第一部分褪黑素對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞DNA甲基化的影響目的:探討褪黑素對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞（HSFB）DNA甲基化的影響方法:1.收集人增生性瘢痕組織12例,組織塊法分離培養(yǎng)取第4代人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞,用免疫細(xì)胞化學(xué)法（ICC）鑒定成纖維細(xì)胞。2.酶消化法消化細(xì)胞,接種于96孔板中,分別加入不同濃度褪黑素組(0、1x10^-5、1x10^-3、1mmol/L)。分組培養(yǎng)48h后,采用細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒（WST-1）檢測(cè)成纖維細(xì)胞增殖活性,倒置顯微鏡觀察其形態(tài)變化,選取合適濃度的褪黑素實(shí)驗(yàn)組作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)組用藥濃度;3.實(shí)驗(yàn)分成兩組:（1）對(duì)照組:細(xì)胞消化傳代后,加入4ml FBS,培養(yǎng)48h;（2）褪黑素組:細(xì)胞消化傳代后,加入含有褪黑素濃度為10^-3mmol/L的10%FBS 4ml,培養(yǎng)48小時(shí)后收集細(xì)胞;采用熒光定量聚合酶反應(yīng)（realtime fluorescence quantitative PCR,RT-PCR）和免疫印跡法（Western Blot）檢測(cè)對(duì)照組與褪黑素組間成纖維細(xì)胞DNMT1 ... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞形態(tài)及鑒定（倒置相差顯微鏡x10A：組織塊法培養(yǎng)成纖維

暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文16圖2不同濃度褪黑素對(duì)成纖維細(xì)胞形態(tài)的影響（倒置相差顯微鏡x10A：對(duì)照組B：1x10-5mmol/L褪黑素C:1x10-3mmol/L褪黑素D:1mmol/L褪黑素）3.褪黑素對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖的影響WST-1結(jié)果顯示：（1）對(duì)照組和褪黑素濃度為1x10-5mmol/L組相比，成纖維細(xì)胞的增殖活力無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；（2）與對(duì)照組相比，褪黑素濃度為1x10-3、1mmol/L對(duì)人瘢痕成纖維細(xì)胞的增殖具有抑制作用，成纖維細(xì)胞增殖活力明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；（3）褪黑素濃度為1mmol/L與濃度為1x10-5、1x10-3mmol/L的褪黑素組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果所示，選取濃度為10-3mmol/L作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)組用藥濃度（如圖2，表2，圖3）；

表 3 褪黑素對(duì) HSFB 中 DNMT1 mRNA 表達(dá)的影響（n=10，x±s）組別 DNMT1 mRNA 表達(dá)量對(duì)照組 1.00±0.082褪黑素組 1.86±0.094** 與對(duì)照組比較，P＜0.05

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]褪黑素對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞分化命運(yùn)的影響及表觀遺傳學(xué)機(jī)制研究[D]. 李羨.山東大學(xué) 2017

碩士論文
[1]褪黑激素對(duì)增生性瘢痕形成影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D]. 武明偉.暨南大學(xué) 2014
[2]褪黑激素對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化的影響及機(jī)制研究[D]. 杜高偉.暨南大學(xué) 2013
[3]褪黑素與增生性瘢痕關(guān)系的研究[D]. 張俊成.暨南大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3538540