PERK通路在大鼠腦出血后繼發(fā)性腦損傷中的作用及機制研究
發(fā)布時間:2021-12-22 16:00
第一部分大鼠腦出血后腦組織中PERK通路、ATF6通路、IRE1通路中的蛋白表達(dá)變化目的探討大鼠腦出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后繼發(fā)性腦損傷(secondary brain injury,SBI)中蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)通路、激活轉(zhuǎn)錄因子6(activating transcription factor 6,ATF6)通路、肌醇激酶1(inositol requiring kinase 1,IRE1)通路中的蛋白的表達(dá)變化。方法1、實驗動物分組:健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠48只,被隨機分為假手術(shù)組、ICH4小時組、ICH8小時組、ICH 12小時組、ICH 16小時組、ICH 24小時組、ICH 48小時組、ICH 72小時組一共8組,每組6只大鼠。2、ICH組模型建立:抽取大鼠自體動脈血,注入腦實質(zhì)內(nèi)。按照實驗分組在4小時、8小時、12小時、16小時、24小時、48小時、72小時后處死大鼠并灌注取腦。3.體外ICH模型:利用氧合血紅蛋白(Oxy H...
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:114 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
假手術(shù)組及ICH后的顱內(nèi)血腫冠狀切片及大腦頂面穿刺部位點
圖 3 ICH 后各時間點 XBP1s 蛋白水平變化。 A.Western Blot 分析 ICH 后 4,8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 XBP1s 的蛋白水平。B.灰度值計算 ICH 后血腫周圍腦組織中 XBP1s 蛋白的相對水平。Sham 組中 XBP1s 蛋白的平均表達(dá)量標(biāo)準(zhǔn)化為 1。數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)±SME 表示。**表示與 Sham 組比較 P < 0.01,*表示與 Sham 組比較 P < 0.05,n = 6。##p < 0.01 16 h 組 vs 12 h 組; $$p < 0.01 16 h 組 vs 24 h 組,n=6。3.ICH 后各個時間點血腫周圍腦組織中 ATF6 的 Western blot 檢測結(jié)果為觀察 ICH 后 ATF6 蛋白水平的變化,我們采用 Western Blot 的方法分別檢測了ICH 后 4, 8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 ATF6 蛋白水平。結(jié)果顯示(圖 4):與 Sham 組相比,在 ICH 后 12 h,與 Sham 組相比 ATF6 蛋白水平顯著升高(P<0.01);至 48h, ATF6 蛋白水平達(dá)到最高峰仍顯著高于 Sham 組(P<0.01)且顯著高于 24h組(P<0.01)及 72h 組(P<0.01)
圖 4 ICH 后各時間點 ATF6 蛋白水平變化。 A.Western Blot 分析 ICH 后 4,8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 ATF6 的蛋白水平。B.灰度值計算 ICH 后血腫周圍腦組織中 ATF6 蛋白的相對水平。Sham 組中 ATF6 蛋白的平均表達(dá)量標(biāo)準(zhǔn)化為1。數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)±SME 表示。**表示與 Sham 組比較 P < 0.01,*表示與 Sham 組比較 P < 0.05,n = 6。##p < 0.01 48 h 組 vs 24 h 組; $$p < 0.01 48 h 組 vs 72 h 組, n=6。4.ICH 后各個時間點血腫周圍腦組織中 p-eIF2α的 Western blot 檢測結(jié)果為觀察 ICH 后 p-eIF2α蛋白水平的變化,我們采用 Western Blot 的方法分別檢測了 ICH 后 4, 8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 p-eIF2α蛋白水平。結(jié)果顯示(圖5):與 Sham 組相比,在 ICH 后 4 h,與 Sham 組相比 p-eIF2α蛋白水平顯著升高(P<0.01);至 48h, p-eIF2α蛋白水平達(dá)到最高峰仍顯著高于 Sham 組(P<0.01)且顯著高于 24h 組(P<0.01)及 72h 組(P<0.01)
本文編號:3546675
【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:114 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
假手術(shù)組及ICH后的顱內(nèi)血腫冠狀切片及大腦頂面穿刺部位點
圖 3 ICH 后各時間點 XBP1s 蛋白水平變化。 A.Western Blot 分析 ICH 后 4,8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 XBP1s 的蛋白水平。B.灰度值計算 ICH 后血腫周圍腦組織中 XBP1s 蛋白的相對水平。Sham 組中 XBP1s 蛋白的平均表達(dá)量標(biāo)準(zhǔn)化為 1。數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)±SME 表示。**表示與 Sham 組比較 P < 0.01,*表示與 Sham 組比較 P < 0.05,n = 6。##p < 0.01 16 h 組 vs 12 h 組; $$p < 0.01 16 h 組 vs 24 h 組,n=6。3.ICH 后各個時間點血腫周圍腦組織中 ATF6 的 Western blot 檢測結(jié)果為觀察 ICH 后 ATF6 蛋白水平的變化,我們采用 Western Blot 的方法分別檢測了ICH 后 4, 8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 ATF6 蛋白水平。結(jié)果顯示(圖 4):與 Sham 組相比,在 ICH 后 12 h,與 Sham 組相比 ATF6 蛋白水平顯著升高(P<0.01);至 48h, ATF6 蛋白水平達(dá)到最高峰仍顯著高于 Sham 組(P<0.01)且顯著高于 24h組(P<0.01)及 72h 組(P<0.01)
圖 4 ICH 后各時間點 ATF6 蛋白水平變化。 A.Western Blot 分析 ICH 后 4,8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 ATF6 的蛋白水平。B.灰度值計算 ICH 后血腫周圍腦組織中 ATF6 蛋白的相對水平。Sham 組中 ATF6 蛋白的平均表達(dá)量標(biāo)準(zhǔn)化為1。數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)±SME 表示。**表示與 Sham 組比較 P < 0.01,*表示與 Sham 組比較 P < 0.05,n = 6。##p < 0.01 48 h 組 vs 24 h 組; $$p < 0.01 48 h 組 vs 72 h 組, n=6。4.ICH 后各個時間點血腫周圍腦組織中 p-eIF2α的 Western blot 檢測結(jié)果為觀察 ICH 后 p-eIF2α蛋白水平的變化,我們采用 Western Blot 的方法分別檢測了 ICH 后 4, 8,12,16,24, 48,72h 的血腫周圍腦組織中 p-eIF2α蛋白水平。結(jié)果顯示(圖5):與 Sham 組相比,在 ICH 后 4 h,與 Sham 組相比 p-eIF2α蛋白水平顯著升高(P<0.01);至 48h, p-eIF2α蛋白水平達(dá)到最高峰仍顯著高于 Sham 組(P<0.01)且顯著高于 24h 組(P<0.01)及 72h 組(P<0.01)
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