研究背景:圍術(shù)期卒中（Perioperative Stoke）是一種致殘率高,致死率高的圍術(shù)期并發(fā)癥,且目前尚無(wú)特異性治療藥物。受體相互作用蛋白激酶1（Receptor interacting protein kinase 1,RIPK1）作為細(xì)胞內(nèi)重要的骨架蛋白與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子,參與程序性細(xì)胞壞死,細(xì)胞凋亡及炎癥等多條通路的調(diào)控,但其在圍術(shù)期卒中中的作用尚未完全明確。研究目的及意義:明確RIPK1激酶活性在圍術(shù)期卒中致病機(jī)理中的作用,并對(duì)其可能的機(jī)制進(jìn)行探討,從而為圍術(shù)期卒中的治療提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù),為神經(jīng)保護(hù)藥物的研發(fā)提供新的思路。研究方法:8-10周齡雄性C57BL/6背景野生型（WT）小鼠,隨機(jī)分為sham組與MCAO組。通過線栓法建立急性腦缺血再灌注損傷模型,MCAO組缺血1h后拔出線栓,sham組當(dāng)線栓插入遇到阻力后即刻拔出。于再灌注24h后收集腦組織,通過qRT-PCR法檢測(cè)RIPK1分子mRNA水平的表達(dá);通過免疫印跡法檢測(cè)RIPK1蛋白水平的表達(dá)。另取8-10周齡雄性C57BL/6背景野生型（WT）與RIPK1激酶缺失(Ripk1^Δ/Δ,Ripk1... 

【文章來(lái)源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MCAO模型中線栓入路示意圖

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文21所有數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示,統(tǒng)計(jì)分析與作圖由GraphPadPrism7軟件完成，且采用T檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)。（*表示P值小于0.05，**表示P值小于0.01,***表示P值小于0.001,****表示P值小于0.0001）。3結(jié)果3.1成功建局灶性腦缺再灌注損傷模型分別取造模24h后sham組與MCAO組小鼠腦組織進(jìn)行切片并TTC染色，結(jié)果如圖2-2-A所示，左側(cè)縱列為sham組從前至后排列的鼠腦切片；右側(cè)縱列為MCAO組從前至后排列的鼠腦切片。sham組小鼠腦組織結(jié)構(gòu)完整，雙側(cè)對(duì)稱，且均勻地被染成紅色；而MCAO組小鼠病灶側(cè)體積明顯增加，大腦中動(dòng)脈供血區(qū)域出現(xiàn)白色梗塞病灶。對(duì)梗塞體積進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，腦梗塞率=梗塞體積/半側(cè)大腦體積×100%。統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖2-2-B所示，sham組腦梗塞率為0±0,（n=10）；MCAO組腦梗塞率為0.5933±0.02843,（n=10），且兩組之間P<0.0001，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以上結(jié)果說明本實(shí)驗(yàn)采用的模型相對(duì)穩(wěn)定。圖2-2MCAO模型中的腦梗死體積增加A．sham組與MCAO組小鼠腦組織切片TTC染色。紅色部分為正常組織，白色部分為梗塞區(qū)域。B．sham組與MCAO組小鼠腦梗塞體積比例�！�****”表示P<0.0001。Figure2-2InfarctionvolumeofthebrainwasincreasedinMCAO

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文22A．TTCstainingofthebraintissueslicesinshamgroupandMCAOgroup.Theredpartisthenormalareaandthewhitepartistheinfarctionarea.B.PercentageoftheinfarctionvolumeintherightbrainbetweenshamgroupandMCAOgroup.“****”meansP<0.0001.3.2.腦缺再灌注損傷增加神經(jīng)為學(xué)評(píng)分本實(shí)驗(yàn)分別采用Longa5分制評(píng)分法131,132和Clark評(píng)分法133兩種神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分系統(tǒng)對(duì)造模后小鼠的神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)估。如圖2-3-A所示，與sham組相比，MCAO組小鼠Longa評(píng)分升高（1.2±0.1333,n=10，P<0.0001）；如圖2-3-B所示，與sham組相比，MCAO組小鼠Clark一般功能損傷評(píng)分顯著升高（1.5±0.2236,n=10，P<0.0001）；如圖2-3-C所示，與sham組相比，MCAO組的Clark局灶性功能損傷評(píng)分亦顯著升高（9.9±0.5667,n=10，P<0.0001）。綜上所述，與sham組相比，MCAO組小鼠兩種神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分均增加。此結(jié)果說明，造模后小鼠的神經(jīng)功能受到一定程度的損傷。圖2-3MCAO建模后小鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分變化A.sham組與MCAO組的Longa評(píng)分；B.sham組與MCAO組的Clark一般功能損傷評(píng)分；C.sham組與MCAO組的Clark局灶性功能損傷評(píng)分�！�****”表示P<0.0001。Figure2-3NeurologicalscoreofmouseafterMCAOA.LonganeurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup；B.ClarkgeneralneurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup；C.ClarkfocalneurologicalscoreofmouseinshamgroupandMCAOgroup.“****”meansP<0.0001.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]三種神經(jīng)功能評(píng)分在鼠類局灶性腦缺血模型評(píng)價(jià)中的比較[J]. 程發(fā)峰,宋文婷,郭少英,鐘相根,魯藝,王慶國(guó).  中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志. 2011(04)



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