第一部分大鼠腦出血后腦組織中PERK通路、ATF6通路、IRE1通路中的蛋白表達(dá)變化目的探討大鼠腦出血（intracerebral hemorrhage,ICH）后繼發(fā)性腦損傷（secondary brain injury,SBI）中蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶（protein kinase R-like ER kinase,PERK）通路、激活轉(zhuǎn)錄因子6（activating transcription factor 6,ATF6）通路、肌醇激酶1（inositol requiring kinase 1,IRE1）通路中的蛋白的表達(dá)變化。方法1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組:健康成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠48只,被隨機(jī)分為假手術(shù)組、ICH4小時(shí)組、ICH8小時(shí)組、ICH 12小時(shí)組、ICH 16小時(shí)組、ICH 24小時(shí)組、ICH 48小時(shí)組、ICH 72小時(shí)組一共8組,每組6只大鼠。2、ICH組模型建立:抽取大鼠自體動(dòng)脈血,注入腦實(shí)質(zhì)內(nèi)。按照實(shí)驗(yàn)分組在4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、16小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)后處死大鼠并灌注取腦。3.體外ICH模型:利用氧合血紅蛋白（Oxy H... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

假手術(shù)組及ICH后的顱內(nèi)血腫冠狀切片及大腦頂面穿刺部位點(diǎn)

圖 3 ICH 后各時(shí)間點(diǎn) XBP1s 蛋白水平變化。 A．Western Blot 分析 ICH 后 4,8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 XBP1s 的蛋白水平。B．灰度值計(jì)算 ICH 后血腫周圍腦組織中 XBP1s 蛋白的相對水平。Sham 組中 XBP1s 蛋白的平均表達(dá)量標(biāo)準(zhǔn)化為 1。數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)±SME 表示。**表示與 Sham 組比較 P < 0.01，*表示與 Sham 組比較 P < 0.05，n = 6。##p < 0.01 16 h 組 vs 12 h 組; $$p < 0.01 16 h 組 vs 24 h 組,n=6。3.ICH 后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血腫周圍腦組織中 ATF6 的 Western blot 檢測結(jié)果為觀察 ICH 后 ATF6 蛋白水平的變化，我們采用 Western Blot 的方法分別檢測了ICH 后 4, 8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 ATF6 蛋白水平。結(jié)果顯示（圖 4）：與 Sham 組相比，在 ICH 后 12 h，與 Sham 組相比 ATF6 蛋白水平顯著升高（P<0.01）；至 48h， ATF6 蛋白水平達(dá)到最高峰仍顯著高于 Sham 組（P<0.01）且顯著高于 24h組（P<0.01）及 72h 組(P<0.01)

圖 4 ICH 后各時(shí)間點(diǎn) ATF6 蛋白水平變化。 A．Western Blot 分析 ICH 后 4,8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 ATF6 的蛋白水平。B．灰度值計(jì)算 ICH 后血腫周圍腦組織中 ATF6 蛋白的相對水平。Sham 組中 ATF6 蛋白的平均表達(dá)量標(biāo)準(zhǔn)化為1。數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)±SME 表示。**表示與 Sham 組比較 P < 0.01，*表示與 Sham 組比較 P < 0.05，n = 6。##p < 0.01 48 h 組 vs 24 h 組; $$p < 0.01 48 h 組 vs 72 h 組, n=6。4.ICH 后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血腫周圍腦組織中 p-eIF2α的 Western blot 檢測結(jié)果為觀察 ICH 后 p-eIF2α蛋白水平的變化，我們采用 Western Blot 的方法分別檢測了 ICH 后 4, 8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 p-eIF2α蛋白水平。結(jié)果顯示（圖5）：與 Sham 組相比，在 ICH 后 4 h，與 Sham 組相比 p-eIF2α蛋白水平顯著升高（P<0.01）；至 48h， p-eIF2α蛋白水平達(dá)到最高峰仍顯著高于 Sham 組（P<0.01）且顯著高于 24h 組（P<0.01）及 72h 組(P<0.01)


本文編號：3546675