目的:1.體外實(shí)驗(yàn)研究BMSCs調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞分化的作用及其機(jī)制;2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究BMSCs髓內(nèi)移植治療去神經(jīng)傳入性疼痛的作用及機(jī)制。方法:1.體外實(shí)驗(yàn)中用脂多糖刺激小膠質(zhì)細(xì)胞模擬神經(jīng)炎癥發(fā)生發(fā)展,再與BMSCs、GDNF或siRNA GDNF-BMSCs共培養(yǎng),采用RT-PCR法和ELISA法檢測(cè)IL-1β、TNF-α與IL-10的表達(dá)水平;用RT-PCR法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志物表達(dá)水平,Western blot法檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)pNF-κb、pPI3K、pAKT的表達(dá)水平;2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中制作去神經(jīng)傳入性疼痛動(dòng)物模型,于術(shù)后21天髓內(nèi)移植BMSCs或GDNF-siRNA BMSCs,移植治療7天后檢測(cè)其行為學(xué)變化,主要觀察其疼痛相關(guān)行為的改變,同時(shí)取血清標(biāo)本進(jìn)行RT-PCR法和ELISA法檢測(cè)IL-1β、TNF-α與IL-10的表達(dá)水平,取損傷處脊髓標(biāo)本制作石蠟切片,免疫熒光共定位檢測(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞分型;Western blot法檢測(cè)pNF-κb、pPI3K、pAKT的表達(dá)水平;3.選擇IBM SPSS Statics 20.0軟件統(tǒng)計(jì)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１大鼠ＢＭＳＣ的鑒定和ＧＤＮＦ的分泌??ＦＩＧＵＲＥ?１－１?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ａｎｄ?

圖１－３?ＧＤＮＦ?ｓｉＲＮＡ有效阻斷ＢＭＳＣ分泌ＧＤＮＦ??ＦＩＧＵＲＥ?１－３?ＧＤＮＦ?ｓｉＲＮＡ?ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ?ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ＧＤＮＦ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ??

?項(xiàng)士學(xué)位論文???４．?ＢＭＳＣ通過(guò)分泌ＧＤＮＦ調(diào)控ＤＰ大鼠受損脊髓組織中ＮＦ－ｋＢ及ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信號(hào)??通路的活化??如圖２－５所示，與Ｓｈａｍ組相比，在ＤＰ組中，ｐＮＦ－ＫＢ的表達(dá)顯著增力Ｐ，而ｐＰＩ３Ｋ??和ｐＡＫＴ沒(méi)有明顯變化。移植ＢＭＳＣｓ后，ｐＮＦ－ＫＢ的表達(dá)明顯下調(diào)，而ｐＰＩ３Ｋ和??ｐＡＫＴ的表達(dá)明顯上調(diào)。因此，ＢＭＳＣｓ在促進(jìn)ＤＰ大鼠ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ表達(dá)的同時(shí)下調(diào)??了ＮＦ－ｋＢ的激活。然而，用ｓｉＲＮＡ沉默ＢＭＳＣｓ中ＧＤＮＦ表達(dá)后，ＢＭＳＣｓ的這些作??用明顯減弱，表明ＢＭＳＣｓ通過(guò)分泌ＧＤＮＦ抑制ＮＦ－ｋＢ和的表達(dá)并促進(jìn)了ＰＩ３Ｋ?／??ＡＫＴ信號(hào)通路的表達(dá)，進(jìn)而緩解大鼠ＤＰ。??ｐＮ?Ｆ－ＫＢ?？靜?＿＿＿＿＿＿？｜｜？??ｐＰＩ３Ｋ?—丨「＿?—?一廠．舊．．．一＿＿＿丨＿丨丨丨Ｉ丨丨丨丨丨？丨??ｐＡＫＴ?—，一＊?？——?一??＜／?／?＜／??Ｉ４］?＃?Ｂ?〇ｉ?２．５－｜?Ｃ??一?丁?＞?？??０?３－?ｉ－ｐＪ—｜?＊?①?丁??１?、ｉ?＂?ｃ２°－?．??Ｐ１！?＇Ｉ?１．５－?”?ｊ?內(nèi)?？?Ｖ?Ｉ??１?■?ｉｉｉ?■?１１?卜．〇－■?＿ｎ??°＾—?＞?■?■?ｄａ?ｄｅａｆｆｅｒｅｎｔａｔｉｏｎ?ｍｏｄｅｌ??，Ｚ?＾?Ｚ?？?０＊５－?■?■?Ｉ?ｃａ?ｓｉＧＤＮＰ?ＢＭＳＣ??ａ．?〇，〇?■?１．１，３?＿Ｂ?ｌａ，！?Ｕ?Ｃ３?ＢＭＳＣ??ｐＰＩ３Ｋ?ｐＡＫＴ??圖２－５?ＢＭＳＣｓ通過(guò)ＧＤＮＦ調(diào)控ＤＰ大鼠的ＮＦ－ｋＢ和ＰＩ３Ｋ?／ＡＫＴ信號(hào)通路??ＦＩＧＵＲＥ?２－５?ＢＭＳＣｓ?ｒｅｇｕｌａｔ


本文編號(hào)：3551772