ａｆｔｅｒ?ｃｏｍｐｌｅｔｉｏｎ?ｏｆ?ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ?ａｎｄ?ａｄｉｐｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ；ａ：??Ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＡＬＰ；?ｂ：?Ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?Ｒｅｄ?ｏｉｌ?Ｏ??１．２．２應(yīng)力力〇＾？??針對(duì)本次實(shí)驗(yàn)，我們課題組設(shè)計(jì)了特定應(yīng)力牽張裝置，此裝置可以與Ｂｉｏｆｌｅｘ細(xì)??胞拉伸硅膠六孔板配套使用，待細(xì)胞貼壁后，通過(guò)牽拉硅膠板將應(yīng)力傳導(dǎo)至細(xì)胞，并??且根據(jù)需要可以通過(guò)不同程度的改變硅膠板面積

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂和成骨分化過(guò)程中Wnt信號(hào)通路的調(diào)控效應(yīng)[J]. 李萍華,劉鈺瑜,崔燎.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(10)
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碩士論文
[1]DDR2基因缺失對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性影響的研究[D]. 隋珂.第四軍醫(yī)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3561979