小鼠關節(jié)軟骨來源祖細胞體外軟骨組織構建及體內抗血管化研究
發(fā)布時間:2022-01-01 05:24
第一部分小鼠關節(jié)軟骨來源祖細胞的提取與鑒定目的:從小鼠關節(jié)軟骨中分離培養(yǎng)關節(jié)軟骨來源祖細胞(Articular Cartilage-derived Progenitor Cells,ACPCs),觀察 ACPCs 的細胞形態(tài),鑒定其增殖、分化能力及表面標志物,探究小鼠ACPCs的細胞特性,為軟骨組織工程提供合適的種子細胞。方法:無菌條件從5天齡,雄性C57BL/6小鼠各關節(jié)中獲得軟骨組織,以Ⅳ型膠原酶消化6-8h,獲得細胞懸液。采用纖連蛋白分黏附分選法獲得小鼠ACPCs。流式細胞術鑒定其表面標志物表達。待細胞長至80%行倒置顯微鏡觀察其細胞形態(tài);克隆形成實驗評估其增殖能力;三系誘導檢測細胞多系分化能力。結果:倒置顯微鏡觀察顯示小鼠ACPCs呈中間寬兩邊細長的短梭形,其形態(tài)與間充質細胞類似。流式細胞鑒定,CD29、CD73表達分別為(89.2±1.53)%和(81.1±0.84)%;CD90、CD105 分別為(24.3±1.11)%和(41.6±0.62)%;Notch-1表達為(12.0±1.05)%;CD31、CD44、CD45表達分別為低表達或不表達?寺⌒纬蓪嶒烇@示小鼠ACPC...
【文章來源】:蘇州大學江蘇省 211工程院校
【文章頁數】:76 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.?ACPCs細胞形態(tài)
圖3.?ACPCs克隆形成實驗
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]骨髓間充質干細胞的定向分化潛能[J]. 李喬喬,吳振強,張麗君. 中國組織工程研究. 2017(25)
[2]VEGF抑制劑阿西替尼對人胃癌細胞周期及凋亡的影響[J]. 袁春秀,王寧菊,吳婧. 寧夏醫(yī)學雜志. 2017(06)
[3]力學刺激調控骨髓間充質細胞向軟骨的分化[J]. 張曉梅,彭旭,魏詩航,施雪旎,劉艷,何學令. 中國組織工程研究. 2016(45)
[4]VEGF及其抑制劑Axitinib在非小細胞肺癌臨床治療中的應用[J]. 王翠翠,呼彩蓮,馬伯林. 現代腫瘤醫(yī)學. 2014(03)
[5]人胚胎關節(jié)軟骨來源的間充質干細胞[J]. 崔穎,王宏,徐天睿,李學佩,李凌松. 北京大學學報(醫(yī)學版). 2004(03)
本文編號:3561709
【文章來源】:蘇州大學江蘇省 211工程院校
【文章頁數】:76 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.?ACPCs細胞形態(tài)
圖3.?ACPCs克隆形成實驗
?於??0C:^5S*?v?f?.?l???|?T???V?1/?/.J?■:?■-?'<?9J?1*?v?IvVU?r?r??D免?L.ij?l?U)?58轉…*...l??l?t%.?INOlGM-?l??n?■?a?n?nr??n?I]?|?m?nil??|?/?|?fi?|?i?I?11??lkJ?\?l?\?l\\?l\\??q?V?is5??c3?o?J9*?iaJ?i〇J?9?to1?>e3?is*?o?13'??7?i?5??圖2.?ACPCs流式細胞鑒定。??3.克隆形成實驗??在肉眼下觀察,可見在培養(yǎng)皿底部均有多個ACPCs單細胞克隆形成。在倒置顯微鏡??下觀察,可見每個單細胞克隆是由多個形態(tài)類似的短梭形細胞構成,克隆中心由于細??胞密度高,呈現鋪路石樣細胞分布(圖3)。??_gp_??■1??圖3.?ACPCs克隆形成實驗。??4.三系誘導??成營誘導在肉眼下觀察茜素紅S染色,可見誘導組有大面積橙紅色染色區(qū),非??誘導組無橙紅色染色區(qū)。在倒置顯微鏡下觀察茜素紅S染色,誘導組可見橙紅色染色??12??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]骨髓間充質干細胞的定向分化潛能[J]. 李喬喬,吳振強,張麗君. 中國組織工程研究. 2017(25)
[2]VEGF抑制劑阿西替尼對人胃癌細胞周期及凋亡的影響[J]. 袁春秀,王寧菊,吳婧. 寧夏醫(yī)學雜志. 2017(06)
[3]力學刺激調控骨髓間充質細胞向軟骨的分化[J]. 張曉梅,彭旭,魏詩航,施雪旎,劉艷,何學令. 中國組織工程研究. 2016(45)
[4]VEGF及其抑制劑Axitinib在非小細胞肺癌臨床治療中的應用[J]. 王翠翠,呼彩蓮,馬伯林. 現代腫瘤醫(yī)學. 2014(03)
[5]人胚胎關節(jié)軟骨來源的間充質干細胞[J]. 崔穎,王宏,徐天睿,李學佩,李凌松. 北京大學學報(醫(yī)學版). 2004(03)
本文編號:3561709
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