目的:建立CLARITY技術(shù)所需實(shí)驗(yàn)平臺(tái),并探索通過(guò)CLARITY技術(shù)制備透明腸組織所需要的實(shí)驗(yàn)條件,建立可靠的透明腸組織的制備方法;通過(guò)對(duì)CLARITY技術(shù)制備的透明腸組織結(jié)構(gòu)的觀察,探討該技術(shù)用于胃腸動(dòng)力領(lǐng)域研究的可行性。方法:1.CLARITY技術(shù)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的建立所需儀器主要包括通風(fēng)櫥、氮?dú)夤�、真空泵�?℃冰箱、水浴箱、電泳槽、鉑電極、恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)浴、蠕動(dòng)泵、電泳儀、標(biāo)本盒、分流器和過(guò)濾器等,其中電泳設(shè)備的主要由電泳槽、鉑電極、恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)浴、蠕動(dòng)泵、電泳儀等通過(guò)橡膠軟管路及電路連接組成。12.取7周齡熒光小鼠8只,分為對(duì)照組（A組）、實(shí)驗(yàn)組（B組）兩組,A組為采用傳統(tǒng)小鼠組織切片;B組采用CLARITY技術(shù)制備小鼠透明組織。A組,截取長(zhǎng)約2mm十二指腸遠(yuǎn)端標(biāo)本,4%多聚甲醛固定。將組織塊經(jīng)冰凍后,沿垂直于小腸長(zhǎng)軸方向進(jìn)行連續(xù)切片,觀察組織切片結(jié)構(gòu)。B組小鼠行水凝膠心臟灌注、胃腸組織水凝膠包埋、水凝膠電泳、折射率均勻化,通過(guò)雙光子顯微鏡觀察組織結(jié)構(gòu)。結(jié)果:1.通過(guò)參考相關(guān)文獻(xiàn)購(gòu)買(mǎi)所需實(shí)驗(yàn)器材,構(gòu)建并完善CLARITY技術(shù)實(shí)驗(yàn)平臺(tái),探索成熟的透明組織制備方法。2.兩組標(biāo)本制備完成后,... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CLARITY技術(shù)步驟示意圖

電泳設(shè)備A為恒溫?cái)嚢璺磻?yīng)浴，B為蠕動(dòng)泵，C為電泳儀

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文 CLARITY 技術(shù)設(shè)備的構(gòu)建及其用于腸道組織結(jié)構(gòu)的研究7） 橡膠軟管及電線：橡膠軟管需耐高溫及腐蝕，用于 SDS 洗滌液與電泳槽之間的流通；電線及鱷魚(yú)夾用于電泳儀及電泳槽之間的連接。8） 分流器和過(guò)濾器：過(guò)濾器用于對(duì)緩沖液及標(biāo)本雜質(zhì)的過(guò)濾。分流器則用于對(duì)緩沖液的分流，以便多個(gè)標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行電泳。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]胃腸運(yùn)動(dòng)失調(diào)性疾病中Cajal間質(zhì)細(xì)胞功能失調(diào)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 董方,賀晨宇,商建峰,陳東.  中華病理學(xué)雜志. 2017 (11)
[2]生物組織光學(xué)透明技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 李亞敏,薛成志,李貴葉,胡章立,阮雙琛,陳玲玲.  生物學(xué)雜志. 2017(06)
[3]Intestinal neuronal dysplasia type B: A still little known diagnosis for organic causes of intestinal chronic constipation[J]. Pedro Luiz Toledo de Arruda Louren??o,Simone Antunes Terra,Erika Veruska Paiva Ortolan,Maria Aparecida Marchesan Rodrigues.  World Journal of Gastrointestinal Pharmacology and Therapeutics. 2016(03)
[4]腸神經(jīng)系統(tǒng)的基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展[J]. 方秀才.  臨床消化病雜志. 2009(02)



本文編號(hào)：3538007