發(fā)布時(shí)間：2021-12-30 11:05

　　目的:1.研究HER2對(duì)骨肉瘤增殖,遷移、侵襲能力的影響。2.研究HER2是否通過PI3K/AKT通路調(diào)節(jié)PCNA,MMP2的表達(dá),從而促進(jìn)骨肉瘤增殖,遷移及侵襲。方法:1.應(yīng)用Western Blot從MG63,Sa OS2,HOS,U2OS這4種骨肉瘤細(xì)胞中分別篩選出HER2表達(dá)量最高和最低的細(xì)胞株。2.HER2干擾慢病毒轉(zhuǎn)染HER2表達(dá)量最高的細(xì)胞株,HER2過表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)染HER2表達(dá)量最低的細(xì)胞株。3.Western blot技術(shù)分別檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染HER2干擾慢病毒和HER2過表達(dá)慢病毒后HER2蛋白表達(dá)變化,驗(yàn)證HER2是否成功敲低或過表達(dá)。4.CCK8法觀察細(xì)胞增殖能力變化。5.劃痕試驗(yàn)觀察細(xì)胞遷移能力變化。6.Transwell法觀察細(xì)胞侵襲能力變化。7.Western blot技術(shù)分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染HER2過表達(dá)慢病毒后骨肉瘤HOS細(xì)胞以及往HER2過表達(dá)的骨肉瘤HOS細(xì)胞加入PI3K/AKT通路抑制劑LY294002后p AKT473、p AKT308、AKT、PCNA、MMP2蛋白表達(dá)變化8.繪制裸鼠腫瘤生長(zhǎng)曲線觀察HER2表達(dá)對(duì)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響9.免疫熒光觀察裸鼠移... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

HER2蛋白在不同骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)

203.HER2表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖能力的影響本實(shí)驗(yàn)采用CCK8法分析細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，從而反映細(xì)胞的增殖能力。結(jié)果顯示，HER2干擾組的骨肉瘤MG63細(xì)胞的增殖能力明顯受到抑制（見圖3A，P<0.05），而HER2過表達(dá)組的骨肉瘤HOS細(xì)胞的增殖速度明顯高于對(duì)照組（見圖3B，P<0.05）。4.HER2表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞遷移能力的影響A圖2慢病毒轉(zhuǎn)染后骨肉瘤細(xì)胞HER2蛋白的表達(dá)變化B圖3HER2表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖能力的影響A

203.HER2表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖能力的影響本實(shí)驗(yàn)采用CCK8法分析細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，從而反映細(xì)胞的增殖能力。結(jié)果顯示，HER2干擾組的骨肉瘤MG63細(xì)胞的增殖能力明顯受到抑制（見圖3A，P<0.05），而HER2過表達(dá)組的骨肉瘤HOS細(xì)胞的增殖速度明顯高于對(duì)照組（見圖3B，P<0.05）。4.HER2表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞遷移能力的影響A圖2慢病毒轉(zhuǎn)染后骨肉瘤細(xì)胞HER2蛋白的表達(dá)變化B圖3HER2表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖能力的影響A

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Role of ErbB family receptor tyrosine kinases in intrahepatic cholangiocarcinoma[J]. Alphonse E Sirica.  World Journal of Gastroenterology. 2008(46)



本文編號(hào)：3558067