目的:1.研究HER2對骨肉瘤增殖,遷移、侵襲能力的影響。2.研究HER2是否通過PI3K/AKT通路調(diào)節(jié)PCNA,MMP2的表達,從而促進骨肉瘤增殖,遷移及侵襲。方法:1.應(yīng)用Western Blot從MG63,Sa OS2,HOS,U2OS這4種骨肉瘤細胞中分別篩選出HER2表達量最高和最低的細胞株。2.HER2干擾慢病毒轉(zhuǎn)染HER2表達量最高的細胞株,HER2過表達慢病毒轉(zhuǎn)染HER2表達量最低的細胞株。3.Western blot技術(shù)分別檢測細胞轉(zhuǎn)染HER2干擾慢病毒和HER2過表達慢病毒后HER2蛋白表達變化,驗證HER2是否成功敲低或過表達。4.CCK8法觀察細胞增殖能力變化。5.劃痕試驗觀察細胞遷移能力變化。6.Transwell法觀察細胞侵襲能力變化。7.Western blot技術(shù)分別檢測轉(zhuǎn)染HER2過表達慢病毒后骨肉瘤HOS細胞以及往HER2過表達的骨肉瘤HOS細胞加入PI3K/AKT通路抑制劑LY294002后p AKT473、p AKT308、AKT、PCNA、MMP2蛋白表達變化8.繪制裸鼠腫瘤生長曲線觀察HER2表達對裸鼠移植瘤生長的影響9.免疫熒光觀察裸鼠移... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

HER2蛋白在不同骨肉瘤細胞中的表達

203.HER2表達對骨肉瘤細胞增殖能力的影響本實驗采用CCK8法分析細胞的生長曲線，從而反映細胞的增殖能力。結(jié)果顯示，HER2干擾組的骨肉瘤MG63細胞的增殖能力明顯受到抑制（見圖3A，P<0.05），而HER2過表達組的骨肉瘤HOS細胞的增殖速度明顯高于對照組（見圖3B，P<0.05）。4.HER2表達對骨肉瘤細胞遷移能力的影響A圖2慢病毒轉(zhuǎn)染后骨肉瘤細胞HER2蛋白的表達變化B圖3HER2表達對骨肉瘤細胞增殖能力的影響A

203.HER2表達對骨肉瘤細胞增殖能力的影響本實驗采用CCK8法分析細胞的生長曲線，從而反映細胞的增殖能力。結(jié)果顯示，HER2干擾組的骨肉瘤MG63細胞的增殖能力明顯受到抑制（見圖3A，P<0.05），而HER2過表達組的骨肉瘤HOS細胞的增殖速度明顯高于對照組（見圖3B，P<0.05）。4.HER2表達對骨肉瘤細胞遷移能力的影響A圖2慢病毒轉(zhuǎn)染后骨肉瘤細胞HER2蛋白的表達變化B圖3HER2表達對骨肉瘤細胞增殖能力的影響A

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Role of ErbB family receptor tyrosine kinases in intrahepatic cholangiocarcinoma[J]. Alphonse E Sirica.  World Journal of Gastroenterology. 2008(46)



本文編號：3558067