椎間盤退行性疾病在臨床上極為常見,是引起頸肩腰腿痛的常見原因。椎間盤內(nèi)髓核細胞衰老或功能失調(diào)導(dǎo)致的髓核退變是椎間盤退變的重要始動因素。干細胞移植可以直接針對病因?qū)ν俗兯韬诉M行再生修復(fù),而脂肪來源的間充質(zhì)干細胞（adipose-derived stem cell,ADSC）由于其獲取容易,且具備向髓核細胞分化的潛能,常被作為退變髓核生物學(xué)修復(fù)的種子細胞。然而干細胞在退變椎間盤惡劣的微環(huán)境中分化困難,嚴重制約了髓核退變的干細胞治療。生物支架充當干細胞的移植載體,同時也能為載荷干細胞生長提供特殊微環(huán)境,已成為基于干細胞的組織工程治療髓核退變的關(guān)鍵要素之一。然而現(xiàn)有的生物支架存在各種缺陷,因此迫切需要更為完善且適用于椎間盤的新型生物支架。髓核相關(guān)細胞外基質(zhì)Ⅱ型膠原（type Ⅱ collagen,CII）和硫酸軟骨素（chondroitin sulfate,CS）是正常髓核的重要組分,且自身具有生物活性,對干細胞生存、分化等具有重要調(diào)節(jié)作用,是構(gòu)建應(yīng)用于髓核的生物支架的優(yōu)良選擇。本研究旨在利用髓核相關(guān)細胞外基質(zhì)CII和CS構(gòu)建預(yù)混ADSC的可注射凝膠樣細胞遞送系統(tǒng),并在體外驗證該系統(tǒng)誘導(dǎo)載荷A... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

CII和CS對ADSCs細胞增殖，

當京尼平濃度超過０．０２％?（ｗ／ｖ）時，ＡＤＳＣｓ在３，?７，和１４天的ＬＤＨ??釋放均顯著上升，尤其在第７和１４天（／Ｋ０．０５）。當京尼平濃度小于等于０．０２％??（ｗ／ｖ）時，細胞ＬＤＨ釋放無明顯升高（圖２．３Ａ）。此外，當京尼平濃度大于０．０２％??（ｗ／ｖ）時，ＣＣＳＡ系統(tǒng)中ＡＤＳＣｓ的細胞增殖在第７和１４天明顯降低（／？＜０．０５）。??尤其是在第１４天，０．５和１％?（ｗ／ｖ）京尼平構(gòu)建的ＣＣＳＡ中ＡＤＳＣｓ細胞增殖為０，??可見該京尼平濃度對細胞毒性過大。０．０１和０．０２％?（ｗ／ｖ）的京尼平濃度在第７天??時無顯著性差異，但是在第１４天時，０．０２％組的細胞增殖在各組中為最高，明顯??２９??

?２第一章實驗結(jié)果??高于０．０１％組（ｐ＜０．０５）（圖２．３Ｂ）。不同濃度京尼平交聯(lián)后的生物支架微觀結(jié)構(gòu)存??在不同，當未經(jīng)交聯(lián)時，生物支架呈多孔狀，并具有平滑且規(guī)則的骨架結(jié)構(gòu)。在??經(jīng)京尼平交聯(lián)后，生物支架微觀結(jié)構(gòu)變得粗糙與扭曲，孔狀結(jié)構(gòu)減少且不規(guī)則，??隨著京尼平濃度上升，生物支架微觀結(jié)構(gòu)的這種變化更加明顯。０．０１和０．０２％（ｗ／ｖ）??京尼平濃度交聯(lián)后的微觀結(jié)構(gòu)較為接近，且形態(tài)變化相對較�。▓D２．３Ｃ－Ｈ）。因此??后續(xù)實驗采用０．０２％?（ｗ／ｖ）京尼平作為最適交聯(lián)濃度。??Ａ?ｉ２＃＿?Ｂ?丨‘－??＇?ｉｉｉｌｉｉ?ｉａｉｉｌ?ｉｉｉｉｉｌ?匕“…ｌｌＬ?－??§．？！?？．！?（３?Ｉ?？?Ｕｌ?？．ｌ?氤》?Ｉ?？?１．１?Ｍ?Ｉ?？鑣？＿！?Ｉ．Ｍ?籲．１?魯Ｉ?？?？．？！?ｔ．ｌ?Ｍ?Ｉ?？?（．１?ｍ?Ｉ??Ｉｔａｉｃ？４？Ｔ＞?）?１?Ｕ?ＴｈＭ?（？■））?］?Ｔ?Ｍ??Ｗ??圖２．３最適京尼平交聯(lián)濃度的篩選。（Ａ）不同濃度京尼平交聯(lián)后的ＣＣＳＡ對其中??載荷ＡＤＳＣｓ的毒性作用。（Ｂ）不同濃度京尼平交聯(lián)后的ＣＣＳＡ對其中載荷ＡＤＳＣｓ??細胞增殖的影響。（Ｃ）?０％，?（Ｄ）?０．０１％，?（Ｅ）?０．０２％，?（Ｆ）?０．１％，?（Ｇ）?０．５％，和??（Ｈ）?１％京尼平交聯(lián)后的ＣＩＩ／ＣＳ水凝膠在掃描電子顯微鏡下的微觀結(jié)構(gòu)圖，比例??尺＝１００叫１。數(shù)據(jù)以均值±標準差的方式呈現(xiàn)；與對照組相比，＊／？＜０．０５，?＊＊／？＜０．０］；??與０．０２％京尼平組相比


本文編號：3546027