目的:探討OCT4依賴ERα通過DNMT1/ISL1/ERK軸抑制乳腺癌細胞增殖的作用,為不同分型乳腺癌中靶向OCT4治療提供理論和實驗依據(jù)。方法與結(jié)果:1.乳腺癌組織和細胞中OCT4的表達（1）Oncomine數(shù)據(jù)庫和免疫組織化學方法分析和檢測OCT4在乳腺癌組織中的表達。結(jié)果顯示,與乳腺上皮組織相比,OCT4在乳腺癌組織中表達明顯低于乳腺上皮組織。（2）Expression Atlas數(shù)據(jù)庫、RT-PCR和Western blot方法分析和檢測OCT4在不同乳腺癌細胞中的表達。結(jié)果顯示,OCT4在乳腺癌細胞MDA-MB-231和MCF-7中表達明顯低于乳腺上皮細胞HBL-100。以上結(jié)果表明,OCT4在乳腺癌組織和細胞中低表達。2.建立過表達OCT4的乳腺癌細胞系及鑒定利用慢病毒轉(zhuǎn)染方法在MCF-7和MDA-MB-231細胞中過表達OCT4,并用RT-PCR、Western blot和細胞免疫熒光實驗鑒定OCT4的表達及定位。結(jié)果顯示,MCF-7-OCT4和MDA-MB-231-OCT4細胞中OCT4高表達,主要定位于細胞核。以上結(jié)果表明,成功建立過表達OCT4的乳腺癌細胞系。3.... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

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Oncomine數(shù)據(jù)庫分析OCT4在乳腺癌組織中的表達Fig.3.1(A-D)ThemRNAexpressionofOCT4wasdetectedinbreastandinvasivebreastcarcinomainallofthefourprobes(59738_at,132563_at,144601_at,214841_at)inFinakbreastdataset,Oncomine.

圖 3.2 免疫組織化學檢測 OCT4 在乳腺癌組織中的表達及其定位Fig. 3.2 OCT4 expression was determined by immunohistochemistry assay in breastand breast cancer tissues. Images were taken under light microscope at 200× and 400×magnification. ***, P<0.001.表 3.1 OCT4 在不同分型乳腺癌組織中的表達Molecular subtype Receptor status OCT4 expression P valueNormal (n=10) + 0.001LuminalA(n=10) ER+, PR+, HER2- -Luminal B (n=10) ER+, PR+, HER2+ -HER2 (n=10) ER-, PR-, HER2+ -TNBC (n=10) ER-, PR-, HER2- -

圖 3.3 Expression Atlas 數(shù)據(jù)庫中 OCT4 在乳腺癌細胞中的表達Fig. 3.3 The mRNAexpression of OCT4 was down-regulated in MCF-7, UACC-812and ZR-75-1 cells compared with HBL-100 and MCF-10Acells in ExpressionAtlasdataset.3.1.2.2 RT-PCR 和 Western blot 檢測乳腺癌細胞中 OCT4 的表達利用 RT-PCR 和 Western blot 方法分別檢測乳腺上皮細胞 HBL-100、MDA-MB-231及MCF-7細胞中OCT4的表達。結(jié)果顯示，MDA-MB-231和MCF-7細胞中 OCT4 的表達明顯低于 HBL-100 細胞，如圖 3.4 所示。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Genome-wide analysis of OCT4 binding sites in glioblastoma cancer cells[J]. Xue-feng FANG 1,2,Wei-yi ZHANG 1,2,Na ZHAO 2,Wei YU 2,Dong DING 2,Xu HONG 2,Li-sha LI 2,Hua-rong ZHANG 2,Shu ZHENG 1,Biao-yang LIN 2(1 Key Laboratory of Cancer Prevention and Intervention of Ministry of Education,Key Laboratory of Molecular Biology in Medical Sciences of Zhejiang Province,Cancer Institute,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310009,China) (2 Systems Biology Division,Zhejiang-California International Nanosystems Institute (ZCNI),Zhejiang University,Hangzhou 310029,China).  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2011(10)



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